Effetti di LiveSpo X-SECRET nel trattamento di supporto della vaginite

La vaginite è una malattia correlata al tratto riproduttivo femminile che comprende la vaginosi batterica (vaginosi batterica - BV), le malattie sessualmente trasmissibili (malattie sessualmente trasmissibili - malattie sessualmente trasmissibili)... Questa è considerata un'infezione comune nel mondo, soprattutto nei paesi tropicali in via di sviluppo e sottosviluppati, dove fino a 3/4 della popolazione soffre di malattie sessualmente trasmissibili, principalmente nella fascia di età riproduttiva compresa tra 15 e 24 anni. Esistono molti agenti microbici che causano malattie ginecologiche, tra cui batteri, virus, funghi, flagellati... La vaginosi batterica è un'infezione vaginale endogena causata da più di 30 specie diverse di batteri, principalmente batteri anaerobici come Gardnerella vaginalis, Mycoplasma hominis, M. genitalium... La vaginite è abbastanza comune nelle donne vietnamite. Questa è una questione di grande preoccupazione nell’assistenza sanitaria pubblica perché le malattie sessualmente trasmissibili spesso presentano sintomi lievi o assenti, quindi sono facili da ignorare. Inoltre, l’uso di antibiotici ad ampio spettro può portare a effetti collaterali come perdita di appetito, affaticamento e problemi sessuali, mentre trattamenti ripetuti possono portare alla comparsa di resistenza agli antibiotici, rappresentando una sfida significativa per il trattamento della BV e delle malattie sessualmente trasmissibili in tutto il mondo. La malattia è normalmente causata dalla sostituzione dei Lactobacillus (un gruppo di batteri benefici della vagina) che porta ad una crescita eccessiva di batteri anaerobici. I probiotici sono microrganismi benefici per la salute umana se consumati in quantità sufficienti, svolgendo un ruolo importante nel mantenimento dell'equilibrio della microflora corporea, soprattutto nell'intestino e nella vagina. Gli studi hanno scoperto che i probiotici possono aiutare a ridurre l’incidenza e la gravità delle infezioni vaginali, comprese la vaginosi batterica e le infezioni da lieviti. Attualmente, i probiotici formulati come capsule orali o supposte ginecologiche contenenti ceppi di Bifidobacterium o Lactobacillus sono allo studio come potenziale terapia aggiuntiva per il trattamento delle infezioni vaginali. Tuttavia, questi ceppi hanno una bassa vitalità e sono sensibili alla temperatura, all’umidità e al pH, rendendo difficile la conservazione. La loro efficacia dipende quindi dai ceppi specifici utilizzati e dal dosaggio richiesto per raggiungere elevate concentrazioni nel tratto vaginale. I batteri benefici del genere Bacillus sono stati studiati a lungo per la loro sicurezza. Ad esempio, Bacillus subtilis, B. clausii e B. coagulans sono spesso batteri aerobici o anaerobici facoltativi, capaci di crescere rapidamente e formare spore resistenti a condizioni difficili come la mancanza di nutrizione, la mancanza di ossigeno, le alte temperature e persino gli antibiotici. Inoltre, questi batteri sono particolarmente adatti per l'uso come spray vaginali probiotici diretti e in situ poiché possono anche secernere composti antibatterici, acido lattico, H2O2 e attivare lo strato mucoso del sistema immunitario intestinale. La terapia probiotica tramite nebulizzazione vaginale aiuta a supportare il trattamento e la prevenzione degli agenti patogeni a trasmissione sessuale, fornendo un promettente supporto/soluzione alternativa alla tradizionale terapia antibiotica.

Lo scopo di questo studio è valutare se le spore probiotiche di Bacillus spruzzate vaginalmente possono ridurre i sintomi clinici e migliorare vari marcatori subclinici dei pazienti con vaginite.

