Effekt af måltidshyppighed på insulinresistens hos personer med type 2-diabetes (Frequency)

Projektets mål og prioriteter Formålet med denne undersøgelse er at

1. teste effekten af ​​hyppighed af måltider (seks vs. to måltider dagligt med den samme daglige kaloriebegrænsning på -500 kcal/dag) på insulinfølsomhed, insulinsekretion og fedtindhold i leveren.
2. karakterisere nogle af virkningsmekanismerne for forskellige hyppigheder af måltider (mængde af visceralt fedt, leverfedtindhold, serumkoncentrationer af adipokiner, tarmhormoner, oxidationsstressmarkører).
3. teste deltagernes evne til at opretholde kaloriefattig diæt på begge regimer, når de er uddannet og overlades til at tilberede deres måltider alene sammenlignet med dem, for hvem alle måltider under undersøgelsen vil blive leveret.

Det vil være et randomiseret, crossover-studie, hvor 50 personer med type 2-diabetes vil skifte i en tilfældig rækkefølge to regimer: seks og to måltider om dagen. Hver testperiode vil tage tre måneder.

Glukose- og lipidmetabolisme og dets regulering vil blive grundigt testet ved start og efter hver 3-måneders periode (måltidstest, hyperinsulinemisk isoglykæmisk klemme, indirekte kalorimetri, MRI-scanning af leveren, DXA-scanning, serumkoncentrationsbestemmelse af udvalgte adipokiner, tarm hormoner og oxidationsstressmarkører).

Hypotese Forskerne antager, at lave plasmainsulinniveauer (som opnået ved fasteperioder) vil reducere insulinresistens og leverlipidindhold. I modsætning hertil vil hyppige måltider (og deraf følgende højere plasmaniveauer af insulin) disponere for ikke-alkoholisk fedtleversygdom og insulinresistens. Efterforskerne antager yderligere, at deltagerne vil øge deres kalorieindtag med øget måltidsfrekvens (på trods af grundig uddannelse), når de bliver overladt til at forberede deres måltider sammenlignet med dem, for hvem alle måltider vil blive leveret.

Nøgleord Insulinresistens, måltidshyppighed, type 2-diabetes mellitus, ikke-alkoholisk fedtleversygdom, adipokiner, tarmhormoner, oxidativ stress Metode Undersøgelsesdesign: efterforskerne vil bruge designet af et randomiseret, crossover-studie, hvor 50 personer med type 2 diabetes vil ændre hyppigheden af ​​deres måltider i en tilfældig rækkefølge: seks og to måltider om dagen. Kaloriebegrænsningen vil være den samme (-500 kcal/dag). Hver testperiode vil tage tre måneder. For halvdelen af ​​deltagerne vil alle måltider under undersøgelsen blive leveret. Den anden halvdel vil blive grundigt uddannet i, hvordan de vedligeholder deres daglige kalorieindtag under begge kure, og de vil tilberede deres måltider alene.

Undersøgelsesgruppe: 50 personer med type 2-diabetes behandlet udelukkende med diæt eller orale hypoglykæmiske midler, diabetesvarighed mindst 1 år, både mænd og kvinder, i alderen 30-65 år, BMI 27-50 kg/m². Forsøgspersonerne vil blive forklaret formål, metoder og risici ved undersøgelsen, og de vil underskrive informeret samtykke (bilag 1).

Kurser: På regimen med seks måltider pr. dag vil deltagerne blive bedt om at dele deres samlede kalorieindtag i seks måltider og spise hver anden eller tredje time. På to-måltider-per-dag-kuren vil de dele deres samlede kalorieindtag i to måltider: Det første måltid vil blive spist mellem 6 og 10 om morgenen, det andet mellem middag og 16.

Fysisk aktivitet: Deltagerne vil blive bedt om ikke at ændre deres træningsvaner under undersøgelsen. Fysisk aktivitet vil blive overvåget ved hjælp af skridttællere og standardiserede spørgeskemaer: International Physical Activity Questionnaire (IPAQ) og Baecke spørgeskema.

Procedurer:

I begyndelsen (uge 0) og i slutningen af ​​hver 3. måned (uge 12 og 24) vil følgende procedurer og målinger blive udført for hvert emne (tre gange i hvert emne):

