Radiazioni, chemioterapia, vaccino e cellule anti-MART-1 e anti-gp100 per pazienti con melanoma metastatico

Sfondo:

• Abbiamo ingegnerizzato i linfociti del sangue periferico umano (PBL) per esprimere un recettore delle cellule T (TCR) che riconosce gli antigeni leucocitari umani (HLAA*0201) epitopi ristretti derivati ​​dalla gp100 o dall'antigene del melanoma MART-1.
• Abbiamo costruito singoli vettori retrovirali che contengono catene del recettore delle cellule T Alpha e Beta (TCR) e possono mediare il trasferimento genetico di questo TCR con alta efficienza (superiore al 30 percento) senza la necessità di eseguire alcuna selezione.
• Nelle co-colture con melanomi HLA-A*0201 positivi, queste cellule T trasdotte con TCR hanno secreto una quantità significativa di interferone-gamma (IFN-y), ma non è stata osservata alcuna secrezione significativa nelle co-colture di controllo.
• gp100:154-162 TCR o MART-1:27-35 TCR cellule T trasdotte potrebbero uccidere efficacemente i tumori HLAA*0201 positivi. C'era poco o nessun riconoscimento dei fibroblasti normali.
• Il trasferimento adottivo di uno di questi linfociti del sangue periferico (PBL) modificati dal gene trasferito dal TCR a seguito di un regime di linfodeplezione non mieloablativa potrebbe mediare la regressione del tumore nel 13-30% dei pazienti con melanoma metastatico sebbene non siano state osservate risposte complete.

Obiettivi:

Obiettivi primari:

• Nella coorte 1 e 2, per determinare se la somministrazione di entrambi i linfociti del sangue periferico (PBL) anti-gp100:154-162 ingegnerizzati con TCR e anti-MART-1:27-35 con TCR, aldesleuchina e gp100: 154-162 o il peptide MART-1:26-35(27L) a pazienti che seguono un regime preparativo linfodepletivo di chemioradioterapia si tradurrà in una regressione completa del tumore nei pazienti con melanoma metastatico.
• Nella coorte 3 e 4, per determinare se la somministrazione di linfociti del sangue periferico (PBL) CD8+ anti-gp100:154-162 ingegnerizzati con TCR e anti-MART-1:27-35 con TCR, aldesleuchina e gp100 :154-162 peptide o il peptide MART-1:26-35(27L) a pazienti che seguono un regime preparativo linfodepletivo di chemioradioterapia si tradurrà in una regressione completa del tumore nei pazienti con melanoma metastatico.
• Determinare se la somministrazione del vaccino specifico (il peptide gp100:154-162 o il peptide MART-1:26-35(27L)) può aumentare la persistenza delle cellule trasferite specifiche (anti-gp100:154-162 TCR PBL, anti-gp100:154-162 TCR CD8+ PBL, anti-MART-1:27-35 TCR PBL o anti-MART-1:27-35 TCR CD8+ PBL), rispettivamente.

Obiettivi secondari:

- Determinare il profilo di tossicità di questi regimi di trattamento.

Eleggibilità:

I pazienti che sono HLA-A*0201 positivi e di età pari o superiore a 18 anni devono avere:

• melanoma metastatico con malattia misurabile
• stato precedentemente trattato con IL-2 per il melanoma;
• valori normali per valori di laboratorio di base.

I pazienti potrebbero non avere:

• malattie mediche importanti concomitanti;
• qualsiasi forma di immunodeficienza primaria o secondaria;
• grave ipersensibilità a uno qualsiasi degli agenti utilizzati in questo studio;
• controindicazioni per la somministrazione di alte dosi di aldesleuchina.

