Efecto de la frecuencia de las comidas sobre la resistencia a la insulina en sujetos con diabetes tipo 2 (Frequency)

Objetivos y prioridades del proyecto El propósito de este estudio es

1. probar el efecto de la frecuencia de las comidas (seis frente a dos comidas diarias con la misma restricción calórica diaria de -500 kcal/día) sobre la sensibilidad a la insulina, la secreción de insulina y el contenido de grasa hepática.
2. caracterizar algunos de los mecanismos de acción de diferentes frecuencias de comidas (cantidad de grasa visceral, contenido de grasa hepática, concentraciones séricas de adipocinas, hormonas intestinales, marcadores de estrés oxidativo).
3. probar la capacidad de los participantes para mantener una dieta hipocalórica en ambos regímenes cuando se les educa y se les deja preparar sus comidas solos en comparación con aquellos a quienes se les proporcionarán todas las comidas durante el estudio.

Será un estudio aleatorio cruzado, en el que 50 personas con diabetes tipo 2 cambiarán en un orden aleatorio dos regímenes: seis y dos comidas al día. Cada período de prueba durará tres meses.

El metabolismo de la glucosa y los lípidos y su regulación se evaluarán exhaustivamente al inicio y después de cada período de 3 meses (prueba de comida, pinza isoglucémica hiperinsulinémica, calorimetría indirecta, resonancia magnética del hígado, exploración DXA, determinación de la concentración sérica de adipoquinas seleccionadas, análisis intestinal). hormonas y marcadores de estrés oxidativo).

Hipótesis Los investigadores plantean la hipótesis de que los niveles bajos de insulina en plasma (como se logran mediante períodos de ayuno) reducirán la resistencia a la insulina y el contenido de lípidos hepáticos. Por el contrario, las comidas frecuentes (y los consiguientes niveles plasmáticos más altos de insulina) predispondrán a la enfermedad del hígado graso no alcohólico y a la resistencia a la insulina. Los investigadores plantean además la hipótesis de que los participantes aumentarán su ingesta calórica con una mayor frecuencia de comidas (a pesar de una educación exhaustiva) cuando se les deje preparar sus comidas en comparación con aquellos a quienes se les proporcionarán todas las comidas.

Palabras clave Resistencia a la insulina, frecuencia de las comidas, diabetes mellitus tipo 2, enfermedad del hígado graso no alcohólico, adipocinas, hormonas intestinales, estrés oxidativo Metodología Diseño del estudio: los investigadores utilizarán el diseño de un estudio aleatorizado, cruzado, en el que 50 personas con tipo 2 diabetes cambiará en un orden aleatorio la frecuencia de sus comidas: seis y dos comidas al día. La restricción calórica será la misma (-500 kcal/día). Cada período de prueba durará tres meses. Para la mitad de los participantes se proporcionarán todas las comidas durante el estudio. La otra mitad recibirá una educación completa sobre cómo mantener su ingesta calórica diaria durante ambos regímenes y prepararán sus comidas solos.

Grupo de estudio: 50 individuos con diabetes tipo 2 tratados solo con dieta o agentes hipoglucemiantes orales, duración de la diabetes de al menos 1 año, tanto hombres como mujeres, edad 30-65 años, IMC 27-50 kg/m². A los sujetos se les explicarán los objetivos, métodos y riesgos del estudio y firmarán el consentimiento informado (Anexo 1).

Regímenes: En el régimen de seis comidas al día, se les pedirá a los participantes que dividan su ingesta calórica total en seis comidas y que coman cada dos o tres horas. En el régimen de dos comidas al día, dividirán su ingesta calórica total en dos comidas: la primera comida se comerá entre las 6 y las 10 a. m., la segunda entre el mediodía y las 4 p. m.

Actividad física: Se pedirá a los participantes que no cambien sus hábitos de ejercicio durante el estudio. La actividad física se controlará mediante podómetros y cuestionarios estandarizados: Cuestionario Internacional de Actividad Física (IPAQ) y cuestionario de Baecke.

Procedimientos:

Al principio (semana 0), y al final de cada 3 meses (semana 12 y 24), se realizarán los siguientes procedimientos y mediciones en cada sujeto (tres veces en cada sujeto):

