Оценка маркеров метилирования ДНК для стратификации риска рака эндометрия с использованием собранных пациентками образцов мочи и вагинальных образцов, а также собранных клиницистами цервикальных образцов от женщин с постменопаузальным кровотечением

ОБЩАЯ ИНФОРМАЦИЯ:

Заболеваемость раком эндометрия (РЭ) растет, и это четвертый по распространенности тип рака у женщин во всем мире, с примерно 417 000 новых случаев и 90 000 смертей ежегодно. Более того, РЭ является наиболее распространенным гинекологическим раком в развитых странах, включая Данию, с примерно 800 новыми случаями и 90 смертями в год. Ранняя диагностика крайне важна, поскольку прогноз для женщин с поздней стадией РЭ неблагоприятный. Скрининга для РЭ не существует, и наиболее часто наблюдаемым клиническим симптомом является постменопаузальное кровотечение (ПМК), которое является распространенным состоянием, затрагивающим около 11% женщин в постменопаузе. Поскольку 90% случаев РЭ предшествует ПМК, направление на специализированную гинекологическую помощь через пути онкологических пациентов показано для всех датских женщин с ПМК, что вызывает тревогу у женщин и высокие затраты на здравоохранение. Однако только 5-10% женщин с ПМК имеют РЭ. Во всем мире трансвагинальное ультразвуковое исследование (ТВУЗИ) эндометрия (порог: толщина ≥5 мм и/или неровная выстилка полости матки) используется для выявления женщин с ПМК, имеющих самый высокий риск рака и, следовательно, нуждающихся в биопсии эндометрия с гистероскопией или без нее. Хотя ТВУЗИ обладает высокой чувствительностью (94,8%), оно страдает низкой специфичностью (51%), что приводит к большому количеству ненужных инвазивных процедур у здоровых женщин. Более того, диагностическая программа зависит от квалифицированных специалистов для проведения УЗИ, забора образцов эндометрия, а также гистопатологического исследования. Это подчеркивает клиническую срочную и неудовлетворенную потребность в более простом, неинвазивном, проводимом пользователем и более специфичном тесте для помощи в диагностике РЭ.

Данное исследование направлено на определение того, является ли тестирование метилирования ДНК в образцах мочи и влагалища, собранных пациентками, клинически безопасной неинвазивной альтернативой для определения риска РЭ. Тестирование на повышенные уровни гиперметилирования ДНК раково-специфичных генов показало себя многообещающим биомаркером для выявления рака на ранних стадиях, включая рак шейки матки и рак эндометрия. Гиперметилирование ДНК связано с подавлением генов-супрессоров опухолей, тем самым способствуя развитию рака. Биологически возможность использования материала из влагалища и мочи для выявления РЭ с помощью тестирования метилирования ДНК объясняется локальным выделением ДНК и клеточных фрагментов, происходящих из РЭ, в вагинальный детрит и мочу, а также транспеченочным выведением циркулирующей ДНК, выделенной опухолью, в мочу.

В основном небольшие пилотные исследования и исследования "случай-контроль" показали возможность выявления РЭ с помощью тестирования метилирования ДНК в плазме, самостоятельно собранных вагинальных образцах и соскобах шейки матки, собранных врачом. Однако первая статья, сообщающая о диагностической ценности анализа метилирования ДНК в вагинальных образцах и моче в качестве жидкой биопсии для РЭ, была опубликована со-руководителем проф. Стинбергеном только в прошлом году. Здесь данные "случай-контроль" показали превосходную диагностическую эффективность специфичных для РЭ маркеров метилирования ДНК в образцах мочи и влагалища, собранных пациентками, с чувствительностью 89-90% и специфичностью 90-92% для выявления РЭ с использованием панелей маркеров, включающих: CDH13, GHSR, SST, CDO1 и ZIC1.

