Effekt av måltidsfrekvens på insulinresistens hos personer med type 2-diabetes (Frequency)

Mål og prioriteringer for prosjektet Formålet med denne studien er å

1. test effekten av frekvensen av måltider (seks vs. to måltider daglig med samme daglige kalorirestriksjon på -500 kcal/dag) på insulinfølsomhet, insulinsekresjon og fettinnhold i leveren.
2. karakterisere noen av virkningsmekanismene for ulike måltidsfrekvenser (mengde visceralt fett, leverfettinnhold, serumkonsentrasjoner av adipokiner, tarmhormoner, oksidasjonsstressmarkører).
3. teste deltakernes evne til å opprettholde hypokalorisk diett på begge regimene når de er utdannet og lar de tilberede måltidene alene sammenlignet med de som alle måltider under studien vil bli gitt til.

Det vil være en randomisert, crossover-studie, der 50 personer med type 2-diabetes vil endre i tilfeldig rekkefølge to regimer: seks og to måltider om dagen. Hver testperiode vil ta tre måneder.

Glukose- og lipidmetabolismen og dens regulering vil bli grundig testet ved oppstart og etter hver 3-månedersperiode (måltidstest, hyperinsulinemisk isoglykemisk klemme, indirekte kalorimetri, MR-skanning av leveren, DXA-skanning, serumkonsentrasjonsbestemmelse av utvalgte adipokiner, tarm hormoner og oksidasjonsstressmarkører).

Hypotese Etterforskerne antar at lave plasmainsulinnivåer (som oppnås ved perioder med faste) vil redusere insulinresistens og hepatisk lipidinnhold. I motsetning til dette vil hyppige måltider (og påfølgende høyere plasmanivåer av insulin) disponere for alkoholfri fettleversykdom og insulinresistens. Undersøkerne antar videre at deltakerne vil øke kaloriinntaket sitt med økt måltidsfrekvens (til tross for grundig opplæring) når de får tilberede måltidene sine sammenlignet med de som alle måltider vil bli gitt til.

Stikkord Insulinresistens, måltidsfrekvens, diabetes mellitus type 2, ikke-alkoholisk fettleversykdom, adipokiner, tarmhormoner, oksidativt stress Metodikk Studiedesign: etterforskerne vil bruke designet av en randomisert, crossover-studie, der 50 individer med type 2 diabetes vil endre frekvensen av måltidene i en tilfeldig rekkefølge: seks og to måltider om dagen. Kalorirestriksjonen vil være den samme (-500 kcal/dag). Hver testperiode vil ta tre måneder. For halvparten av deltakerne vil alle måltider under studien bli gitt. Den andre halvparten vil bli grundig opplært i hvordan de opprettholder sitt daglige kaloriinntak under begge kurene, og de vil tilberede måltidene sine alene.

Studiegruppe: 50 individer med type 2-diabetes behandlet med kun diett eller orale hypoglykemiske midler, diabetesvarighet minst 1 år, både menn og kvinner, alder 30-65 år, BMI 27-50 kg/m². Forsøkspersonene vil bli forklart mål, metoder og risiko ved studien og de vil signere informert samtykke (vedlegg 1).

Regimer: På regimet med seks måltider per dag vil deltakerne bli bedt om å dele opp det totale kaloriinntaket i seks måltider og spise hver annen eller tredje time. På to-måltider-per-dag-regimet vil de dele det totale kaloriinntaket i to måltider: det første måltidet vil bli spist mellom kl. 06.00 og 10.00, det andre mellom kl. 12.00 og 16.00.

Fysisk aktivitet: Deltakerne vil bli bedt om å ikke endre treningsvanene i løpet av studien. Fysisk aktivitet vil bli overvåket ved hjelp av skrittellere og standardiserte spørreskjemaer: International Physical Activity Questionnaire (IPAQ), og Baecke spørreskjema.

Prosedyrer:

Ved begynnelsen (uke 0), og på slutten av hver tredje måned (uke 12 og 24), vil følgende prosedyrer og målinger bli utført for hvert fag (tre ganger i hvert fag):

