島移植におけるPolyTreg免疫療法

バックグラウンド：

1 型糖尿病 (T1DM) は、膵臓のベータ (β) 細胞の破壊を特徴とする自己免疫疾患であり、インスリンの絶対的欠乏を引き起こします。 今日まで、臨床膵島移植は、頻繁な低血糖イベントおよび重度の血糖傾向を示す選択された患者を治療するために受け入れられているモダリティです。 「エドモントン プロトコル」は、1 型糖尿病患者における移植後の持続的な C ペプチド産生と高率のインスリン非依存性を報告することにより、画期的な出来事となりました。 膵島移植における同種免疫および自己免疫に関連する課題のため、急性および/または長期の拒絶反応を防ぐために適切な免疫抑制が必要です。 エドモントンおよび他の多くの国際的な膵島移植施設で使用されている現在の免疫抑制プロトコルは、導入療法、抗炎症療法、および維持療法の組み合わせで構成されており、膵島移植の成功率が高いことを説明しています。 上記の現在の免疫抑制レジメンの強みにもかかわらず、単一ドナーの成功率（15％）を高めることはできず、大多数の患者はインスリン非依存を達成するために2つ以上の膵島移植を必要としています. エドモントンでは、膵島の分離、生着、および移植片の長期生存を改善するための臨床試験が計画されています。 生涯にわたる高用量の免疫抑制の必要性は、かなりの副作用に関連しており、疾患の経過の早い段階で膵島移植の適用を制限し続けています。

制御性 T 細胞 (Treg) は、CD4+ T 細胞の小さなサブセットであり、系統の分化と機能を FOXP3 転写因子に依存しています。 Treg は、他の免疫細胞の活性化とエフェクター機能の抑制を通じて、自己寛容に大きく貢献するものとして浮上しています。 Treg は、不要な免疫活性化の開始を防ぎ、進行中の免疫応答を抑制してバイスタンダー組織の破壊を制限することによって機能します。 広範な移植片損傷の前に Treg を注入すると、移植片の長期転帰が改善する可能性があることが示唆されています。 一般化された免疫抑制レジメンとは異なり、Treg は長寿命であり、優性かつ抗原特異的に機能することができます。 したがって、Treg の治療的注入は、移植患者の病原体や腫瘍に対する望ましい免疫応答を妨げることなく、長期的なドナー特異的寛容を誘導する可能性を秘めています。 糖尿病に関しては、動物とヒトの両方の研究で、β細胞機能の維持におけるTregの中心的な役割が実証されています。 Treg の注入は、非肥満糖尿病 (NOD) マウスの糖尿病を予防し、さらには逆転させます。 注入されたTregは移植直後に同種移植部位に移動し、免疫抑制なしで安定した膵島移植片の生存を誘導できることが動物実験で実証されています。 最近の人間の研究では、T1DM における Treg の機能的欠陥が報告されていますが、これは可逆的であると思われます。

この臨床試験は、アルバータ州エドモントンにあるシャピロ博士の臨床膵島移植プログラム チームと博士との共同研究です。 カリフォルニア大学サンフランシスコ校 (UCSF) の Tang と Bluestone のチーム。 博士。 Tang と Bluestone は、PolyTreg 技術の開発に貢献しており、膵島移植における Treg 注入の臨床試験におけるこのエキサイティングなコラボレーションの機会を提供しています。 Tang 博士のチームは、免疫寛容のメカニズムに関する知識を、自己免疫性糖尿病の治療と移植拒絶の予防のための新しい治療法に変換することに重点を置いています。 彼らは、完全に分化したエフェクターT細胞を破壊することにより、糖尿病マウスモデルの組織破壊を止めるTregの複数のレベルでの有効性を実証しました。 Bluestone 博士の過去 25 年間の研究は、自己免疫および臓器移植における T 細胞の活性化と免疫寛容を制御する基本的なプロセスの理解に焦点を当てており、特に Treg に重点が置かれています。 Bluestone 博士は、PolyTreg 免疫療法が新たに発症した 1 型糖尿病の成人患者に安全に投与できることを実証しました。 博士。 Tang と Bluestone は、Treg の分離と生産、および Treg 免疫療法において豊富な経験を持ち、このプロジェクトに強力な技術的および科学的サポートをもたらします。 研究者は、この共同研究が Treg 免疫療法と膵島移植の標準治療の両方の長所を統合することを期待しています。 したがって、この試験は、膵島移植における現在の免疫抑制レジメンのより効果的な代替手段を見つけることを期待して、膵島移植の現在のプロトコルに組み込まれている Treg 注入の安全性と有効性を調査することです。