Только одно проспективное когортное исследование сравнило диагностическую эффективность тестирования метилирования ДНК в цервиковагинальных образцах, собранных врачом, с традиционной оценкой ТВУЗИ с точки зрения обнаружения наличия или отсутствия РЭ у женщин в возрасте 45+ с аномальным маточным кровотечением. Результаты показали, что тест на метилирование ДНК WID-qEC (маркеры: ZSCAN12 и GYPC) имеет равную чувствительность (90,9%) и превосходящую специфичность (92,1 против 79,1%) по сравнению с оценкой ТВУЗИ.

Однако это будет первое исследование, сравнивающее тестирование метилирования ДНК в образцах мочи и влагалища, собранных пациентками, с оценкой ТВУЗИ.

ДИЗАЙН ИССЛЕДОВАНИЯ: Сравнительное исследование диагностической точности, сравнивающее методы диагностических тестов на момент постановки диагноза, а также долгосрочную безопасность через два года.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ:

Вагинальные, мочевые и цервикальные образцы будут храниться в биобанке при Департаменте патологии Региональной больницы Рандерса (RHR) до отправки на анализ тестирования метилирования ДНК с использованием количественной метилирование-специфичной ПЦР (qMSP) в лаборатории проф. Стинбергена в Медицинском центре Амстердамского университета, Нидерланды. Все образцы будут протестированы на маркеры метилирования: три для вагинальных образцов (CDO1, GHSR, ZIC1), три для мочи (GHSR, CDH13, SST) и три для цервикальных образцов (CDH13 + CDO1 + ZIC1). Результаты оценки ТВУЗИ и биопсий эндометрия будут получены из общенациональной Датской патологической базы данных и электронной истории болезни пациента, связанной с пациентом через систему гражданской регистрации в Дании, где все жители имеют уникальный 10-значный код (CPR-номер), с которым связаны все медицинские данные.

ЦЕЛИ:

1. Определить диагностическую точность тестирования метилирования ДНК в образцах полного объема мочи и влагалища, собранных пациентками, а также в цервикальных образцах, собранных врачом, для выявления РЭ среди женщин с постменопаузальным кровотечением, и 2) сравнить диагностическую точность теста на метилирование ДНК с текущей диагностической оценкой с помощью ТВУЗИ.
2. Оценить предпочтения и опыт в отношении типа диагностической оценки, включая образцы мочи, влагалища и шейки матки, а также ТВУЗИ.

ГИПОТЕЗЫ:

1. Тестирование метилирования ДНК в образцах мочи может выявлять РЭ с сопоставимой чувствительностью и превосходящей специфичностью по сравнению с ТВУЗИ и с более высокой точностью, чем тестирование метилирования ДНК в вагинальных и цервикальных образцах.
2. Анализ метилирования ДНК в образцах мочи будет иметь долгосрочный отрицательный риск РЭ через 2 года, эквивалентный ТВУЗИ, но лучше, чем вагинальные и цервикальные образцы.

ПЛАН ИССЛЕДОВАНИЯ И РЕАЛИЗУЕМОСТЬ Исследование будет проводиться в сотрудничестве между Университетской клиникой скрининга рака, Департаментом программ общественного здравоохранения, Департаментом патологии RHR и с гинекологическими отделениями в Центральной Дании (Рандерс и Орхус) и регионе Южной Дании (Оденсе), работающими в качестве центров включения. Передовые лабораторные мощности имеются в лаборатории проф. Стинбергена в Амстердамском UMC, что поддерживает реализуемость исследований.

ПЕРСПЕКТИВЫ И КОММУНИКАЦИЯ В случае успеха исследование будет иметь международное влияние и приведет к созданию нового диагностического инструмента, который позволит дифференцировать женщин с ПМК, которым нужна или не нужна специализированная консультация через пути онкологических пациентов для проведения инвазивных биопсий эндометрия. Это облегчит своевременную диагностику, снизит тревожность у пациенток и уменьшит нагрузку на систему здравоохранения. Результаты будут опубликованы в международных рецензируемых журналах и представлены на конференциях, а также будут завершены диссертацией на соискание степени PhD. Результаты будут распространены на соответствующих клинических форумах и внедрены в национальные, а также международные руководства.