DHPLCプラットフォームを応用して、さまざまな遺伝関連疾患の新たな検出技術を確立。

近位脊髄性筋萎縮症は常染色体劣性遺伝性疾患で、全体の発生率は出生 10,000 人に 1 人、キャリア頻度は 50 人に 1 人です。 この重度の神経筋疾患は、脊髄前角細胞のα運動ニューロンの変性と喪失を特徴とし、その結果、進行性の対称的な筋力低下、近位随意筋の萎縮、および乳児の死亡が引き起こされます。 ここでは、SMN1 欠失を検出し、変性高速液体クロマトグラフィー (DHPLC) によって SMN1 と SMN2 のコピー数を決定する、新しい、迅速、簡単、信頼性の高い方法を紹介します。 我々は、このアッセイが 2 つの遺伝子コピーと 4 つの遺伝子コピーを正確に区別でき、SMN コピー数の正確な測定により SMA キャリアと正常集団を識別できることを実証します。

糞便 DNA 検査は、結腸直腸がんのスクリーニングに有望なツールです。 研究者らは、DNA は便中で安定しているため、優れたマーカーであることを示しました。それは継続的に脱落します。そして、増幅検査を使用することで、微量でも検出できます。 結腸癌の発癌過程に関連する多くの DNA 変異が特徴付けられています。 K-ras 癌遺伝子、大腸腺腫性ポリポーシス (APC)、p53、およびマイクロサテライト マーカーは、結腸直腸細胞の増殖の制御に重要であるため、便検査の DNA マーカーとして標的となる遺伝子の例です。 初期の臨床研究では、多標的 DNA 検査の癌の検出感度は 71% ～ 91%、1cm 以上の腺腫の検出感度は 55% ～ 82% であることが示されています。 我々は、自動DHPLC分析と最初にすでに設定されているマイクロサテライトマーカーを使用して、結腸直腸癌スクリーニングのための高スループットでありながら高感度で特異的なスクリーニング方法を段階的にセットアップすることにより、この研究を設計します。

新生児高ビリルビン血症は一般的な問題であり、小児科医だけでなく新生児の親にとっても懸念事項です。 ビリルビン代謝に関与する 2 つの重要な酵素、UDP-グルクロノシルトランスフェラーゼ 1A1 とヘムオキシゲナーゼ-1 (HO-1) が非常に注目されています。 まず、UGT1A1 はビリルビン結合の重要な酵素であり、UGT1A1 の変異はクリグラー・ナジャール症候群およびギルバート症候群として知られる非結合型高ビリルビン血症を引き起こします。 Gly71Arg の高い対立遺伝子頻度と UGT1A1 遺伝子のプロモーター多型が、明らかな原因のない新生児高ビリルビン血症の原因であることが判明しました。 第二に、HO-1 はヘム代謝における律速酵素であり、ヘムのビリベルジンへの分解を可能にします。 最近、丸尾ら。は、明らかな長期にわたる黄疸を有する母乳栄養の日本人乳児（16/17）が、UGT1A1 の少なくとも 1 つの変異を持っていることを実証しました。 これらのデータは、UGT1A1 の欠陥が母乳に関連した長期にわたる非抱合型高ビリルビン血症の根本的な原因である可能性を示唆しました。 しかし、現在までのところ、母乳で育てられた乳児の重度の高ビリルビン血症とUGT1A1遺伝子変異との関連性はまだ不明である。 本研究では、母乳に関連する非抱合型高ビリルビン血症を患う乳児のUGT1A1遺伝子とHO-1遺伝子を解析し、遺伝的要因が関与しているかどうかを確認する。

このプロジェクトは、SMA の診断、SMN1 および SMN2 遺伝子の保因者検出、結腸直腸癌スクリーニングのための高感度で特異的なスクリーニング方法、および SMA の UGT1A1 および HO-1 遺伝子の分析のためのさまざまな新規で高速かつ信頼性の高いアプリケーションの確立に DHPLC を適用することに貢献します。母乳に関連する非抱合型高ビリルビン血症の乳児。