Attivazione in vitro di follicoli dormienti per pazienti con insufficienza ovarica primaria (IVADFPOI)

I: Ex IVA

1. La rimozione di un'ovaia (forse entrambe le ovaie a seconda della condizione) viene eseguita mediante chirurgia laparoscopica. (A seconda delle condizioni dei pazienti, i ricercatori rimuovono entrambe le ovaie per aumentare la possibilità di ottenere follicoli residui. Inoltre, in alcuni casi, gli investigatori devono eseguire la laparotomia, cioè un intervento chirurgico a cielo aperto, a seconda delle condizioni del paziente).
2. Sezionare rapidamente la corteccia ovarica dal midollo ovarico e tagliare a piccole strisce. Le analisi istologiche vengono eseguite utilizzando piccole parti delle strisce ovariche per trovare i follicoli residui.
3. Facoltativo: criopreservare le strisce ovariche mediante un metodo di vitrificazione. Due giorni prima del giorno del reimpianto, scongelare le strisce ovariche.
4. Le strisce ovariche vengono tagliate a cubetti (1 x1 mm2). I cubetti ovarici vengono coltivati ​​con terreno contenente farmaci per attivare i follicoli dormienti per 2 giorni prima del trapianto. Dopo il lavaggio, i cubi vengono trapiantati sotto la membrana di entrambe le tube di Falloppio e l'ovaio rimanente sotto chirurgia laparoscopica.
5. Monitorare la crescita del follicolo mediante ultrasuoni e analisi degli ormoni sierici. Una volta che i follicoli raggiungono un diametro >16 mm, i pazienti ricevono hCG, seguito dal recupero degli ovociti in circa 36 ore. Quindi gli investigatori eseguiranno l'iniezione intracitoplasmatica di spermatozoi (ICSI) utilizzando lo sperma del marito. Quando gli embrioni hanno raggiunto lo stadio di quattro cellule, sono stati crioconservati, in attesa del trasferimento dell'embrione congelato-scongelato.

II Procedura attuale:

Solo taglio superficiale della corticale ovarica mediante laparoscopia o laparotomia, senza portare l'ovaio all'esterno o coltivato con terreno.