Adipocitokinek az endometriumrákban

1. HÁTTÉR

   Az endometriumrák a női nemi szervek leggyakoribb rosszindulatú daganata. Ez a negyedik leggyakoribb rák az Egyesült Királyságban, 2017-ben körülbelül 9500 új esetet regisztráltak, és a jelenlegi életre szóló kockázat 36 nőből 1. Az endometriumrákban diagnosztizált nők száma évről évre növekszik. Az 1990-es évek eleje óta a méhrák előfordulási aránya csaknem háromötödével (55%) nőtt az Egyesült Királyságban (2015-2017). Az endometriumrák és az elhízás közötti összefüggés jól dokumentált. Az Egyesült Királyságban élő nők összes daganatos megbetegedésének 7,5%-a a túlsúlynak/elhízottságnak tulajdonítható (BMI ≥25 kg/m2). Az endometriumrák esetében ez a kockázat 34%-ra emelkedik. A metaanalízisek áttekintése kimutatta, hogy a méhnyálkahártya rák kockázata 16%-kal magasabb a felnőttkorban elért 5 kg-onként, 29%-kal magasabb a csípőkörfogat 10 cm-rel, és 27%-kal magasabb a derékbőség 10 cm-es növekedésével. Ez a magasabb endometriumrák kockázata megemelkedett BMI mellett mind a pre-, mind a posztmenopauzás nőknél jelen van. Ezenkívül az elhízott betegek rosszabb kimenetelűek, és több társbetegségük is előfordul, mint nem elhízott társaik.

   Túlsúlyos és elhízott állapotban a zsírszövet működése leromlik, ami krónikus gyulladásos állapotot eredményez. Ebben a gyulladásos állapotban a zsírsejtek és makrofágok számos molekulát, adipokineket és gyulladásos citokineket választanak ki, amelyek elősegíthetik a tumor fejlődését és angiogenezisét, valamint serkentik a sejtek adhézióját és migrációját.

   A tumorgenezis útjában a legtöbb érintett adipocitokin az adiponektin, leptin, tumornekrózis faktor-α (TNF-α), interleukin-6 (IL-6) és inzulinszerű növekedési faktor 1 és 2 (IGF 1 és 2).

   Az adipocitokinekkel kapcsolatos jelátviteli útvonalak fontosak a daganatok gyulladásos mikrokörnyezetének kialakulásában. Úgy gondolják, hogy ez a folyamat növeli az endometriumrák kockázatát azáltal, hogy indukálja a sejtproliferációt és megakadályozza a sejt apoptózisát. Az adiponektin, a legnagyobb mennyiségben előforduló adipokin, antiangiogén, gyulladásgátló és anti-apoptotikus tulajdonságokkal rendelkezik. Az emelkedett leptinszint elhízott állapotban elősegíti a gyulladást az IL-6, a TNFα, valamint az IL-1 és az IL-126 termelésének serkentésével. A leptin és az adiponektin szekréciója ellenszabályozott in vivo. Luhn et. al. kimutatta, hogy az adiponektin fordított összefüggést mutat az endometriumrák kockázatával, és a leptin közvetlen összefüggést mutat.

   Gyulladásos környezetben a makrofágok olyan erős gyulladáskeltő citokineket is kiválasztanak, mint például a TNF-α és az IL-6, amelyekről ismert, hogy számos transzkripciós faktort aktiválnak, amelyek szabályozzák az immunválaszokban, az apoptózis elleni küzdelemben, az angiogenezisben és a metasztázisban részt vevő gének expresszióját. Feltételezik, hogy a daganatképződésben szerepet játszó szabad gyökök képződnek, amelyek DNS-károsodást és károsodott DNS-javítást okoznak.

   A kutatások továbbá azt sugallták, hogy az inzulinszerű növekedési faktor (IGF) szisztémás szintje elhízás esetén a megnövekedett IGF-termelés vagy az IGF-kötő fehérje (IGFBP) termelésének lecsökkent szabályozása miatt szabályozatlan. Az IGF 1 növekedést és proliferációt elősegítő motor, gátló hatással van a sejthalálra, és számos neoplasztikus átalakulásban jelentős szerepet játszik.

