2型糖尿病患者におけるインスリン抵抗性に対する食事頻度の影響 (Frequency)

プロジェクトの目的と優先順位 この研究の目的は次のとおりです。

1. インスリン感受性、インスリン分泌、肝脂肪含量に対する食事の頻度（同じ 1 日のカロリー制限を 500 kcal/日以下として、1 日 6 食対 2 食）の影響をテストします。
2. さまざまな食事頻度（内臓脂肪の量、肝脂肪含量、アディポカインの血清濃度、腸内ホルモン、酸化ストレスマーカー）の作用機序のいくつかを特徴づけます。
3. 教育を受けた場合と食事の準備を一人でさせた場合の参加者が、研究期間中のすべての食事が提供される場合と比較して、両方のレジメンで低カロリー食を維持できる能力をテストします。

これは無作為化クロスオーバー研究で、2型糖尿病患者50人が、1日6食と2食の2つのレジメンをランダムな順序で変更する。 各テスト期間には 3 か月かかります。

グルコースと脂質の代謝とその調節は、開始時と各 3 か月後に徹底的に検査されます (食事検査、高インスリン血症等血糖クランプ、間接熱量測定、肝臓の MRI スキャン、DXA スキャン、選択されたアディポカインの血清濃度測定、腸管)ホルモン、酸化ストレスマーカーなど）。

仮説 研究者らは、（絶食期間によって達成される）血漿インスリン濃度が低いと、インスリン抵抗性と肝臓の脂質含有量が減少するという仮説を立てています。 対照的に、頻繁な食事（およびその結果としての血漿インスリン濃度の上昇）は、非アルコール性脂肪肝疾患およびインスリン抵抗性を引き起こしやすくなります。 研究者らはさらに、すべての食事が提供される参加者と比較して、食事の準備を任せられた場合、参加者は（徹底した教育にもかかわらず）食事の頻度が増えることでカロリー摂取量が増加するとの仮説を立てている。

キーワード インスリン抵抗性、食事頻度、2 型糖尿病、非アルコール性脂肪肝疾患、アディポカイン、腸内ホルモン、酸化ストレス 方法論 研究デザイン: 研究者は、2 型糖尿病患者 50 名を対象とするランダム化クロスオーバー研究のデザインを使用します。糖尿病の場合、食事の回数がランダムに変化します。1 日 6 食、2 食です。 カロリー制限は同じです（-500 kcal/日）。 各テスト期間には 3 か月かかります。 参加者の半数には、研究中のすべての食事が提供されます。 残りの半分は、両方のレジメンで毎日のカロリー摂取量を維持する方法を徹底的に教育され、食事の準備は自分で行います。

研究グループ：食事療法のみまたは経口血糖降下薬で治療を受けている2型糖尿病患者50名、糖尿病期間が少なくとも1年、男女ともに、年齢30～65歳、BMI 27～50kg/m²。 被験者は研究の目的、方法、リスクについて説明され、インフォームドコンセントに署名します（付録1）。

レジメン: 1 日 6 食レジメンでは、参加者は総カロリー摂取量を 6 回の食事に分割し、2 ～ 3 時間ごとに食事をするように求められます。 1日2食療法では、総カロリー摂取量を2回の食事に分けます。最初の食事は午前6時から10時までの間に食べられ、2番目の食事は正午から午後4時までに食べられます。

身体活動: 参加者には、研究中に運動習慣を変えないよう求められます。 身体活動は、歩数計と標準化された質問票（国際身体活動質問票 (IPAQ) および Baecke 質問票）を使用して監視されます。

手順:

