Caratterizzazione delle cellule di Breg (Breg)

Razionale: l'artrite reumatoide (RA), la più comune malattia infiammatoria articolare, è spesso associata a distruzione articolare irreversibile e può coinvolgere la prognosi dei pazienti. Se ora sono disponibili trattamenti per stabilizzare la malattia, la ricerca continua a cercare di curare definitivamente la malattia. È ben noto che le cellule B hanno un ruolo patogeno nell'AR. Più recentemente, è stato dimostrato che le cellule B potrebbero anche avere funzioni regolatrici attraverso la secrezione di interleuchina 10 (IL-10). Sono chiamate cellule regolatorie B (Breg). Nel modello murino più comunemente usato di artrite reumatoide, l'artrite indotta da collagene (CIA), il trasferimento Breg aiuta a prevenire lo sviluppo di CIA e curare l'artrite stabilita. I ricercatori hanno recentemente dimostrato che Breg era diminuito nei pazienti con AR rispetto ai controlli e che il tasso di Breg era inversamente correlato con l'attività della malattia e i livelli di autoanticorpi. Questi risultati suggeriscono quindi che la mancanza di secrezione di IL-10 da parte delle cellule B gioca un ruolo importante nella fisiopatologia dell'AR. Tuttavia, negli esseri umani, i Breg rimangono poco conosciuti. L'obiettivo principale del progetto è caratterizzare meglio la B capace di produrre IL-10 sia nei soggetti con AR che nei controlli. Capire quale induce la secrezione di IL-10 da parte di B potrebbe consentire di prendere in considerazione nuovi approcci terapeutici nelle malattie autoimmuni, inclusa l'AR.

Obiettivi:

Principale: Identificare trasportatori di nutrienti e recettori per chemochine differenzialmente espressi tra Breg e altre cellule B in pazienti con AR.

Secondario:

• Identificare geni e proteine ​​di superficie differenzialmente espressi tra Breg e altri linfociti B (BL) in pazienti con AR.
• Identificare trasportatori di nutrienti, recettori per chemochine, geni e proteine ​​di superficie differenzialmente espressi tra Breg e altri BL in soggetti sani.
• Confrontare l'espressione di trasportatori di nutrienti, recettori per chemochine, geni e proteine ​​di superficie tra controlli Breg Breg e soggetti con RA.

Metodi:

Disegno: studio trasversale che coinvolge i servizi di reumatologia bicentrica a Montpellier e Nîmes fino al reclutamento; il nostro gruppo di ricerca presso il Translational IGMM Nîmes e il laboratorio di immunologia per le analisi biologiche.

Popolazione:

• RA: paziente rispondente ai criteri ACR (American College of Rheumatology) -EULAR (European League Against Rheumatism) 2010, naïve e bioterapico con corticosteroidi inferiori a 10 mg/die, stabile da almeno una settimana.
• Controlli: abbinati per età e sesso a pazienti affetti da AR, senza malattia sistemica.

Endpoint

• Principale: i portatori di nutrienti dell'intensità della fluorescenza della citometria a flusso media e la percentuale di BL che esprimono i diversi recettori delle chemochine
• Secondario: analisi del trascrittoma e superficie proteomica con conferma citometrica dell'espressione proteica dell'RNA e delle proteine ​​identificate.

Numero di soggetti: 50 controlli e 50 pazienti affetti da AR (10 ciascuno per ciascuno dei 3 metodi di confronto Breg/B IL10- e 10 ciascuno per ciascuno dei due stadi di validazione). Ogni paziente avrà una visita. La durata prevista dello studio è di 2 anni.

Analisi statistica: confronto dei rapporti B + IL-10 / IL-10-B tra pazienti affetti da AR e controlli mediante test di Student o Mann-Whitney.

Risultati attesi e prospettive: questo progetto ci consentirà di definire e comprendere meglio il Breg nei pazienti con AR e nei controlli. Se gli investigatori riescono a trovare marcatori extracellulari specifici per Breg, ciò semplificherà l'ulteriore studio di queste cellule. Capire che il BL diventa regolatore e questo spiega la mancanza di IL-10 da parte del BL nell'AR potrebbe aprire nuove prospettive terapeutiche.