Trapianto di paratiroidi e timo in DiGeorge #931

Dettagliato: la sindrome di DiGeorge è un complesso di tre problemi, 1) difetti cardiaci, 2) carenza paratiroidea e 3) assenza del timo, con conseguente grave carenza di cellule T. C'è uno spettro di malattia nella sindrome di DiGeorge rispetto a tutti e tre i difetti. Non esiste un trattamento sicuro ed efficace per la sindrome di DiGeorge e la maggior parte dei pazienti muore entro i due anni. Per i pazienti con un grave difetto delle cellule T, il PI ha dimostrato che il trapianto di timo è sicuro ed efficace con altri protocolli clinici. I soggetti con sindrome di DiGeorge tipica e atipica completa erano eleggibili per questo studio. I soggetti con atimia e ipoparatiroidismo profondo erano eleggibili per il trapianto di paratiroidi parentali in questo protocollo. I neonati con sindrome di DiGeorge, che hanno avuto successo trapianti di timo ma hanno ipoparatiroidismo, devono andare in clinica per frequenti livelli di calcio e in ospedale per infusioni di calcio; i bambini con ipoparatiroidismo sono a rischio di convulsioni a causa del basso contenuto di calcio. Circa la metà dei neonati con ipoparatiroidismo profondo svilupperà nefrocalcinosi. A seconda del fenotipo e della funzione delle cellule T, ai soggetti è stato somministrato uno dei due diversi regimi di immunosoppressione. Tipici soggetti DiGeorge completi (con funzione proliferativa delle cellule T < 50.000 cpm) hanno ricevuto il pre-trapianto di timoglobulina. I soggetti DiGeorge completi tipici (con risposta cellulare proliferativa a PHA > 50.000 cpm) e i soggetti DiGeorge atipici (con risposta cellulare T proliferativa a PHA < 75.000 cpm) hanno ricevuto timoglobulina (pre-trapianto) e ciclosporina (pre-trapianto e post-trapianto). La timoglobulina è stata utilizzata in parte per prevenire il rigetto del trapianto e anche per esaurire eventuali cellule T nella paratiroide del donatore. La ciclosporina è stata utilizzata per esaurire le cellule T attivate nel ricevente. Per tutti i soggetti, paracetamolo, difenidramina e metilprednisolone sono stati somministrati in concomitanza con la globulina timocitica anti-umana di coniglio. Il timo è stato coltivato in terreno standard per 10-21 giorni per esaurire i timociti maturi che potrebbero causare GVHD. In sala operatoria, il tessuto del timo è stato posizionato nel muscolo quadricipite in una o entrambe le gambe. La donazione delle paratiroidi è stata preferibilmente effettuata contestualmente al trapianto del timo. Il tessuto paratiroideo è stato posizionato nel muscolo quadricipite in una sola gamba, utilizzando la stessa incisione del trapianto di timo. A seconda dello stato immunitario post-trapianto, i soggetti potrebbero aver ricevuto ciclosporina e steroidi.

Per 3 mesi dopo il trapianto di timo, le cellule T sono state monitorate mediante citometria a flusso approssimativamente ogni 2-4 settimane. In alternativa, è stata utilizzata la conta assoluta dei linfociti come numero massimo possibile di cellule T. A 2-3 mesi dal trapianto, il soggetto potrebbe aver subito una biopsia dell'allotrapianto di timo, eseguita in anestesia generale in sala operatoria. La biopsia era di circa 4 porzioni di tessuto muscolare delle dimensioni di un pisello (3x3 mm) in cui era stato inserito il trapianto di timo. Usando l'immunoistochimica, la biopsia ha determinato la timopoiesi e l'eventuale rigetto del trapianto. La paratiroide non è stata sottoposta a biopsia perché è molto piccola; fare una biopsia potrebbe rimuovere tutto il tessuto paratiroideo. È stata eseguita una biopsia cutanea di ricerca (nel sito dell'incisione cutanea al momento del trapianto) per determinare se le cellule T fossero presenti prima del trapianto. Una biopsia cutanea è stata eseguita anche al momento della biopsia dell'innesto di timo per cercare popolazioni di cellule T clonali. Per tutti i soggetti che hanno sviluppato cellule T, è stata utilizzata la profilassi pneumocystis post-trapianto per circa 1 anno e l'immunoglobulina EV per circa 2 anni.