Évaluation des marqueurs de méthylation de l'ADN pour la stratification du risque de cancer de l'endomètre à l'aide d'échantillons d'urine et vaginaux auto-prélevés par les patientes et d'échantillons cervicaux prélevés par les cliniciens chez des femmes présentant des saignements post-ménopausiques

CONTEXTE :

L'incidence du cancer de l'endomètre (CE) est en augmentation et constitue le quatrième type de cancer le plus fréquent chez les femmes dans le monde, avec environ 417 000 nouveaux cas et 90 000 décès par an. De plus, le CE est le cancer gynécologique le plus courant dans les pays développés, y compris le Danemark, avec environ 800 nouveaux cas et 90 décès annuels. Un diagnostic précoce est essentiel car le pronostic pour les femmes à un stade avancé de CE est sombre. Il n'existe pas de dépistage pour le CE et le symptôme clinique le plus couramment observé est le saignement post-ménopausique (SPM), une affection courante touchant environ 11 % des femmes ménopausées. Comme 90 % des cas de CE sont précédés d'un SPM, une orientation vers des soins gynécologiques spécialisés via des parcours de soins pour patients cancéreux est indiquée pour toutes les Danoises présentant un SPM, ce qui génère de l'anxiété chez les femmes et des coûts élevés pour le système de santé. Cependant, seulement 5 à 10 % des femmes présentant un SPM ont un CE. Dans le monde, l'évaluation par échographie transvaginale (ETV) de l'endomètre (seuil : épaisseur ≥ 5 mm et/ou muqueuse irrégulière de la cavité utérine) est utilisée pour identifier les femmes avec SPM présentant le risque de cancer le plus élevé et nécessitant donc une biopsie de l'endomètre avec ou sans hystéroscopie. Bien que l'évaluation par ETV soit très sensible (94,8 %), elle souffre d'une faible spécificité (51 %), entraînant un nombre élevé de procédures invasives inutiles chez les femmes en bonne santé. De plus, le programme diagnostique dépend de spécialistes qualifiés pour l'évaluation échographique, le prélèvement endométrial ainsi que l'examen histopathologique. Cela renforce le besoin clinique urgent et non satisfait d'un test plus simple, non invasif, réalisé par la patiente et plus spécifique pour aider au diagnostic du CE.

Cette étude vise à déterminer si le test de méthylation de l'ADN dans des échantillons d'urine et vaginaux prélevés par les patientes constitue une alternative cliniquement sûre et non invasive pour évaluer le risque de CE. Le test des niveaux élevés d'hyperméthylation de l'ADN de gènes spécifiques au cancer s'est avéré prometteur comme biomarqueur pour la détection des cancers à un stade précoce, y compris le cancer du col de l'utérus et de l'endomètre. L'hyperméthylation de l'ADN a été liée à la suppression des gènes suppresseurs de tumeurs, contribuant ainsi au développement du cancer. Biologiquement, la possibilité d'utiliser des échantillons vaginaux et urinaires pour la détection du CE par test de méthylation de l'ADN s'explique par la libération locale d'ADN et de fragments cellulaires dérivés du CE dans les débris vaginaux et l'urine, ainsi que par l'excrétion transrénale d'ADN circulant libéré par la tumeur dans l'urine.

Principalement de petites études de preuve de concept et cas-témoins ont montré la faisabilité de détecter le CE en utilisant le test de méthylation de l'ADN dans le plasma, des échantillons vaginaux auto-prélevés et des frottis cervicaux prélevés par des cliniciens. Cependant, le premier article rapportant la valeur diagnostique de l'analyse de la méthylation de l'ADN dans des échantillons vaginaux et urinaires comme biopsie liquide pour le CE a été publié l'année dernière par le co-superviseur, le Pr Steenbergen. Ici, des données cas-témoins ont révélé d'excellentes performances diagnostiques des marqueurs de méthylation de l'ADN spécifiques au CE dans des échantillons d'urine et vaginaux prélevés par les patientes, avec des sensibilités de 89-90 % et des spécificités de 90-92 % pour la détection du CE en utilisant des panels de marqueurs incluant : CDH13, GHSR, SST, CDO1 et ZIC1.