1. Investigaciones antropométricas comunes (peso corporal, IMC, circunferencia de la cintura y la cadera), se tomarán muestras de sangre para evaluaciones de laboratorio (pruebas de laboratorio comunes, parámetros del metabolismo de la glucosa y los lípidos, adipocinas elegidas, marcadores de estrés oxidativo, hormonas intestinales, composición de ácidos grasos en suero fosfolípidos, etc.- ver métodos analíticos).
2. Prueba de comida para evaluar la tolerancia a la glucosa después del desayuno estándar / baguette Crocodille Cheese Gourmet - 180g, energía 452,8 Kcal/1895,7 kJ, composición: carbohidratos 49,2 g (44,55%), proteínas 18,5 g (16, 74%), lípidos 18,8 g (38,7%), de los cuales saturados 6,8 g, monoinsaturados 6,0 g, poliinsaturados 5,0 g/. Se tomarán muestras de sangre para valoración de glucemia, péptido C, insulina inmunorreactiva (IRI) a los 0, 30, 60, 120 y 180 minutos después del desayuno.
3. Pinza isoglucémica hiperinsulinémica (1 mU/kg/min) (HIC) de 3 horas de duración con calorimetría indirecta. Este método permite la cuantificación exacta de la resistencia a la insulina y la utilización de sustratos energéticos.
4. Resonancia magnética nuclear (RMN) del hígado para medir el contenido de grasa hepática.
5. Exploración DXA (absorciometría de rayos X de energía dual) para medir la composición corporal total y el contenido de grasa.
6. La secreción de insulina y el control de la glucosa se medirán durante una estancia de un día en el hospital al final de cada régimen. Se tomarán muestras de sangre cada tres horas durante todo el día. Se recolectará orina durante todo el día para medir la microalbuminuria y el desecho de péptido C.

Métodos analíticos:

Las concentraciones plasmáticas de adipocinas seleccionadas (resistina, adiponectina total, HMW-adiponectina, TNFalfa y leptina) y otras citocinas y proteínas (FABP) se medirán enzimáticamente utilizando kits estándar (ELISA, Linco, EE. UU.). Los niveles plasmáticos de hormonas intestinales se medirán enzimáticamente utilizando kits estándar (Milliplex, Millipore, EE. UU.). Los parámetros de peroxidación lipídica se determinarán según los niveles de TBARS por reacción con ácido tiobarbitúrico y según los niveles de dienos conjugados.

El nivel de glutatión reducido y oxidado se determinará mediante el método de HPLC con detección de fluorescencia. El ácido ascórbico se determinará por reacción espectrofotométrica con dinitrofenilhidrazina. Las concentraciones de a- y g-tocoferol en suero se determinarán mediante cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) de fase inversa con detección de fluorescencia según el método modificado de Catignani y Biery. La actividad de SOD se analizará mediante la reacción de bloqueo de la reducción del azul de nitrotetrazolio y la formación de nitroformomasano. La medición de la actividad de la catalasa se basa en la capacidad del H2O2 para producir con molibdato de amonio el complejo de color detectado espectrofotométricamente. La actividad de la glutatión peroxidasa se controlará mediante la velocidad de oxidación del glutatión mediante el reactivo de Ellman. La glucosa sérica se analizará utilizando el método de glucosa-oxidasa Beckman Analyzer (Beckman Instruments Inc., Fullerton, CA, EE. UU.), el IRI se determinará mediante radioinmunoensayo utilizando un kit IMMUNOTECH Insulin IRMA (IMMUNOTECH as, Praga, República Checa), C- péptido utilizando un kit IMMUNOTECH C-Peptide IRMA (IMMUNOTECH as, Praga, República Checa) y la hemoglobina glicosilada se medirá mediante una prueba de columna Bio-Rad Hemoglobin A1c (Bio-Rad Laboratories GmbH, Munich, Alemania).

El patrón de ácidos grasos en los fosfolípidos séricos se medirá después de la extracción de lípidos según Folch y la separación de las fracciones de lípidos mediante cromatografía en capa fina. Los ésteres metílicos de ácidos grasos se separarán por cromatografía de gases.

Se evaluarán los efectos eventuales de diferentes regímenes de frecuencia de comidas debido a los polimorfismos genéticos elegidos.

Análisis estadístico: Se realizará con el uso de pruebas ANOVA, pruebas t de pares y despareos y otros métodos estadísticos utilizando programas estadísticos estándar. La estimación del número de sujetos a reclutar se realizó mediante análisis de potencia de mediciones repetidas a través del software estadístico PASS 2005 (Number Cruncher Statistical Systems, Kaysville, UT, EE. UU.). Los factores incluidos en este modelo son factores interindividuales (grupo de control vs. grupo experimental), factores intraindividuales (estadio de tiempo individual en el estudio) e interacción entre factores (grado de divergencia entre los perfiles de tiempo en el grupo de control y experimental).

Plazo: diciembre de 2010-febrero de 2011 Reclutamiento de los participantes Inicio del estudio en marzo de 2011 Grupo A: 12 semanas 6 comidas/día seguidas de 12 semanas adicionales de 2 comidas/día Grupo B: 12 ​​semanas 2 comidas/día seguidas de 12 adicionales semanas de 6 comidas/día Septiembre 2011 fin del estudio

Todas las mediciones se realizarán al inicio, semana 12 y semana 24.