1. Vanlige antropometriske undersøkelser (kroppsvekt, BMI, midje- og hofteomkrets), blodprøver vil bli tatt for laboratorievurderinger (vanlige laboratorietester, parametere for glukose- og lipidmetabolisme, utvalgte adipokiner, oksidative stressmarkører, tarmhormoner, fettsyresammensetning i serum fosfolipider etc.- se analysemetoder).
2. Måltidstest for glukosetoleransevurdering etter standard frokost /baguette Crocodille Cheese Gourmet - 180g, energi 452,8 Kcal/1895,7 kJ, sammensetning: karbohydrater 49,2 g (44,55%), proteiner 18,5 g (16, 74 %), lipider 18,8 g (38,7 %), hvorav mettet 6,8 g, enumettet 6,0 g, flerumettet 5,0 g/. Blodprøver for vurdering av glykemi, C-peptid, immunreaktivt insulin (IRI) vil bli tatt 0, 30, 60, 120 og 180 minutter etter frokost.
3. Hyperinsulinemisk (1 mU/kg/min) isoglykemisk klemme (HIC) 3 timer lang med indirekte kalorimetri. Denne metoden tillater nøyaktig kvantifisering av insulinresistens og energisubstratutnyttelse.
4. MR-skanning (magnetisk resonansavbildning) av leveren for å måle fettinnholdet i leveren.
5. DXA (Dual Energy X-ray absorptiometri) skanning for å måle total kroppssammensetning og fettinnhold.
6. Insulinsekresjon og glukosekontroll vil bli målt under et døgnopphold på sykehuset ved slutten av hver diett. Det vil bli tatt blodprøver hver tredje time hele dagen. Urin vil bli samlet inn i løpet av hele dagen for å måle mikroalbuminuri og C-peptidavfall.

Analysemetoder:

Plasmakonsentrasjoner av utvalgte adipokiner (resistin, adiponectin totalt, HMW-adiponectin, TNFalfa og leptin) og andre cytokiner og proteiner (FABP) vil bli målt enzymatisk ved bruk av standardsett (ELISA, Linco, USA). Plasmanivåer av tarmhormoner vil bli målt enzymatisk ved bruk av standardsett (Milliplex, Millipore, USA). Parametre for lipidperoksidasjon vil bli bestemt i henhold til nivåene av TBARS ved reaksjonen med tiobarbitursyre og i henhold til nivåene av konjugerte diener.

Nivået av redusert og oksidert glutation vil bli bestemt ved hjelp av HPLC-metoden med fluorescensdeteksjon. Askorbinsyre vil bli bestemt spektrofotometrisk reaksjon med dinitrofenylhydrazin. Konsentrasjoner av a- og g-tokoferol i serum vil bli bestemt ved omvendt fase høyytelses væskekromatografi (HPLC) med fluorescensdeteksjon i henhold til den modifiserte metoden til Catignani og Biery. Aktiviteten til SOD vil bli analysert ved å blokkere nitrotethrazoliumblått reduksjon og nitroformasandannelse. Katalaseaktivitetsmåling er basert på evnen til H2O2 til å produsere med ammoniummolybdat fargekomplekset detektert spektrofotometrisk. Aktiviteten til glutationperoksidase vil bli overvåket av oksidasjonshastigheten til glutation med Ellman-reagens. Serumglukose vil bli analysert ved hjelp av glukose-oksidasemetoden Beckman Analyzer (Beckman Instruments Inc., Fullerton, CA, USA), IRI vil bli bestemt ved radioimmunoassay ved bruk av et IMMUNOTECH Insulin IRMA-sett (IMMUNOTECH as, Praha, Tsjekkia), C- peptid ved bruk av et IMMUNOTECH C-Peptide IRMA-sett (IMMUNOTECH as, Praha, Tsjekkia) og glykert hemoglobin vil bli målt ved en Bio-Rad Hemoglobin A1c kolonnetest (Bio-Rad Laboratories GmbH, München, Tyskland).

Fettsyremønster i serumfosfolipider vil bli målt etter lipidekstraksjon i henhold til Folch og separasjon av lipidfraksjoner ved tynnsjiktskromatografi. Metylesterne av fettsyrer vil bli separert ved gasskromatografi.

Eventuelle effekter av ulike måltidsfrekvensregimer vil bli evaluert på grunn av valgte genpolymorfismer.

Statistisk analyse: Vil bli utført med bruk av ANOVA-tester, par- og oppkoblings-t-tester og andre statistiske metoder ved bruk av standard statistikkprogrammer. Estimat av antall forsøkspersoner som skulle rekrutteres ble gjort ved hjelp av kraftanalyse av gjentatte målinger via statistikkprogramvare PASS 2005 (Number Cruncher Statistical Systems, Kaysville, UT, USA). Faktorer som inngår i denne modellen er interindividuelle faktorer (kontroll vs. eksperimentell gruppe), intraindividuelle faktorer (individuell tid stadion i studien) og interaksjon mellom faktorer (divergensgrad mellom tidsprofiler i kontroll og eksperimentell gruppe).

Tidsramme: desember 2010-februar 2011 rekruttering av deltakerne mars 2011 start av studien Gruppe A: 12 uker 6 måltider/dag etterfulgt av ytterligere 12 uker med 2 måltider/dag Gruppe B: 12 ​​uker 2 måltider/dag etterfulgt av ytterligere 12 uker uker med 6 måltid/dag september 2011 slutten av studien

Alle målinger vil bli gjort ved oppstart, uke 12 og uke 24.