トライアルデザイン

既存の前臨床および臨床所見に基づいて、研究者らは、Treg が移植膵島の自己拒絶とアロ拒絶の両方から保護し、それによって 1 型糖尿病の成人のインスリン非依存性持続性と C ペプチド機能を経時的に改善するという仮説を立てています。

第一目的

膵島移植患者におけるex vivoで選択され、ex vivoで拡張された自己ポリTregの静脈内注入の安全性と実現可能性を評価すること。

主要な結果の尺度/エンドポイント

有害事象

実験室の異常

毒性の兆候

注入反応

感染症に関連する合併症

副次的な目的

内因性インスリン分泌に対する効果を評価するには: 膵島移植患者の b 細胞機能に対する Treg の効果を評価します。

副次評価項目/エンドポイント

MMTT 中の C ペプチド応答

インスリンの使用

HbA1C

探索目的

糖尿病免疫応答の代理マーカー: 病理学的自己免疫および同種免疫応答に対する PolyTreg の効果を測定します。

探索的アウトカム測定/エンドポイント 多色フローサイトメトリー (MFC) による免疫プロファイルへの影響の評価 (注入前、注入後 1、2、4 週間および 3、6、12 か月)

テトラマー/または ELISA スポットアッセイを使用した自己抗体および自己反応性 T 細胞 (注入前、および注入後 3、6、および 12 か月)。

重水素標識を使用した血液中の注入された PolyTreg の持続性と安定性 (注入後 1、7、14、28、3 か月、6 か月、12 か月)

この試験デザインにより、次の特定の目的を決定できます。

1 型糖尿病患者の膵島移植における PolyTreg 免疫療法の安全性を実証すること。

膵島移植を受けている患者に対するPolyTreg免疫療法の免疫学的影響を評価すること。

有効性を評価し、PolyTreg 免疫療法の最適用量を確立する。

研究者らは、PolyTregs が自己拒絶と同種拒絶の両方を保護/緩和し、それによってインスリンに依存しない持続性と C-ペプチド機能を経時的に改善することを提案しています。 この試験では、研究者は低レベルの Tac/シロリムス免疫抑制を提案しています。研究者は、高用量のタクロリムスへの早期曝露と長期曝露を減らすことで、ベータ細胞機能の顕著な改善、腎機能障害の減少、日和見感染の減少、移植後の減少につながることを望んでいます。リンパ増殖性疾患（PTLD）。 長期的な目標は、その後のフェーズ 2 の有効性/安全性ランダム化比較試験 (RCT) のために PolyTreg 投与量を開発および最適化することです。

学習手順

研究参加者は、この研究のスクリーニング評価を受けます。 これには、標準治療の膵島移植のスクリーニングが含まれます。 出産の可能性のある女性の場合、調査員は血液検査で妊娠していないことを確認するよう求めます。 患者が資格があり、参加に同意した場合、研究者の裁量で対照群または治療群のいずれかに割り当てられます。 2 つのグループの唯一の違いは、治療グループが PolyTreg 注入を受け、対照グループが PolyTreg 注入を受けないことです。 捜査官は、年齢、性別、民族性、医療情報など、医療記録から特定の詳細を収集します。 患者が治療グループに割り当てられた場合、PolyTreg 製造のために 400 mL の血液サンプルが収集され、膵島移植後 6 週目に患者に注入されます。 治験責任医師は、最初に 2 人の参加者を対照群に登録し、最初の 2 人の患者で手順が安全であると思われる場合は、両方の群をさらに登録します。

