早発性冠動脈疾患 - 臨床的および分子遺伝学的側面 (PIHS)

目的 研究パート 1: 中央デンマーク地域の非常に早期の CAD 患者におけるアテローム性動脈硬化の危険因子の発生を定量化し、国のガイドラインに従って患者がどの程度治療されているかを調査します。

研究パート 2: 非常に早期の CAD を有する確立された患者の第 1 度近親者の中年における CAD の発生を調査します。

研究パート 3: エクソーム シーケンス解析を使用して、CAD の有病率が高い家族で考えられる遺伝的「危険因子」を評価します。

仮説 仮説 1: 非常に早期の CAD 患者は、現在の国のガイドラインに比べて適切に治療されていない、修正可能な危険因子を持っています。

仮説 2: 非常に早期の CAD の発生は、疾患の家族性蓄積と関連しています。

仮説 3: 表現型が重度の未熟児 CAD を有する選択された家系でエクソーム シーケンスを使用すると、疾患の原因となる遺伝子変異が特定されます。

方法 研究パート 1. 経皮的冠動脈インターベンション (PCI) または冠動脈バイパス移植手術 (CABG) を 40 歳前に受けた早期 CAD 患者は、西デンマーク心臓登録簿 (VDHD) から選択されます。 具体的には、2007 年 1 月 1 日から 2013 年 12 月 31 日までの期間に心筋梗塞 (MI)、安定または不安定狭心症のためにスケビーのオーフス大学病院 (AUH) で治療を受けた患者が募集され、登録された危険因子の発生が評価されます (サンプルアプリを示します。 年間170人の患者）。 インフォームドコンセントが得られた後、彼らはこの調査研究に参加します。 参加者は、Dep の心臓外来診療所で面接を受けます。心臓病学、AUH、Skejby。 心血管リスク要因に関する次の情報が収集されます。アテローム性動脈硬化症の家族歴（血統分析が行われ、CVDと診断された症例が特定されます）、以前の病歴（つまり 高血圧、脂質異常症、糖尿病、慢性腎臓病、血管疾患）、喫煙状況とパック年数、アルコール消費と血管症状（例： 狭心症、間欠性跛行）。 収集された情報は、患者記録および VDHD の登録情報と比較されます。 さらに、侵襲的治療の局所化、CAD の程度、および左心室駆出率 (LVEF) の最新の推定値に関する情報が照合されます。 すべての患者は、身長と体重、腹囲、および血液サンプルについて検査されます。 自動血圧測定（Bp-TRU装置）を行います。 クレアチニン (e-GFR)、総コレステロール、LDL コレステロール、HDL コレステロール、トリグリセリド、および HbA1c のレベルが測定されます。 さらに、将来のDNA分析のために血液サンプルが保存されます（下記）。 治験責任医師は、国のガイドラインに従って、治療目標がどの程度達成されているかを評価します。 分析は、近年発生したこれらの治療ガイドラインの変更を反映するように修正されます。

研究パート 2. 研究 1 の患者 (インデックス患者) は、研究パート 2 に参加する目的で、30 歳から 65 歳までの第一度近親者との連絡を確立するよう求められます。連絡方法は、家族への連絡に関する通常の部門ガイドラインに従います。メンバー。 インフォームド コンセントを与える第 1 度近親者は、研究パート 2 (参加者) に含まれます。 アテローム性動脈硬化症と診断された参加者からの患者記録が取得されます。 -除外基準は、CTCAまたは経皮経管冠動脈造影によるCADの以前の診断、慢性心房細動、腎不全（e-GFR <30ml /分）、肥満（BMI> 30が指標ですが、体の形状が役割を果たします）、以前のアレルギーコントラスト反応と妊娠。 従来のリスクプロファイルと血液サンプルは、研究パート 1 のように収集されます。CTCA の前に、心エコー検査によって LVEF が推定されます。 CTCAは、部門の標準プロトコルに従って実行されます。 まず、Agatstons 法によって冠状動脈の石灰化を推定するために、造影剤を使用せずに CT スキャンを実行します。 その後、ヨウ素含有造影剤70mlでスキャンを行う。 平均的な参加者 (70 kg) が 3 mSv 未満の放射線量を受けることを期待できるように、ECG 変調および放射線低減プロトコルが使用されます。 コントラスト研究の分析は、自動化および半自動化されたプラークの定量化に焦点を当てます。 非心臓所見は、Dep による部門標準手順に従って説明されます。放射線科、AUH、Skejby、および臨床的に示されているように行われた医療介入の。