Metodi: disegno prospettico di studi clinici randomizzati, in doppio cieco e controllati. L'esperimento è stato condotto su donne con vaginite e i dati ottenuti sono stati confrontati tra 2 gruppi o tra due o quattro punti temporali del periodo di trattamento dello stesso gruppo. Al gruppo di controllo è stato applicato il trattamento di routine in ospedale combinato con la spruzzatura di soluzione fisiologica NaCl allo 0,9% nella vagina 3 volte/ora x 2 volte/giorno ininterrottamente per 28 giorni. Al gruppo di prova è stato applicato un trattamento di routine in ospedale combinato con la spruzzatura di LiveSpo X-SECRET nella vagina 3 volte/ora x 2 volte/giorno ininterrottamente per 28 giorni.

I campioni vengono prelevati il ​​giorno 0 e uno o più dei seguenti punti temporali: giorno 3, 7, 14 e/o 28, a seconda della capacità di ciascuna unità di ricerca di controllare il campionamento a determinati intervalli durante la procedura di trattamento. Nel dettaglio, i campioni sono stati prelevati ai giorni 0, 7 e 28 presso l'Hanoi OGH; e ai giorni 0, 3, 7, 14, 28 al Bac Ninh CDC. Gli indicatori subclinici relativi alla vaginite sono stati monitorati in diversi momenti, tra cui:

• Test di colorazione batterica: questi test sono stati condotti di routine presso i Dipartimenti di Microbiologia, sia all’Hanoi OGH che al Bac Ninh CDC, al giorno 0 e al giorno 28.
• Test PCR in tempo reale per rilevare 9 principali microrganismi che causano infiammazione nei campioni di tampone vaginale: Gardnerella vaginalis (GV); Neisseria gonorrhoeae (NG); Chlamydia trachomatis (TC); Candida albicans (CA); Trichomonas vaginalis (TV); Mycoplasma hominis (MH); Mycoplasma genitalium (MG); Alfaherpesvirus umano di tipo 1 (HSV-1); Alfaherpesvirus umano di tipo 2 (HSV-2). Questo test è stato eseguito presso il Dipartimento di Microbiologia, Funghi e Test Parassitologici, Ospedale Centrale di Dermatologia, utilizzando kit commerciali o un kit "interno" che è stato recentemente sviluppato e pubblicato a livello internazionale dal gruppo di ricerca (Bui et al., 2023 ). Il test è stato effettuato ai giorni 0, 7 e 28 per i campioni raccolti presso l'OGH di Hanoi; e ai giorni 0, 3, 7, 14, 28 per i campioni raccolti presso il CDC di Bac Ninh.
• Saggio PCR in tempo reale per rilevare Bacillus sp. inclusi B. subtilis, B. clausii e B. coagulans in campioni di tampone vaginale. Questo esperimento è stato eseguito presso il Centro Ricerche Spobio, Anabio R&D. Il test è stato effettuato ai giorni 0, 7 e 28 per i campioni raccolti presso l'OGH di Hanoi; e ai giorni 0, 3, 7, 14, 28 per i campioni raccolti presso il CDC di Bac Ninh.
• L'analisi dell'indice immunitario comprendente 5 tipi di citochine IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10, TNF-α e IgA è stata eseguita utilizzando la tecnica ELISA da campioni di tampone vaginale raccolti ai giorni 0, 7 e 28 ad Hanoi Solo OGH. I test vengono condotti presso il Dipartimento di microbiologia, funghi e test parassitologici, Ospedale centrale di dermatologia o Centro di ricerca Spobio, Anabio R&D.
• Cambiamenti nel microbioma utilizzando l'analisi del metagenoma dell'rRNA 16S: questa analisi del microbioma è stata condotta per campioni rappresentativi di tamponi vaginali provenienti da pazienti di ciascun gruppo di ricerca (previsti 10-15 pazienti/gruppo) utilizzando il sequenziamento di nuova generazione (NGS) su un sistema Illumina MiSeq (Illumina, San Diego, CA, USA) con una configurazione di corsa 2 × 250 bp. Il test è stato eseguito il giorno 0 e uno o più dei successivi giorni 7 e 28 per i campioni raccolti sia presso l'Hanoi OGH che presso il Bac Ninh CDC.