Effect van maaltijdfrequentie op insulineresistentie bij proefpersonen met diabetes type 2 (Frequency)

Doelstellingen en prioriteiten van het project Het doel van deze studie is om

1. test het effect van de frequentie van maaltijden (zes versus twee maaltijden per dag met dezelfde dagelijkse caloriebeperking van -500 kcal/dag) op insulinegevoeligheid, insulinesecretie en vetgehalte in de lever.
2. karakteriseren enkele van de werkingsmechanismen van verschillende frequenties van maaltijden (hoeveelheid visceraal vet, vetgehalte in de lever, serumconcentraties van adipokines, darmhormonen, markers voor oxidatiestress).
3. test het vermogen van de deelnemers om een ​​hypocalorisch dieet te volgen op beide regimes wanneer ze worden opgeleid en hun maaltijden alleen moeten bereiden in vergelijking met degenen voor wie alle maaltijden tijdens het onderzoek worden verstrekt.

Het wordt een gerandomiseerde, cross-over studie, waarbij 50 personen met diabetes type 2 in willekeurige volgorde twee regimes veranderen: zes en twee maaltijden per dag. Elke testperiode duurt drie maanden.

Glucose- en lipidenmetabolisme en de regulatie ervan zullen bij aanvang en na elke periode van 3 maanden grondig worden getest (maaltijdtest, hyperinsulinemische isoglycemische klem, indirecte calorimetrie, MRI-scan van de lever, DXA-scan, serumconcentratiebepaling van geselecteerde adipokines, hormonen en markers voor oxidatiestress).

Hypothese De onderzoekers veronderstellen dat lage plasma-insulinespiegels (zoals bereikt door perioden van vasten) de insulineresistentie en het vetgehalte in de lever zullen verminderen. Daarentegen zullen frequente maaltijden (en de daaruit voortvloeiende hogere plasmaspiegels van insuline) vatbaar maken voor niet-alcoholische leververvetting en insulineresistentie. De onderzoekers veronderstellen verder dat de deelnemers hun calorie-inname zullen verhogen met een verhoogde maaltijdfrequentie (ondanks grondig onderwijs) wanneer ze hun maaltijden moeten bereiden in vergelijking met degenen voor wie alle maaltijden worden verstrekt.

Sleutelwoorden Insulineresistentie, maaltijdfrequentie, diabetes mellitus type 2, niet-alcoholische leververvetting, adipokines, darmhormonen, oxidatieve stress Methodologie Onderzoeksopzet: de onderzoekers gebruiken de opzet van een gerandomiseerde, cross-over studie, waarbij 50 personen met type 2 diabetes verandert in willekeurige volgorde de frequentie van hun maaltijden: zes en twee maaltijden per dag. De caloriebeperking blijft hetzelfde (-500 kcal/dag). Elke testperiode duurt drie maanden. Voor de helft van de deelnemers worden alle maaltijden tijdens het onderzoek verzorgd. De andere helft zal grondig worden voorgelicht hoe ze hun dagelijkse calorie-inname tijdens beide regimes kunnen behouden en ze zullen hun maaltijden alleen bereiden.

Studiegroep: 50 personen met diabetes type 2 behandeld met alleen dieet of orale hypoglycemische middelen, diabetesduur minstens 1 jaar, zowel mannen als vrouwen, leeftijd 30-65 jaar, BMI 27-50 kg/m². De proefpersonen zullen de doelen, methoden en risico's van het onderzoek worden uitgelegd en zij zullen geïnformeerde toestemming ondertekenen (bijlage 1).

Regimes: Bij het regime van zes maaltijden per dag wordt deelnemers gevraagd hun totale calorie-inname in zes maaltijden te verdelen en om de twee of drie uur te eten. Bij het regime van twee maaltijden per dag verdelen ze hun totale calorie-inname over twee maaltijden: de eerste maaltijd wordt gegeten tussen 6 en 10 uur, de tweede tussen 12 uur en 16 uur.

Lichamelijke activiteit: deelnemers wordt gevraagd hun bewegingsgewoonten tijdens het onderzoek niet te veranderen. Lichamelijke activiteit zal worden gevolgd met behulp van stappentellers en gestandaardiseerde vragenlijsten: International Physical Activity Questionnaire (IPAQ) en Baecke-vragenlijst.

Procedures:

Aan het begin (week 0) en aan het einde van elke 3 maanden (week 12 en 24) worden de volgende procedures en metingen uitgevoerd bij elke proefpersoon (drie keer bij elke proefpersoon):