1. Almindelige antropometriske undersøgelser (kropsvægt, BMI, talje- og hofteomkreds), blodprøver vil blive taget til laboratorievurderinger (almindelige laboratorieundersøgelser, parametre for glukose- og lipidmetabolisme, udvalgte adipokiner, oxidative stressmarkører, tarmhormoner, fedtsyresammensætning i serum fosfolipider osv. - se analysemetoder).
2. Måltidstest for glukosetolerancevurdering efter standard morgenmad/baguette Crocodille Cheese Gourmet - 180g, energi 452,8 Kcal/1895,7 kJ, sammensætning: kulhydrater 49,2 g (44,55%), proteiner 18,5 g (16, 74%), lipider 18,8 g (38,7%), heraf mættede 6,8 g, monoumættede 6,0 g, flerumættede 5,0 g/. Blodprøver til vurdering af glykæmi, C-peptid, immunreaktivt insulin (IRI) tages 0, 30, 60, 120 og 180 minutter efter morgenmaden.
3. Hyperinsulinemisk (1 mU/kg/min) isoglykæmisk klemme (HIC) 3 timer lang med indirekte kalorimetri. Denne metode tillader nøjagtig kvantificering af insulinresistens og energisubstratudnyttelse.
4. MR-scanning (magnetisk resonansbilleddannelse) af leveren for at måle fedtindholdet i leveren.
5. DXA (Dual Energy X-ray absorptiometri) scanning for at måle den samlede kropssammensætning og fedtindhold.
6. Insulinsekretion og glukosekontrol vil blive målt under et 1-dags ophold på hospitalet ved afslutningen af ​​hver kur. Der vil blive taget blodprøver hver tredje time hele dagen. Urin vil blive indsamlet i løbet af hele dagen for at måle mikroalbuminuri og C-peptidaffald.

Analysemetoder:

Plasmakoncentrationer af udvalgte adipokiner (resistin, adiponectin total, HMW-adiponectin, TNFalfa og leptin) og andre cytokiner og proteiner (FABP) vil blive målt enzymatisk ved hjælp af standard kits (ELISA, Linco, USA). Plasmaniveauer af tarmhormoner vil blive målt enzymatisk ved hjælp af standardsæt (Milliplex, Millipore, USA). Parametre for lipidperoxidation vil blive bestemt i henhold til niveauerne af TBARS ved reaktionen med thiobarbitursyre og ifølge niveauerne af konjugerede diener.

Niveauet af reduceret og oxideret glutathion vil blive bestemt ved hjælp af HPLC-metoden med fluorescensdetektion. Ascorbinsyre vil blive bestemt spektrofotometrisk reaktion med dinitrophenylhydrazin. Koncentrationer af a- og g-tocopherol i serum vil blive bestemt ved omvendt fase højtydende væskekromatografi (HPLC) med fluorescensdetektion i henhold til den modificerede metode fra Catignani og Biery. Aktiviteten af ​​SOD vil blive analyseret ved reaktionen af ​​blokering af nitrotethrazolium blå reduktion og nitrophormasane dannelse. Catalaseaktivitetsmåling er baseret på H2O2's evne til med ammoniummolybdat at producere det farvekompleks, der detekteres spektrofotometrisk. Aktiviteten af ​​gluthathionperoxidase vil blive overvåget ved hjælp af Ellman-reagensets oxidationshastighed af gluthathion. Serumglukose vil blive analyseret ved hjælp af glucose-oxidasemetoden Beckman Analyzer (Beckman Instruments Inc., Fullerton, CA, USA), IRI vil blive bestemt ved radioimmunoassay ved hjælp af et IMMUNOTECH Insulin IRMA kit (IMMUNOTECH as, Prag, Tjekkiet), C- peptid ved hjælp af et IMMUNOTECH C-Peptide IRMA-kit (IMMUNOTECH as, Prag, Tjekkiet) og glykeret hæmoglobin vil blive målt ved en Bio-Rad Hæmoglobin A1c kolonnetest (Bio-Rad Laboratories GmbH, München, Tyskland).

Fedtsyremønster i serumfosfolipider vil blive målt efter lipidekstraktion ifølge Folch og adskillelse af lipidfraktioner ved tyndtlagskromatografi. Methylesterne af fedtsyrer vil blive adskilt ved gaskromatografi.

Eventuelle effekter af forskellige måltidshyppighedsregimer vil blive evalueret på grund af udvalgte genpolymorfier.

Statistisk analyse: Vil blive udført ved brug af ANOVA-tests, parre og ophæve t-tests og andre statistiske metoder ved brug af standard statistiske programmer. Estimat af antallet af forsøgspersoner, der skulle rekrutteres, blev foretaget ved hjælp af effektanalyse af gentagne målinger via statistisk software PASS 2005 (Number Cruncher Statistical Systems, Kaysville, UT, USA). Faktorer, der indgår i denne model, er interindividuelle faktorer (kontrol vs. eksperimentel gruppe), intraindividuelle faktorer (individuelt tidsstadion i undersøgelsen) og interaktion mellem faktorer (divergensgrad mellem tidsprofiler i kontrol- og forsøgsgruppe).

Tidsramme: december 2010-februar 2011 rekruttering af deltagere Marts 2011 start af undersøgelsen Gruppe A: 12 uger 6 måltider/dag efterfulgt af yderligere 12 uger af 2 måltider/dag Gruppe B: 12 ​​uger 2 måltider/dag efterfulgt af yderligere 12 uger uger af 6 måltider/dag september 2011 afslutning på undersøgelsen

Alle målinger vil blive udført ved start, uge ​​12 og uge 24.