Biomarker elemzés a GBA-vel összefüggő Parkinson-kórhoz

A GBA (OMIM 606463) gén a béta-glükocerebrozidázt, egy lizoszomális enzimet kódolja. A betegséget okozó mutációk a GBA gén mindkét alléljában Gaucher-kórt (GD) okoznak, míg az egyik allél mutációi Gaucher-hordozó státuszhoz vezetnek. A közelmúltban kimutatták, hogy a GD-ben szenvedő betegeknél, még az egy mutált GBA-gént hordozóknál is nagyobb a kockázata a Parkinson-kór (PD) kialakulásának, és korai életkorban is, és hogy a GBA-mutációk jelentik a fejlődés elsődleges genetikai kockázati tényezőjét. PD és a parkinsonizmus egyéb formái. Nincsenek azonban biomarkerek a PD diagnózisának meghatározására, különösen a korai és minimális tünetmentes vagy tünetmentes stádiumban. A PD progressziója a GBA génben mutációval rendelkező alanyoknál jelenleg nem határozható meg. Egyes sejt- és állatmodellekben kimutatták, hogy a glükocerebrozidáz változásai befolyásolják a PD patológiában szerepet játszó egyéb fehérjék metabolizmusát. Az SNCA és a PARK2 által kódolt α-synuclein és Parkin a parkinsonizmus ritka genetikai formáiban szerepet játszik. Az α-synuclein aggregátumok a központi és a perifériás idegrendszer sejtjeiben láthatók, és a PD patológiás bűnösének tekinthetők. Kimutatták, hogy mutált glükocerebrozidáz jelen van az α-synuclein aggregátumokban GBA mutációval és PD-vel rendelkező egyének posztmortem agymintáiban. Ezenkívül az α-synuclein befolyásolja a Parkin sejtekben való oldhatóságát. Annak felmérésére, hogy a GBA-elváltozások az agyon kívüli, könnyen hozzáférhető sejttípusokban is befolyásolják-e az α-synuclein és a Parkin metabolizmusát emberben, a perifériás vér mononukleáris sejtjeiben (PBMC) mind molekuláris, mind fehérjeszintű expressziót vizsgálunk. A vizsgálat három csoportot foglal magában: 1) Gaucher-kórban szenvedő betegek és hordozók, akiknél a GBA génben mutációt okozó igazolt betegség, és akiknél Parkinson-kór tünetei (GD-PD) alakultak ki, 2) Gaucher-kórban szenvedő betegek és hordozók, akiknél nincsenek ismert Parkinson-kór tünetei (GD- nonPD) és 3) Nem-Gaucher-kór/egészséges kontrollok (HC). A 3-5 ml perifériás vérből kinyert PBMC-ket az α-synuclein, LRRK2 és Parkin intracelluláris festésére használják, majd Flow citométerrel (BD accuri) veszik fel. A limfocitákat és monocitákat α-synuclein, LRRK2 és Parkin expresszióra elemezzük. A PBMC-ket az RNS extrakciójához és az azt követő molekuláris elemzéshez is használják qPCR segítségével. Mivel az assay egy könnyen hozzáférhető szövettípust, azaz perifériás vért használ, és nagyon kis mennyiséget (2-3 ml) igényel, ez a vizsgálat potenciális biomarkerként fejleszthető a Parkinson-kór diagnosztizálására és a betegség progressziójának indikátoraként GBA génnel rendelkező alanyoknál. mutációk.