Einfluss der Mahlzeitenhäufigkeit auf die Insulinresistenz bei Patienten mit Typ-2-Diabetes (Frequency)

Ziele und Prioritäten des Projekts Der Zweck dieser Studie besteht darin

1. Testen Sie die Auswirkung der Häufigkeit der Mahlzeiten (sechs vs. zwei Mahlzeiten täglich bei gleicher täglicher Kalorienbeschränkung von -500 kcal/Tag) auf die Insulinsensitivität, die Insulinsekretion und den Leberfettgehalt.
2. charakterisieren einige der Wirkmechanismen verschiedener Mahlzeitenfrequenzen (Menge an viszeralem Fett, Leberfettgehalt, Serumkonzentrationen von Adipokinen, Darmhormonen, Oxidationsstressmarker).
3. Testen Sie die Fähigkeit der Teilnehmer, eine hypokalorische Ernährung bei beiden Regimen aufrechtzuerhalten, wenn sie geschult sind und ihre Mahlzeiten alleine zubereiten können, im Vergleich zu denen, denen während der Studie alle Mahlzeiten zur Verfügung gestellt werden.

Es handelt sich um eine randomisierte Crossover-Studie, bei der 50 Personen mit Typ-2-Diabetes in zufälliger Reihenfolge zwei Mahlzeiten zu sich nehmen: sechs und zwei Mahlzeiten pro Tag. Jeder Testzeitraum dauert drei Monate.

Der Glukose- und Lipidstoffwechsel und seine Regulierung werden zu Beginn und nach jedem 3-Monats-Zeitraum gründlich getestet (Mahlzeitentest, hyperinsulinämische isoglykämische Klemme, indirekte Kalorimetrie, MRT-Scan der Leber, DXA-Scan, Bestimmung der Serumkonzentration ausgewählter Adipokine, Darm). Hormone und Oxidationsstressmarker).

Hypothese Die Forscher gehen davon aus, dass niedrige Plasmainsulinspiegel (wie sie durch Fastenperioden erreicht werden) die Insulinresistenz und den Leberlipidgehalt verringern. Im Gegensatz dazu begünstigen häufige Mahlzeiten (und daraus resultierende höhere Insulinspiegel im Plasma) die Entstehung einer nichtalkoholischen Fettlebererkrankung und einer Insulinresistenz. Die Forscher gehen außerdem davon aus, dass die Teilnehmer ihre Kalorienaufnahme mit zunehmender Essenshäufigkeit (trotz gründlicher Aufklärung) erhöhen, wenn sie ihre Mahlzeiten selbst zubereiten, im Vergleich zu denen, für die alle Mahlzeiten bereitgestellt werden.

Schlüsselwörter Insulinresistenz, Mahlzeitenhäufigkeit, Typ-2-Diabetes mellitus, nichtalkoholische Fettlebererkrankung, Adipokine, Darmhormone, oxidativer Stress Methodik Studiendesign: Die Forscher werden das Design einer randomisierten Crossover-Studie verwenden, an der 50 Personen mit Typ 2 teilnehmen Diabetiker verändern in zufälliger Reihenfolge die Häufigkeit ihrer Mahlzeiten: sechs und zwei Mahlzeiten am Tag. Die Kalorieneinschränkung bleibt gleich (-500 kcal/Tag). Jeder Testzeitraum dauert drei Monate. Für die Hälfte der Teilnehmer werden alle Mahlzeiten während der Studie bereitgestellt. Die andere Hälfte wird umfassend darin geschult, wie sie ihre tägliche Kalorienzufuhr während beider Kuren aufrechterhalten kann, und sie wird ihre Mahlzeiten alleine zubereiten.

Studiengruppe: 50 Personen mit Typ-2-Diabetes, die nur mit Diät oder oralen Antidiabetika behandelt wurden, Diabetesdauer mindestens 1 Jahr, sowohl Männer als auch Frauen, Alter 30–65 Jahre, BMI 27–50 kg/m². Den Probanden werden Ziele, Methoden und Risiken der Studie erläutert und sie unterzeichnen eine Einverständniserklärung (Anhang 1).

Regime: Bei dem Schema mit sechs Mahlzeiten pro Tag werden die Teilnehmer gebeten, ihre gesamte Kalorienaufnahme auf sechs Mahlzeiten aufzuteilen und alle zwei bis drei Stunden zu essen. Bei der Zwei-Mahlzeiten-pro-Tag-Diät teilen sie ihre gesamte Kalorienaufnahme auf zwei Mahlzeiten auf: Die erste Mahlzeit wird zwischen 6 und 10 Uhr eingenommen, die zweite zwischen 12 und 16 Uhr.

Körperliche Aktivität: Die Teilnehmer werden gebeten, ihre Trainingsgewohnheiten während der Studie nicht zu ändern. Die körperliche Aktivität wird mithilfe von Schrittzählern und standardisierten Fragebögen überwacht: Internationaler Fragebogen zur körperlichen Aktivität (IPAQ) und Baecke-Fragebogen.