治療群の場合:

調査訪問 1: 膵島移植前

膵島移植誘導療法の開始前に、合計 400 ml の全血が収集され、PolyTreg 製造のためにすぐに UCSF に輸送されます。

研究訪問 2: 膵島移植

この訪問で、参加者はアルバータ大学病院の現在の標準的な手順に従って膵島移植を受けます。 唯一の違いは、免疫抑制のためのタクロリムス/シロリムスの使用量が少ないことです。

調査訪問 3: 膵島移植後 30 日 ± 7 日

訪問 2 で、参加者は、アルバータ大学病院 (UAH) の臨床調査ユニット (CIU) で標準治療の代謝検査と血液サンプルを採取します。 これらのテストは、移植された膵島の機能を評価し、アルギニン刺激 c-ペプチド テストと確認テストを含みます。 血液サンプルは、約 90 分間にわたってさまざまな時間間隔で採取され、HbA1c、c-ペプチド、インスリン、およびグルコースについてテストされます。 研究者はまた、参加者のインスリン使用/血糖記録を確認するよう依頼する場合があります。 さらに、免疫プロファイル、抗体、T細胞機能の検査のために血液サンプルが採取されます。

研究訪問 4: PolyTreg 注入 (膵島移植後 6 週間 ± 7 日)

参加者は、PolyTregs 注入のための膵島移植後 6 週目に UAH に入院します。 彼/彼女は注入後、モニタリングのために24時間UAHに滞在します。 参加者が病院に滞在している間、注入されたPolyTregの持続性と安定性を評価するために血液サンプルが収集されます。

調査訪問 5: PolyTregs 注入後 1 週間 ± 2 日

血液サンプルは、PolyTregs 注入後 7 日目に UAH で収集され、注入された PolyTregs の持続性と安定性、および参加者の免疫プロファイルを評価します。

研究来院 6: PolyTregs 注入後 2 週間 ± 4 日

血液サンプルは、PolyTregs 注入後 14 日目に UAH で収集され、注入された PolyTregs の持続性と安定性、および参加者の免疫プロファイルを評価します。

研究来院 7: PolyTregs 注入後 4 週間 ± 7 日

血液サンプルは、PolyTregs 注入後 28 日目に UAH で収集され、注入された PolyTregs の持続性と安定性、および参加者の免疫プロファイルを評価します。

研究来院 8: PolyTreg 注入後 6 週間 ± 7 日 (膵島移植後 12 週間 ± 7 日)

この訪問では、参加者は標準的なケアの代謝検査を受け、UAH の CIU で血液サンプルが採取されます。 これらのテストは、移植された膵島の機能を評価し、アルギニン刺激 c-ペプチド テストと確認テストを含みます。 血液サンプルは、約 90 分間にわたってさまざまな時間間隔で採取され、HbA1c、c-ペプチド、インスリン、およびグルコースについてテストされます。 研究者はまた、参加者のインスリン使用/血糖記録を確認するよう依頼する場合があります。

研究訪問 9: PolyTregs 注入後 12 週間 ± 7 日

血液サンプルは、注入されたPolyTregの持続性と安定性、免疫プロファイルと抗体、およびT細胞機能を評価するために、PolyTreg注入後12週目にUAHで収集されます。

研究訪問10：PolyTregs注入後26週間±30日

血液サンプルは、注入されたPolyTregの持続性と安定性、免疫プロファイルと抗体、およびT細胞機能を評価するために、PolyTreg注入後26週目にUAHで収集されます。