   A fenti biomarkerek fiziológiailag összefüggenek egymással, és valószínűleg korlátozott számú mögöttes biológiai útvonalat tükröznek. Valószínűleg szinergikus kapacitással dolgoznak az endometriumrák kialakulásának kockázatának módosításában. Ha úgy találták, hogy a citokin expressziójának specifikus mintázatai előrejelzik a kedvezőtlen kimeneteleket, akkor a specifikus receptorok célba vehetők, mint az endometriumrák terápiás lehetősége11. Eddig egyetlen tanulmány sem vizsgálta ezeket a markereket együtt ugyanazon méhnyálkahártyarákos betegek szérum- és szövetmintáiban, hogy egészségesebb képet adjon a tumor genezisére, progressziójára és kimenetelére gyakorolt ​​hatásukról. Ezért ezt a vizsgálatot arra tervezték, hogy felmérje ennek a hat biomarkernek a prognosztikai jelentőségét az endometriumrákos betegek vérében és szövetében, és összefüggésbe hozza a szinteket a BMI-vel és a daganat típusával, az életkorhoz, a paritáshoz, a dohányzási állapothoz, a menopauza állapotához való igazítást követően, hormonpótló terápia (HRT)/hormonális fogamzásgátlás alkalmazása, valamint a cukorbetegség és a magas vérnyomás prevalenciája.

2. INDOKOLÁS

   A rákreform stratégia napirendjén szerepel az új biomarkerek fejlesztése különféle felhasználási célokra, beleértve a diagnózist, a kezelés monitorozását és a prognózist, és aktívan támogatja a Nemzeti Rákkutató Intézet és az Orvosi Kutatási Tanács.

   Annak megértése, hogy az adipocitokinek hogyan befolyásolják az endometriumrák kockázatát, segíthet feltárni azokat a biológiai mechanizmusokat, amelyek fontosak az elhízás-endometriumrák megfigyelt összefüggésében.

3. ELMÉLETI KERET

   Mivel az endometriumrák előfordulási gyakorisága folyamatosan növekszik, az egészségügyben jobb diagnosztikai és prognosztikai megközelítésre van szükség.

   A vérben és a rákos szövetekben a különböző biomarkerszintek tanulmányozása lehetővé teszi számunkra, hogy olyan új célpontokat keressünk, amelyek hasznosak lehetnek e rák kezelésében és prognózisában.

   Továbbá, ha ezeknek a markereknek a szintje jelentősen megváltozik a kezelést követően, a vizsgálók megvizsgálhatják, hogy ezek a markerek felhasználhatók-e a kezelésre adott válasz értékelésére, mivel a kiújulás kockázatának nyomon követése a kezelési protokoll fontos részét képezi.

4. KUTATÁSI KÉRDÉSEK / CÉLKITŰZÉSEK:

   Felmérni a méhnyálkahártyarák és a vér- és szöveti biomarkerek közötti kapcsolatot olyan betegeknél, akiket endometriumrák kezelésére a Royal Surrey NHS Foundation alapítványába utaltak be, és összefüggést kell mutatni az elhízással és a daganat jellemzőivel.

5. AZ ADATGYŰJTÉS ÉS AZ ADATELEMZÉS TANULMÁNYTERVEZÉSE, MÓDSZEREI

   5.1. Dizájnt tanulni

   Minden beteg, akit a Royal Surrey NHS Alapítványhoz utalnak, diagnosztizált méhrákkal, megkapják a kutatási tájékoztatót.

   Kezdetben egy meghívó levelet küldenek a betegek klinikai időpontegyeztetési levele mellett, hogy tájékoztassák őket a vizsgálatról, és időt adjon nekik a vizsgálat előzetes mérlegelésére.

   Ezután a klinikus kezdeti konzultációját követően a járóbeteg-szakrendeléseken keresik fel a betegeket. Kapnak egy résztvevői tájékoztatót, amely részletezi a vizsgálat indoklását, módszertanát és elemzését. Azokat a betegeket, akik hozzájárulnak a vizsgálatban való részvételhez, magyarázatot követően alá kell írniuk egy beleegyezési űrlapot.

   Ezzel egyidejűleg demográfiai adatokat gyűjtenek a méhrák kialakulásához kapcsolódó különböző kockázati tényezők összefüggésbe hozása érdekében. Ezeket az adatokat a következők fogják gyűjteni:

   • Rövid beteginterjú (10 perc)
   • A betegek orvosi feljegyzései Az interjúból származó adatok közvetlenül bekerülnek egy meglévő nőgyógyászati ​​onkológiai osztály adatbázisába, amely jelszóval védett és az NHS számítógépein tárolódik. Az interjú adatlapjainak másolatát az egyetemi tanszéken belüli biztonságos helyiségben iktatjuk, hogy lehetővé tegyük a forrásadatok ellenőrzését.

   A műtét napján a résztvevőktől 30 ml (2 és fél evőkanál) vénás vért vesznek.

   A méheltávolításon átesett résztvevők szövetmintáit a következőképpen gyűjtik: a PI közvetlenül a színházból gyűjt minden friss szövetet (zsírszövetet) a rögzítés előtt, mivel ez nem szükséges a diagnózis felállításához, a méhrákszövetet és a nyirokcsomót pedig a PI a kórszövettani vizsgálat után a kórszövettani osztályról a diagnózis felállítása után. Minden szövetfeldolgozás megfelel a Human Tissue Authority (HTA) irányelveinek, és a Surrey Egyetem Leggett épületében található Onkológiai laboratóriumban kerül végrehajtásra.