研究パート3。 アテローム性動脈硬化症に重度の影響を受けていると考えられる研究パート1および2からの家族が、家族の規模、罹患者の数、および疾患の重症度に基づいて評価され、選択されます。 同意した家族（初発患者、第1度近親者、および該当する場合はその第1度近親者も含む）は、研究パート3に含まれます。プロジェクトにまだ参加していない親族との接触は、研究パート2と同様に試みられます。従来のリスク プロファイルと DNA 分析 (エクソーム シーケンス) 用の血液サンプルがまだ取得されていない場合は、要求されます。 分析は、分子医学部門 (MOMA)、AUH、Skejby で行われます。これらの部門は、検査とバイオインフォマティクス分析の実行に必要な機器、ソフトウェア、および実験室の専門知識を持っています。 まず、ゲノム DNA を精製し、200 ～ 500 塩基対のサイズに断片化します。 イルミナ TruSeq ライブラリ (エクソーム シーケンスで使用) は、Nimblegens EZ in solution Exome v3 キットによるエクソーム濃縮も行われる Caliper Sciclone ロボットで生成されます。 データ分析は、MOMA スタッフの指導の下、MOMA で行われます。 最初の配列はトリミングされ、ヒトゲノムに合わせられます。 第二に、バリアントが呼び出される前にアラインメントが微調整されます。これには、一塩基バリアントやさまざまなサイズの挿入/削除が含まれます。 データの解釈は、豊富な公共および商用データベースへのアクセスを提供し、プライベート データベースを統合する機会も提供するソフトウェア プログラム Cartagena で行われます。 バリアントは、頻度、遺伝子位置、既存の知識、およびさまざまなインシリコ予測ツールに基づいてフィルタリングされます。 可能性のある重要な調査結果は、サンガー シーケンスによって検証されます。

統計分析 研究パート 3 で見つかった遺伝子型で、疾患に罹患した個人が共有するゲノム内の領域を特定するために結合分析が実行されます。 血統分析と結合分析を使用すると、ゲノム内の候補間隔が大幅に減少するため、小さな家系であっても疾患の原因となるバリアントを特定する統計的検出力が向上します。 含まれる家族の正確な遺伝的構造と家族構造は不明であるため、統計的検出力の正確な計算は不可能です。 優性単一遺伝子疾患の場合、ローカリゼーション (カップリング) のみに基づくフィルター処理により、アプリごとに潜在的なバリアントが削減されます。 罹患した兄弟のペア内で80％、近交系の罹患者の場合、単一遺伝性劣性疾患の場合は95％以上。

研究バイオバンク 研究バイオバンクは、オーフス大学臨床医学健康研究所の下に設立されます。 試験１～３の全参加者からの２×４ｍｌ（ＢＤ Ｖａｃｕｔａｉｎｅｒ Ｋ３Ｅ ７、２ｍｇ Ｒｅｆ．３６８８６０）および１×４ｍｌ（ＢＤ Ｖａｃｕｔａｉｎｅｒ ＳＳＴ ＩＩ Ａｄｖａｎｃｅ、Ｒｅｆ．３６７９５７）の血液のサンプルは、さらなる分析のためにバイオバンクに提出される。 サンプリングは AUH、Skejby、またはグラスで行われ、家庭医による採血のために返信用封筒が患者に送られます。 サンプルは凍結保存され、研究パート 3 の参加者に対してエクソーム シーケンスが実行されます。バイオバンクは、将来の研究の目的でプロジェクトが終了した後も継続されます。 保存された資料の今後の分析の場合、研究倫理委員会と参加者 (生存している場合) は事前に通知されます。 生物材料の保管許可は、デンマークのデータ保護庁によって指定された間隔に従って継続的に適用されます。 すべての参加者は、いつでも生物材料の破棄を要求することができます。