Verfahren:

Zu Beginn (Woche 0) und am Ende aller 3 Monate (Woche 12 und 24) werden die folgenden Verfahren und Messungen bei jedem Probanden durchgeführt (dreimal bei jedem Probanden):

1. Allgemeine anthropometrische Untersuchungen (Körpergewicht, BMI, Taillen- und Hüftumfang), Blutproben werden für Laboruntersuchungen entnommen (allgemeine Labortests, Parameter des Glukose- und Lipidstoffwechsels, ausgewählte Adipokine, Marker für oxidativen Stress, Darmhormone, Fettsäurezusammensetzung im Serum). Phospholipide usw. – siehe Analysemethoden).
2. Mahlzeitentest zur Beurteilung der Glukosetoleranz nach Standardfrühstück/Baguette Crocodille Cheese Gourmet – 180 g, Energie 452,8 Kcal/1895,7 kJ, Zusammensetzung: Kohlenhydrate 49,2 g (44,55 %), Proteine ​​18,5 g (16, 74 %), Lipide 18,8 g (38,7 %), davon gesättigt 6,8 g, einfach ungesättigt 6,0 g, mehrfach ungesättigt 5,0 g/. Blutproben zur Beurteilung von Glykämie, C-Peptid und immunreaktivem Insulin (IRI) werden 0, 30, 60, 120 und 180 Minuten nach dem Frühstück entnommen.
3. Hyperinsulinämischer (1 mU/kg/min) isoglykämischer Clamp (HIC) 3 Stunden lang mit indirekter Kalorimetrie. Diese Methode ermöglicht eine genaue Quantifizierung der Insulinresistenz und der Energiesubstratnutzung.
4. MRT-Untersuchung (Magnetresonanztomographie) der Leber zur Messung des Leberfettgehalts.
5. DXA-Scan (Dual Energy X-ray Absorptiometry) zur Messung der Gesamtkörperzusammensetzung und des Fettgehalts.
6. Die Insulinsekretion und die Glukosekontrolle werden während eines eintägigen Krankenhausaufenthalts am Ende jeder Kur gemessen. Den ganzen Tag über werden alle drei Stunden Blutproben entnommen. Den ganzen Tag über wird Urin gesammelt, um Mikroalbuminurie und C-Peptid-Abfälle zu messen.

Analysemethoden:

Die Plasmakonzentrationen ausgewählter Adipokine (Resistin, Adiponektin insgesamt, HMW-Adiponektin, TNFalfa und Leptin) und anderer Zytokine und Proteine ​​(FABP) werden enzymatisch unter Verwendung von Standard-Kits (ELISA, Linco, USA) gemessen. Der Plasmaspiegel von Darmhormonen wird enzymatisch unter Verwendung von Standard-Kits (Milliplex, Millipore, USA) gemessen. Die Parameter der Lipidperoxidation werden anhand des TBARS-Gehalts durch die Reaktion mit Thiobarbitursäure und anhand des Gehalts an konjugierten Dienen bestimmt.

Der Gehalt an reduziertem und oxidiertem Glutathion wird mithilfe der HPLC-Methode mit Fluoreszenzdetektion bestimmt. Ascorbinsäure wird durch spektrophotometrische Reaktion mit Dinitrophenylhydrazin bestimmt. Die Konzentrationen von a- und g-Tocopherol im Serum werden durch Umkehrphasen-Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (HPLC) mit Fluoreszenzdetektion nach der modifizierten Methode von Catignani und Biery bestimmt. Die Aktivität von SOD wird anhand der Reaktion der Blockierung der Nitroethrazoliumblau-Reduktion und der Nitrophormasan-Bildung analysiert. Die Messung der Katalaseaktivität basiert auf der Fähigkeit von H2O2, mit Ammoniummolybdat den spektrophotometrisch erfassten Farbkomplex zu erzeugen. Die Aktivität der Glutathionperoxidase wird anhand der Oxidationsgeschwindigkeit von Glutathion durch das Ellman-Reagenz überwacht. Die Serumglukose wird mit der Glucose-Oxidase-Methode Beckman Analyzer (Beckman Instruments Inc., Fullerton, CA, USA) analysiert. Der IRI wird durch Radioimmunoassay unter Verwendung eines IMMUNOTECH Insulin IRMA-Kits (IMMUNOTECH as, Prag, Tschechische Republik) bestimmt. Peptid unter Verwendung eines IMMUNOTECH C-Peptide IRMA-Kits (IMMUNOTECH as, Prag, Tschechische Republik) und glykiertes Hämoglobin werden mit einem Bio-Rad-Hämoglobin-A1c-Säulentest (Bio-Rad Laboratories GmbH, München, Deutschland) gemessen.

Das Fettsäuremuster in Serumphospholipiden wird nach der Lipidextraktion nach Folch und der Trennung der Lipidfraktionen durch Dünnschichtchromatographie gemessen. Die Methylester der Fettsäuren werden gaschromatographisch getrennt.

Eventuelle Auswirkungen verschiedener Mahlzeitenhäufigkeitspläne werden aufgrund ausgewählter Genpolymorphismen bewertet.

Statistische Analyse: Wird unter Verwendung von ANOVA-Tests, Paar- und Entpaarungs-T-Tests und anderen statistischen Methoden unter Verwendung von Standard-Statistikprogrammen durchgeführt. Die Schätzung der Anzahl der zu rekrutierenden Probanden erfolgte mithilfe einer Leistungsanalyse wiederholter Messungen mithilfe der Statistiksoftware PASS 2005 (Number Cruncher Statistical Systems, Kaysville, UT, USA). In dieses Modell einbezogene Faktoren sind interindividuelle Faktoren (Kontrollgruppe vs. Versuchsgruppe), intraindividuelle Faktoren (individuelles Zeitstadium in der Studie) und Interaktion zwischen Faktoren (Divergenzgrad zwischen Zeitprofilen in Kontroll- und Versuchsgruppe).

Zeitrahmen: Dezember 2010 – Februar 2011 Rekrutierung der Teilnehmer März 2011 Beginn der Studie Gruppe A: 12 Wochen 6 Mahlzeiten/Tag, gefolgt von weiteren 12 Wochen mit 2 Mahlzeiten/Tag Gruppe B: 12 ​​Wochen 2 Mahlzeiten/Tag, gefolgt von weiteren 12 Wochen mit 6 Mahlzeiten/Tag, September 2011, Ende der Studie

Alle Messungen werden zu Beginn, Woche 12 und Woche 24 durchgeführt.