   A résztvevők ismételt vérvizsgálatot (30 ml) végeznek a műtét utáni 1. napon, és a műtét utáni 3 vagy 6 hónapos rutin utánkövetési időpontjukon.

   Azoknál a résztvevőknél, akiknek kemoterápia javasolt, a vizsgálók beleegyezést kérnek ahhoz, hogy demográfiai adatokat gyűjtsenek a konzultáció alkalmával és a kiindulási vérmintát (30 ml vénás vér) a kemoterápia megkezdése előtt, valamint a 3. és 6. kemoterápiás ciklus után, hogy értékeljék a biomarkerekben bekövetkezett változásokat korrelálhat a betegség progressziójával vagy regressziójával.

   A kutatók archív szövetblokkokat is beszereznek (egy korábbi vizsgálatban beleegyező méhrákos betegekből egy megfelelő etikai bizottság által jóváhagyott kutatás során történő felhasználásra), hogy segítsenek növelni a vizsgálatba bevont személyek számát. Demográfiai adataikat az azonosító naplóval együtt csak az adatok és a szövetdiagnózis közötti korreláció felmérése céljából teszik hozzáférhetővé a PI számára.

   5.2. Mintaelemzés

   ELISA-t használnak a vérminták biomarkerszintjének meghatározására.

   A szövetelemzéshez a vizsgálók szöveti mikroarray-t (TMA) állítanak fel. Ez lehetővé teszi a minta egyenletesebb festését immunhisztokémiához anélkül, hogy a festési módszer minták közötti eltéréseket mutatna. Minden esetet felülvizsgálnak, és a tárgylemezen megjelölik az érdeklődési területet (tumor), és az érdeklődési területekről származó magokat felhasználják a microarray blokk létrehozásához. Ezután metszeteket lehet kivágni a microarray blokkból, és elő lehet készíteni az immunfestéshez. Ennek a módszernek az az előnye, hogy a mintákat azonos körülményeknek tesszük ki festés közben, és a tumor ugyanazon része több markerre is megbízhatóan festhető. A TMA-ból származó szövetmetszeteket használjuk fel az immunfestéshez, és az érdeklődésre számot tartó markerek kifejeződését pontozzuk. Az esetekről rendelkezésre álló klinikai adatokat ezt követően korrelálják a szövettani és immunhisztokémiai pontszámokkal, és statisztikai elemzést végeznek.

   5.3. Adatelemzés

   Az adatok elemzéséhez szabványos statisztikai elemző eszközöket kell használni. A különböző változók közötti összefüggést az esélyhányadossal, a konfidenciaintervallumtal és a P értékkel való szignifikancia segítségével keressük (

6. MINTA ÉS TOborzás

A potenciális résztvevőket a Royal Surrey NHS Foundation alapítványában azonosítják – vagy itt láthatók, vagy ide utalnak, és itt kezelik diagnosztizált endometriumrák miatt.

6.1. Minta nagysága

A kutatók célja 30-60 diagnosztizált méhnyálkahártyarákos beteg bevonása a vizsgálatba. Ez a mintaméret magában foglalja az archivált szövetmintát is (korábban beleegyezett, és a Surrey Egyetem Leggett épületében tárolták, későbbi etikai kutatásokhoz való felhasználás céljából).

6.2. Toborzás

A Royal Surrey Onkológiai Osztályon méhnyálkahártya-rákban észlelt vagy beutalt betegeket meghívják a vizsgálatban való részvételre.

A betegek nem kapnak kifizetést a vizsgálatban való részvételért. A vizsgálók célja, hogy a rutinlátogatások alkalmával minden információt és mintát megszerezzenek.

6.2.1. Minta azonosítás

Az endometriumrákban diagnosztizált betegek azonosítása a Nőgyógyászati ​​Onkológiai MultiDiszciplináris Csoport ülésén vagy a Nőgyógyászati ​​Onkológiai vagy Orvosi Onkológiai csoportokon keresztül történik.

6.2.2. Beleegyezés

Az írásos beleegyezést azután kell beszerezni, hogy a páciens megkapta a résztvevő tájékoztatót, és lehetősége volt megvitatni és kérdéseket feltenni a vizsgálattal kapcsolatban. Elegendő idő lesz erre a célra. Minden betegnek rendelkeznie kell beleegyezési képességgel. A beleegyezést a nőgyógyászati ​​onkológiai csoport klinikusai vállalják. Szükség esetén fordító vagy nyelvi vonal is használható.

A minták (anonimizált és a Surrey Egyetem Leggett épületében, a HTA előírásait betartva) tárolásához is beleegyezést kell kérni a jövőbeni kutatások során.