Une seule étude de cohorte prospective a comparé la performance diagnostique du test de méthylation de l'ADN dans des échantillons cervico-vaginaux prélevés par des cliniciens avec l'évaluation conventionnelle par ETV en termes de détection de la présence ou de l'absence de CE chez les femmes de 45 ans et plus présentant des saignements utérins anormaux. Les résultats ont démontré que le test de méthylation de l'ADN WID-qEC (marqueurs : ZSCAN12 et GYPC) avait une sensibilité égale (90,9 %) et une spécificité supérieure (92,1 contre 79,1 %) par rapport à l'évaluation par ETV.

Cependant, ce sera la première étude à comparer le test de méthylation de l'ADN dans des échantillons d'urine et vaginaux prélevés par les patientes à l'évaluation par ETV.

CONCEPTION DE L'ÉTUDE : Étude comparative de précision diagnostique, comparant les méthodes de tests diagnostiques au moment du diagnostic ainsi que la sécurité à long terme après deux ans.

MATÉRIELS ET MÉTHODES :

Les échantillons vaginaux, urinaires et cervicaux seront stockés dans une biobanque au Département de Pathologie de l'Hôpital Régional de Randers (RHR) jusqu'à leur expédition pour l'analyse du test de méthylation de l'ADN par PCR quantitative spécifique de la méthylation (qMSP) dans le laboratoire du Pr Steenbergen au Centre Médical Universitaire d'Amsterdam, aux Pays-Bas. Tous les échantillons seront testés pour les marqueurs de méthylation : trois pour les échantillons vaginaux (CDO1, GHSR, ZIC1), trois pour l'urine (GHSR, CDH13, SST) et trois pour les échantillons cervicaux (CDH13 + CDO1 + ZIC1). Les résultats de l'évaluation par ETV et des biopsies de l'endomètre seront extraits de la Banque de Données Pathologiques Nationale Danoise et du journal patient électronique lié au patient via le Système d'Enregistrement Civil au Danemark, où tous les résidents ont un code unique à 10 chiffres (numéro CPR), auquel toutes les données de santé sont liées.

OBJECTIFS :

1. Déterminer la précision diagnostique du test de méthylation de l'ADN dans des échantillons d'urine complète et vaginaux prélevés par les patientes, ainsi que dans des échantillons cervicaux prélevés par des cliniciens, pour détecter le CE chez les femmes présentant des saignements post-ménopausiques, et 2) comparer la précision diagnostique du test de méthylation de l'ADN à l'évaluation diagnostique actuelle par ETV.
2. Évaluer les préférences et les expériences concernant le type d'évaluation diagnostique, incluant les échantillons urinaires, vaginaux et cervicaux ainsi que l'ETV.

HYPOTHÈSES :

1. Le test de méthylation de l'ADN dans les échantillons d'urine peut détecter le CE avec une sensibilité comparable et une spécificité supérieure par rapport à l'ETV, et avec une précision plus élevée que le test de méthylation de l'ADN dans les échantillons vaginaux et cervicaux.
2. L'analyse de la méthylation de l'ADN dans les échantillons d'urine aura un risque négatif de CE à long terme après 2 ans équivalent à celui de l'ETV, mais meilleur que celui des échantillons vaginaux et cervicaux.

PLAN DE RECHERCHE ET FAISABILITÉ L'étude sera menée en collaboration entre la Clinique Universitaire de Dépistage du Cancer, le Département des Programmes de Santé Publique, le Département de Pathologie du RHR et avec les départements gynécologiques du Danemark Central (Randers et Aarhus) et de la Région du Danemark du Sud (Odense) agissant comme sites d'inclusion. Des installations de laboratoire de pointe sont disponibles dans le laboratoire du Pr Steenbergen à l'Amsterdam UMC, soutenant la faisabilité des études.

PERSPECTIVES ET COMMUNICATION Si elle réussit, la recherche aura un impact international et aboutira à un nouvel outil diagnostique qui permettra de différencier les femmes avec SPM qui ont ou non besoin d'une orientation spécialisée via les parcours de soins pour patients cancéreux pour subir des biopsies endométriales invasives. Cela facilitera un diagnostic rapide, réduira l'anxiété des patientes et allégera la pression sur le système de santé. Les résultats seront publiés dans des revues internationales à comité de lecture, présentés lors de conférences et concluent par une thèse de doctorat. Les résultats seront diffusés dans les forums cliniques pertinents et intégrés dans les directives nationales et internationales.