Evaluación de marcadores de metilación del ADN para la estratificación del riesgo de cáncer de endometrio mediante muestras de orina y vaginales recogidas por la paciente y muestras cervicales recogidas por el clínico de mujeres con hemorragia posmenopáusica

ANTECEDENTES:

La incidencia del cáncer de endometrio (CE) está aumentando y es el cuarto tipo de cáncer más común en mujeres a nivel mundial, con aproximadamente 417,000 nuevos casos y 90,000 muertes anuales. Además, el CE es el cáncer ginecológico más común en países desarrollados, incluida Dinamarca, con alrededor de 800 nuevos casos y 90 muertes anuales. El diagnóstico temprano es esencial, ya que el pronóstico para mujeres con un estadio avanzado de CE es pobre. No existe cribado para el CE y el síntoma clínico más comúnmente observado es el sangrado postmenopáusico (SPM), que es una condición común que afecta aproximadamente al 11% de las mujeres postmenopáusicas. Dado que el 90% de los casos de CE están precedidos por SPM, se indica la derivación a atención ginecológica especializada a través de vías de pacientes con cáncer para todas las mujeres danesas con SPM, lo que causa ansiedad entre las mujeres y altos costos sanitarios. Sin embargo, solo el 5-10% de las mujeres que presentan SPM tienen CE. A nivel mundial, la evaluación por ecografía transvaginal (ETV) del endometrio (umbral: grosor ≥5 mm y/o revestimiento irregular de la cavidad uterina) se utiliza para identificar a mujeres con SPM que tienen el mayor riesgo de cáncer y, por lo tanto, requieren una biopsia endometrial con o sin histeroscopia. Si bien la evaluación por ETV es altamente sensible (94.8%), sufre de baja especificidad (51%), causando un alto número de procedimientos invasivos innecesarios en mujeres sanas. Además, el programa diagnóstico depende de especialistas capacitados para la evaluación por ultrasonido, el muestreo endometrial y el examen histopatológico. Esto refuerza la necesidad clínica urgente y no satisfecha de una prueba más simple, no invasiva, proporcionada por el usuario y más específica para ayudar en el diagnóstico del CE.

Este estudio tiene como objetivo determinar si la prueba de metilación del ADN en muestras de orina y vaginales recolectadas por pacientes es una alternativa clínicamente segura y no invasiva para determinar el riesgo de CE. La prueba de niveles elevados de hipermetilación del ADN de genes específicos del cáncer ha demostrado proporcionar un biomarcador prometedor para la detección de cánceres en estadios tempranos, incluidos el cáncer cervical y endometrial. La hipermetilación del ADN se ha relacionado con el silenciamiento de genes supresores de tumores, contribuyendo así al desarrollo del cáncer. Biológicamente, la capacidad de usar material vaginal y de orina para la detección de CE mediante pruebas de metilación del ADN se explica por la liberación local de ADN y fragmentos celulares derivados del CE en los desechos vaginales y la orina, así como la excreción transrenal de ADN circulante liberado por el tumor en la orina.

Principalmente, pequeños estudios de prueba de concepto y de casos y controles han mostrado la viabilidad de detectar CE mediante pruebas de metilación del ADN en plasma, muestras vaginales auto-recolectadas y raspados cervicales recolectados por clínicos. Sin embargo, el primer artículo que reporta el valor diagnóstico del análisis de metilación del ADN en muestras vaginales y orina como biopsia líquida para el CE fue publicado el año pasado por el co-supervisor Prof. Steenbergen. Aquí, los datos de casos y controles revelaron un excelente rendimiento diagnóstico de marcadores de metilación del ADN específicos del CE en muestras de orina y vaginales recolectadas por pacientes, con sensibilidades del 89-90% y especificidades del 90-92% para la detección de CE utilizando paneles de marcadores que incluyen: CDH13, GHSR, SST, CDO1 y ZIC1.