1. Gemeenschappelijke antropometrische onderzoeken (lichaamsgewicht, BMI, taille- en heupomtrek), bloedmonsters zullen worden genomen voor laboratoriumbeoordelingen (gewone laboratoriumtests, parameters van glucose- en lipidenmetabolisme, gekozen adipokines, markers voor oxidatieve stress, darmhormonen, vetzuursamenstelling in serum fosfolipiden enz. - zie analytische methoden).
2. Maaltijdtest voor glucosetolerantiebepaling na standaardontbijt /baguette Crocodille Cheese Gourmet - 180g, energie 452,8 Kcal/1895,7 kJ, samenstelling: koolhydraten 49,2 g (44,55%), eiwitten 18,5 g (16, 74%), lipiden 18,8 g (38,7%), waarvan verzadigd 6,8 ​​g, enkelvoudig onverzadigd 6,0 ​​g, meervoudig onverzadigd 5,0 g/. Bloedmonsters voor de beoordeling van glycemie, C-peptide, immunoreactieve insuline (IRI) worden 0, 30, 60, 120 en 180 minuten na het ontbijt genomen.
3. Hyperinsulinemische (1 mU/kg/min) isoglycemische klem (HIC) 3 uur lang met indirecte calorimetrie. Deze methode maakt een exacte kwantificering van de insulineresistentie en het gebruik van energiesubstraten mogelijk.
4. MRI-scan (magnetic resonance imaging) van de lever om het vetgehalte in de lever te meten.
5. DXA-scan (Dual Energy X-ray Absorptiometry) om de totale lichaamssamenstelling en het vetgehalte te meten.
6. Insulinesecretie en glucoseregulatie zullen worden gemeten tijdens een eendaags verblijf in het ziekenhuis aan het einde van elk regime. Gedurende de hele dag wordt er om de drie uur bloed afgenomen. Urine wordt gedurende de hele dag verzameld om microalbuminurie en C-peptide afval te meten.

Analytische methoden:

Plasmaconcentraties van geselecteerde adipokines (resistine, adiponectine totaal, HMW-adiponectine, TNFalfa en leptine) en andere cytokines en eiwitten (FABP) zullen enzymatisch worden gemeten met behulp van standaardkits (ELISA, Linco, VS). Plasmaspiegels van darmhormonen zullen enzymatisch worden gemeten met behulp van standaardkits (Milliplex, Millipore, VS). Parameters van lipideperoxidatie zullen worden bepaald volgens de niveaus van TBARS door de reactie met thiobarbituurzuur en volgens de niveaus van geconjugeerde diënen.

Het gehalte aan gereduceerd en geoxideerd glutathion zal worden bepaald met behulp van de HPLC-methode met fluorescentiedetectie. Ascorbinezuur zal spectrofotometrische reactie met dinitrofenylhydrazine worden bepaald. Concentraties van a- en g-tocoferol in serum zullen worden bepaald door reverse-phase hogedrukvloeistofchromatografie (HPLC) met fluorescentiedetectie volgens de gewijzigde methode van Catignani en Biery. De activiteit van SOD zal worden geanalyseerd door de reactie van het blokkeren van de reductie van nitrotethrazoliumblauw en de vorming van nitrophormasaan. De meting van de catalase-activiteit is gebaseerd op het vermogen van H2O2 om met ammoniummolybdaat het kleurcomplex te produceren dat spectrofotometrisch wordt gedetecteerd. De activiteit van glutathionperoxidase zal gevolgd worden aan de hand van de oxidatiesnelheid van glutathion door middel van Ellman-reagens. Serumglucose zal worden geanalyseerd met behulp van de glucose-oxidasemethode Beckman Analyzer (Beckman Instruments Inc., Fullerton, CA, VS), IRI zal worden bepaald door radioimmunoassay met behulp van een IMMUNOTECH Insulin IRMA-kit (IMMUNOTECH as, Praag, Tsjechische Republiek), C- peptide met behulp van een IMMUNOTECH C-Peptide IRMA-kit (IMMUNOTECH as, Praag, Tsjechië) en geglyceerd hemoglobine zullen worden gemeten met een Bio-Rad hemoglobine A1c-kolomtest (Bio-Rad Laboratories GmbH, München, Duitsland).

Vetzuurpatroon in serumfosfolipiden zal gemeten worden na extractie van lipiden volgens Folch en scheiding van lipidefracties door middel van dunnelaagchromatografie. De methylesters van vetzuren zullen worden gescheiden door middel van gaschromatografie.

Eventuele effecten van verschillende maaltijdfrequentieregimes zullen worden geëvalueerd vanwege gekozen genpolymorfismen.

Statistische analyse: zal worden uitgevoerd met behulp van ANOVA-testen, pair en unpair t-tests en andere statistische methoden met behulp van standaard statistische programma's. Schatting van het aantal te rekruteren proefpersonen werd gedaan met behulp van vermogensanalyse van herhaalde metingen via statistische software PASS 2005 (Number Cruncher Statistical Systems, Kaysville, UT, VS). Factoren die in dit model zijn opgenomen, zijn interindividuele factoren (controle versus experimentele groep), intra-individuele factoren (individueel tijdsstadium in het onderzoek) en interactie tussen factoren (mate van verschil tussen tijdsprofielen in controle- en experimentele groep).

Tijdsbestek: december 2010-februari 2011 werving van de deelnemers maart 2011 start van de studie Groep A: 12 weken 6 maaltijden/dag gevolgd door 12 extra weken van 2 maaltijden/dag Groep B: 12 ​​weken 2 maaltijden/dag gevolgd door nog eens 12 weken van 6 maaltijden/dag September 2011 einde van de studie

Alle metingen worden gedaan bij start, week 12 en week 24.