研究訪問11：PolyTregs注入後52週間±30日

血液サンプルは、注入されたPolyTregの持続性と安定性、免疫プロファイルと抗体、およびT細胞機能を評価するために、PolyTreg注入後52週目にUAHで収集されます。 参加者は、UAH の CIU で標準治療の代謝検査と血液サンプルも取得します。 これらのテストは、移植された膵島の機能を評価し、アルギニン刺激 c-ペプチド テストと確認テストを含みます。 血液サンプルは、約 90 分間にわたってさまざまな時間間隔で採取され、HbA1c、c-ペプチド、インスリン、およびグルコースについてテストされます。 研究者はまた、参加者のインスリン使用/血糖記録を確認するよう依頼する場合があります。

長期の標準治療フォローアップ

研究訪問11の後、参加者は膵島移植の標準的なケアスケジュールに従います。

コントロール グループの場合:

研究訪問 1: 膵島移植

この訪問で、参加者はアルバータ大学病院の現在の標準的な手順に従って膵島移植を受けます。 唯一の違いは、免疫抑制のためのタクロリムス/シロリムスの使用量が少ないことです。

調査訪問 2: 膵島移植後 30 日 (± 7 日)

訪問 2 で、参加者は、アルバータ大学病院 (UAH) の臨床調査ユニット (CIU) で標準治療の代謝検査と血液サンプルを採取します。 これらのテストは、移植された膵島の機能を評価し、アルギニン刺激 c-ペプチド テストと確認テストを含みます。 血液サンプルは、約 90 分間にわたってさまざまな時間間隔で採取され、HbA1c、c-ペプチド、インスリン、およびグルコースについてテストされます。 治験責任医師は、患者のインスリン使用量/血糖記録の確認を依頼する場合もあります。 さらに、免疫プロファイル、抗体、T細胞機能の検査のために血液サンプルが採取されます。

調査訪問 3: 膵島移植後 7 週間 ± 7 日

訪問3で、参加者の免疫プロファイルを評価するためにUAHで血液サンプルが収集されます。

研究訪問 4: 膵島移植後 8 週間 ± 7 日

訪問4で、参加者の免疫プロファイルを評価するためにUAHで血液サンプルが収集されます。

調査訪問 5: 膵島移植後 10 週間 ± 7 日

訪問5で、参加者の免疫プロファイルを評価するためにUAHで血液サンプルが収集されます。

調査訪問 6: 膵島移植後 12 週間 ± 7 日

この訪問では、参加者は、アルバータ大学病院 (UAH) の臨床調査ユニット (CIU) で標準治療の代謝検査と血液サンプルを採取します。 これらのテストは、移植された膵島の機能を評価し、アルギニン刺激 c-ペプチド テストと確認テストを含みます。 血液サンプルは、約 90 分間にわたってさまざまな時間間隔で採取され、HbA1c、c-ペプチド、インスリン、およびグルコースについてテストされます。 治験責任医師は、患者のインスリン使用量/血糖記録の確認を依頼する場合もあります。

調査訪問 7: 膵島移植後 18 週間 ± 7 日

訪問7で、参加者の免疫プロファイルと抗体およびT細胞機能を評価するために、UAHで血液サンプルが収集されます。

調査訪問 8: 膵島移植後 32 週間 ± 30 日

訪問8で、参加者の免疫プロファイルと抗体およびT細胞機能を評価するために、UAHで血液サンプルが収集されます。

研究訪問 9: 膵島移植後 58 週間 ± 30 日

9回目の来院時に、UAHで血液サンプルを採取し、参加者の免疫プロファイルと抗体およびT細胞機能を評価します。 研究参加者は、UAH の CIU で標準治療の代謝検査と血液サンプルも受けます。 これらのテストは、移植された膵島の機能を評価し、アルギニン刺激 c-ペプチド テストと確認テストを含みます。 血液サンプルは、約 90 分間にわたってさまざまな時間間隔で採取され、HbA1c、c-ペプチド、インスリン、およびグルコースについてテストされます。 研究者はまた、参加者のインスリン使用/血糖記録を確認するよう依頼する場合があります。

長期の標準治療フォローアップ

研究訪問9の後、参加者は膵島移植の標準的なケアスケジュールが続きます。