Solo un estudio de cohorte prospectivo ha comparado el rendimiento diagnóstico de la prueba de metilación del ADN en muestras cervicovaginales recolectadas por clínicos con la evaluación convencional por ETV en términos de detectar la presencia o ausencia de CE en mujeres de 45 años o más con sangrado uterino anormal. Los resultados demostraron que la prueba de metilación del ADN WID-qEC (marcadores: ZSCAN12 y GYPC) tiene una sensibilidad igual (90.9%) y una especificidad superior (92.1 vs 79.1%) en comparación con la evaluación por ETV.

Sin embargo, este será el primer estudio en comparar la prueba de metilación del ADN en muestras de orina y vaginales recolectadas por pacientes con la evaluación por ETV.

DISEÑO DEL ESTUDIO: Estudio de precisión diagnóstica comparativa, que compara métodos de prueba diagnóstica en el momento del diagnóstico, así como la seguridad a largo plazo después de dos años.

MATERIALES Y MÉTODOS:

Las muestras vaginales, de orina y cervicales se almacenarán en un biobanco en el Dept. de Patología, Hospital Regional de Randers (RHR) hasta su envío para el análisis de prueba de metilación del ADN utilizando PCR cuantitativa específica de metilación (qMSP) en el laboratorio del Prof. Steenbergen en el Centro Médico de la Universidad de Ámsterdam, Países Bajos. Todas las muestras se analizarán para marcadores de metilación, tres para muestras vaginales (CDO1, GHSR, ZIC1), tres para orina (GHSR, CDH13, SST) y tres para muestras cervicales (CDH13 + CDO1 + ZIC1). Los resultados de la evaluación por ETV y las biopsias endometriales se recuperarán de la Base de Datos Nacional de Patología de Dinamarca y del historial clínico electrónico vinculado al paciente a través del Sistema de Registro Civil en Dinamarca, donde todos los residentes tienen un código único de 10 dígitos (número CPR), al cual se vinculan todos los datos de salud.

OBJETIVOS:

1. Determinar la precisión diagnóstica de la prueba de metilación del ADN en muestras de orina completa y vaginales recolectadas por pacientes, así como en muestras cervicales recolectadas por clínicos para detectar CE entre mujeres con sangrado postmenopáusico, y 2) comparar la precisión diagnóstica de la metilación del ADN con la evaluación diagnóstica actual con ETV.
2. Evaluar las preferencias y experiencias para el tipo de evaluación diagnóstica, incluyendo muestras de orina, vaginales y cervicales y ETV.

HIPÓTESIS:

1. La prueba de metilación del ADN en muestras de orina puede detectar CE con una sensibilidad comparable y una especificidad superior en comparación con la ETV y con mayor precisión que la prueba de metilación del ADN en muestras vaginales y cervicales.
2. El análisis de metilación del ADN en muestras de orina tendrá un riesgo negativo de CE a largo plazo después de 2 años equivalente al de la ETV, pero mejor que el de muestras vaginales y cervicales.

PLAN DE INVESTIGACIÓN Y FACTIBILIDAD El estudio se llevará a cabo en colaboración entre la Clínica Universitaria para Cribado de Cáncer, Dept. de Programas de Salud Pública, Dept. de Patología, RHR y con departamentos ginecológicos en Dinamarca Central (Randers y Aarhus) y la Región de Dinamarca Meridional (Odense) que actúan como sitios de inclusión. Existen instalaciones de laboratorio de última generación en el laboratorio del Prof. Steenbergen en Amsterdam UMC, lo que respalda la factibilidad de los estudios.

PERSPECTIVAS Y COMUNICACIÓN Si tiene éxito, la investigación tendrá impacto internacional y resultará en una nueva herramienta diagnóstica que diferenciará entre mujeres con SPM que necesitan o no derivación especializada a través de vías de pacientes con cáncer para realizar biopsias endometriales invasivas. Esto facilitará un diagnóstico oportuno, reducirá la ansiedad entre los pacientes y aliviará la presión sobre el sistema sanitario. Los resultados se publicarán en revistas internacionales revisadas por pares y se presentarán en conferencias, y se concluirán con una disertación de doctorado. Los resultados se distribuirán a foros clínicos relevantes y se implementarán en guías nacionales e internacionales.