Progetto:

• Nella coorte 1 e 2:

  • Le cellule mononucleate del sangue periferico (PBMC) saranno ottenute mediante leucaferesi (circa 5 volte 10(9) cellule) e coltivate in presenza di anti-CD3 (OKT3) e aldesleuchina e aliquote separate saranno trasdotte con l'anti-gp100:154- 162 TCR e il vettore retrovirale anti-MART-1:27-35 TCR.
  • La trasduzione viene avviata dall'esposizione di circa 10(8) a 5 volte 10(8) cellule al surnatante contenente i vettori retrovirali. Queste cellule trasdotte con gp100 e MART-1 TCR saranno separatamente espanse e testate per la loro attività antitumorale.
  • Una volta dimostrato che i linfociti ingegnerizzati sono biologicamente attivi secondo i rigorosi criteri delineati nel certificato di analisi, i pazienti riceveranno un regime preparatorio di deplezione dei linfociti di chemioradioterapia costituito da ciclofosfamide e fludarabina e irradiazione corporea totale di 600 cGy seguita da infusione endovenosa di tumore reattivo ex vivo , gp100 e cellule trasdotte dal gene MART-1 TCR più aldesleuchina EV (720.000 UI/kg q8h per un massimo di 15 dosi).
  • I pazienti saranno randomizzati per ricevere il peptide gp100:154-162 o il peptide MART-1:26-35(27L) emulsionato in adiuvante di Freund incompleto.
  • I pazienti saranno sottoposti a valutazione completa del tumore con esame fisico, tomografia computerizzata (TC) del torace, addome e pelvi e valutazione clinica di laboratorio da quattro a sei settimane dopo il trattamento e poi una volta al mese per circa 3-4 mesi o fino a quando i criteri di studio non saranno soddisfatti.
  • Lo studio sarà condotto utilizzando un disegno ottimale di fase II in cui inizialmente verranno arruolati 21 pazienti valutabili in ciascuna delle due coorti. Se nessuno dei 21 pazienti per coorte manifesta una risposta clinica completa, non verranno arruolati altri pazienti, ma se 1 o più dei primi 21 pazienti valutabili arruolati in quella coorte hanno una risposta clinica completa, allora l'arruolamento in quella coorte continuerà fino a quando un totale di 41 pazienti valutabili sono stati arruolati in quella coorte.
  • Le coorti 1 e 2 saranno chiuse con l'approvazione dell'emendamento D.

• Le coorti 3 e 4 saranno avviate con l'approvazione dell'emendamento D.

  • Le cellule mononucleate del sangue periferico (PBMC) saranno ottenute mediante leucaferesi (circa 5 volte 10(9) cellule) e le cellule CD8+ saranno selezionate dalle colture, utilizzando l'apparato Miltenyi CliniMACS, prima di essere stimolate e trasdotte. Aliquote separate di cellule CD8+ saranno trasdotte con i vettori retrovirali anti-gp100:154-162 TCR e anti-MART-1:27-35 TCR.
  • La trasduzione viene avviata dall'esposizione di circa 10(8) a 5 volte 10(8) cellule CD8+ al surnatante contenente i vettori retrovirali. Queste cellule trasdotte con gp100 e MART-1 TCR saranno separatamente espanse e testate per la loro attività antitumorale.
  • Una volta dimostrato che i linfociti ingegnerizzati sono biologicamente attivi secondo i rigorosi criteri delineati nel certificato di analisi, i pazienti riceveranno un regime preparatorio di deplezione dei linfociti di chemioradioterapia costituito da ciclofosfamide e fludarabina e irradiazione corporea totale di 600 cGy seguita da infusione endovenosa di tumore reattivo ex vivo , gp100 e cellule CD8+ trasdotte dal gene MART-1 TCR più aldesleuchina EV (720.000 UI/kg q8h per un massimo di 15 dosi).
  • I pazienti saranno randomizzati per ricevere il peptide gp100:154-162 (coorte 3) o il peptide MART-1:26-35(27L) (coorte 4) emulsionato in adiuvante di Freund incompleto.
  • I pazienti saranno sottoposti a valutazione completa del tumore con esame fisico, TC del torace, addome e pelvi e valutazione clinica di laboratorio da quattro a sei settimane dopo il trattamento e poi mensilmente per circa 3-4 mesi o fino a quando i criteri di studio non saranno soddisfatti.
  • Lo studio sarà condotto utilizzando un disegno ottimale di fase II in cui inizialmente verranno arruolati 21 pazienti valutabili in ciascuna delle coorti 3 e 4. Se nessuno dei 21 pazienti per coorte sperimenta una risposta clinica completa, non verranno arruolati altri pazienti ma se 1 o più dei primi 21 pazienti valutabili arruolati in quella coorte hanno una risposta clinica completa, quindi l'assegnazione a quella coorte continuerà fino a quando un totale di 41 pazienti valutabili non sarà stato arruolato in quella coorte.