3 か月ごとの最初 (0 週目) と終わり (12 週目と 24 週目) に、各被験者で次の手順と測定が実行されます (各被験者で 3 回)。

1. 一般的な身体計測調査 (体重、BMI、ウエストおよびヒップ周囲径)、臨床検査評価 (一般的な臨床検査、グルコースおよび脂質代謝のパラメーター、選択されたアディポカイン、酸化ストレス マーカー、腸内ホルモン、血清中の脂肪酸組成) のために血液サンプルが採取されます。リン脂質など - 分析方法を参照)。
2. 標準的な朝食/バゲット後の耐糖能評価のための食事検査 クロコダイル チーズ グルメ - 180g、エネルギー 452,8 Kcal/1895,7 kJ、組成: 炭水化物 49,2 g (44,55%)、タンパク質 18,5 g (16, 74%)、脂質 18.8 g (38.7%)、そのうち飽和 6.8 g、一価不飽和 6.0 g、多価不飽和 5.0 g/。 血糖、C-ペプチド、免疫反応性インスリン (IRI) を評価するための血液サンプルは、朝食後 0、30、60、120、180 分後に採取されます。
3. 高インスリン血症 (1 mU/kg/min) 等血糖クランプ (HIC) 間接熱量測定による 3 時間。 この方法により、インスリン抵抗性とエネルギー基質利用の正確な定量化が可能になります。
4. 肝臓の脂肪含量を測定するための肝臓の MRI (磁気共鳴画像法) スキャン。
5. DXA (デュアルエネルギー X 線吸収測定) スキャンにより、全身組成と脂肪含有量を測定します。
6. インスリン分泌と血糖コントロールは、各レジメンの終了時に 1 日間の入院中に測定されます。 血液サンプルは 1 日を通して 3 時間ごとに採取されます。 微量アルブミン尿とC-ペプチド老廃物を測定するために、一日中尿を収集します。

分析方法:

選択されたアディポカイン（レジスチン、総アディポネクチン、HMW-アディポネクチン、TNFαおよびレプチン）および他のサイトカインおよびタンパク質（FABP）の血漿濃度は、標準キット（ELISA、Linco、USA）を使用して酵素的に測定されます。 腸内ホルモンの血漿レベルは、標準キット（Milliplex、Millipore、米国）を使用して酵素的に測定されます。 脂質過酸化のパラメーターは、チオバルビツール酸との反応による TBARS のレベルおよび共役ジエンのレベルに従って決定されます。

還元および酸化グルタチオンのレベルは、蛍光検出を備えた HPLC 法を使用して測定されます。 アスコルビン酸は、ジニトロフェニルヒドラジンとの分光光度反応により測定されます。 血清中のα-トコフェロールおよびγ-トコフェロールの濃度は、Catignani および Biery の改良法に従って、蛍光検出を備えた逆相高速液体クロマトグラフィー (HPLC) によって測定されます。 SOD の活性は、ニトロテトラゾリウム ブルーの還元とニトロホルマサンの生成をブロックする反応によって分析されます。 カタラーゼ活性の測定は、モリブデン酸アンモニウムを用いて分光光度法で検出される発色複合体を生成する H2O2 の能力に基づいています。 グルタチオンペルオキシダーゼの活性は、エルマン試薬によるグルタチオンの酸化速度によってモニターされます。 血清グルコースはグルコースオキシダーゼ法 Beckman Analyzer (Beckman Instruments Inc.、米国カリフォルニア州フラートン) を使用して分析され、IRI は IMMUNOTECH インスリン IRMA キット (IMMUNOTECH as、チェコ共和国プラハ) を使用したラジオイムノアッセイによって決定されます。ペプチドは IMMUNOTECH C-Peptide IRMA キット (IMMUNOTECH as、チェコ共和国プラハ) を使用して測定され、糖化ヘモグロビンは Bio-Rad ヘモグロビン A1c カラム テスト (Bio-Rad Laboratories GmbH、ミュンヘン、ドイツ) によって測定されます。

血清リン脂質中の脂肪酸パターンは、Folch に従って脂質を抽出し、薄層クロマトグラフィーによって脂質画分を分離した後に測定されます。 脂肪酸のメチルエステルはガスクロマトグラフィーによって分離されます。

異なる食事頻度のレジメンの最終的な影響は、選択された遺伝子多型に基づいて評価されます。

統計分析: ANOVA 検定、ペアおよびアンペア t 検定、および標準統計プログラムを使用するその他の統計手法を使用して行われます。 採用される被験者の数の推定は、統計ソフトウェア PASS 2005 (Number Cruncher Statistical Systems、米国ユタ州ケイズビル) による反復測定の検出力分析を使用して行われました。 このモデルに含まれる要因は、個人間要因（対照群と実験群）、個人内要因（研究における個々の時間スタジアム）、および要因間の相互作用（対照群と実験群の時間プロファイル間の乖離度）です。

期間: 2010 年 12 月～2011 年 2 月 参加者の募集 2011 年 3 月 研究開始 グループ A: 12 週間 1 日 6 食、その後追加の 12 週間 2 食/日 グループ B: 12 週間 2 食/日の後に追加の 12 1日6食の週 2011年9月 研究終了

すべての測定は開始時、第 12 週目、および第 24 週目に行われます。