조기 관상 동맥 질환 - 임상 및 분자 유전적 측면 (PIHS)

목적 연구 1부: 중부 덴마크 지역의 조기 CAD 환자에서 죽상동맥경화증의 위험 인자 발생을 정량화하고 환자가 국가 지침에 따라 어느 정도 치료되고 있는지 조사합니다.

연구 파트 2: 조기 CAD가 있는 기존 환자의 중년 1촌 친척에서 CAD의 발생을 조사합니다.

연구 파트 3: 엑솜 시퀀싱 분석을 사용하여 CAD 유병률이 높은 가족에서 가능한 유전적 "위험 요인"을 평가합니다.

가설 가설 1: 조기 CAD 환자는 수정 가능한 위험 요소를 가지고 있으며, 이는 현재 국가 지침에 비해 적절하게 치료되지 않습니다.

가설 2: 조기 CAD의 발생은 질병의 가족적 축적과 관련이 있다.

가설 3: 표현형 중증 조기 CAD가 있는 선택된 가족에서 엑솜 시퀀싱을 사용하면 질병을 유발하는 유전 변이를 식별할 수 있습니다.

방법 연구 파트 1. 40세 이전에 경피적 관상동맥 중재술(PCI) 또는 관상동맥 우회술(CABG)을 받은 조기 CAD 환자는 West Denmark Heart Registry(VDHD)에서 선택됩니다. 구체적으로, 2007년 1월 1일부터 2013년 12월 31일까지 Skejby의 Aarhus University Hospital(AUH)에서 심근경색(MI), 안정형 또는 불안정형 협심증으로 치료받은 환자를 모집하여 등록된 위험 요인의 발생을 평가할 예정입니다(샘플 앱을 나타냅니다. 연간 170명의 환자). 정보에 입각한 동의를 얻은 후, 그들은 이 연구에 참여할 것입니다. 참가자들은 Dep의 심장 외래 환자 클리닉에서 인터뷰를 할 것입니다. 심장학, AUH, Skejby. 심혈관 위험 인자에 대한 다음 정보가 수집됩니다. 죽상동맥경화증의 가족력(가계 분석이 수행되고 CVD 진단 사례가 확인됨), 이전 병력(즉, 고혈압, 이상지질혈증, 당뇨병, 만성 신장 질환, 혈관 질환), 흡연 상태 및 갑년 수, 음주 및 혈관 증상(즉, 협심증, 간헐적 파행). 수집된 정보는 환자 기록 및 VDHD에 등록된 정보와 비교됩니다. 또한 침습적 치료의 국소화, CAD 정도 및 최신 좌심실 박출률(LVEF) 추정치에 대한 정보가 수집됩니다. 모든 환자는 키와 몸무게, 복부둘레를 검사하고 혈액 샘플을 채취합니다. 자동 사무실 혈압 측정(Bp-TRU 장치)이 수행됩니다. 크레아티닌(e-GFR), 총 콜레스테롤, LDL 콜레스테롤, HDL 콜레스테롤, 트리글리세리드 및 HbA1c 수치를 측정합니다. 또한 향후 DNA 분석을 위해 혈액 샘플이 저장됩니다(아래). 조사관은 국가 지침에 따라 치료 목표가 어느 정도 충족되었는지 평가할 것입니다. 최근 몇 년간 발생한 이러한 치료 지침의 변경 사항을 반영하여 분석이 수정될 것입니다.

연구 파트 2. 연구 1의 환자(지표 환자)는 연구 파트 2에 참여하기 위해 30세에서 65세 사이의 1촌 친척에게 연락하도록 요청합니다. 회원. 정보에 입각한 동의를 한 1촌 친척은 연구 파트 2(참가자)에 포함됩니다. 죽상동맥경화증 진단을 받은 참가자의 환자 기록을 확보합니다. 제외 기준은 이전에 CTCA 또는 경피 경혈관 관상동맥 조영술에 의한 CAD 진단, 만성 심방 세동, 신부전(e-GFR < 30ml/min), 비만(BMI > 30이 지표이지만 체형이 역할을 함), 이전의 알레르기 조영제입니다. 반응과 임신. 전통적인 위험 프로필과 혈액 샘플은 연구 파트 1에서와 같이 수집됩니다. CTCA 이전에 LVEF는 심장초음파로 추정됩니다. CTCA는 부서의 표준 프로토콜에 따라 수행됩니다. 처음에 CT 스캔은 Agatstons 방법으로 관상 석회화를 추정하기 위해 조영제 없이 수행됩니다. 그 후 70ml의 요오드 함유 조영제로 스캔을 수행합니다. 평균 참가자(70kg)가 3mSv 미만의 방사선량을 받을 것으로 예상할 수 있도록 ECG 변조 및 방사선 감소 프로토콜이 사용됩니다. 대조 연구의 분석은 자동 및 반자동 플라크 정량화에 초점을 맞출 것입니다. 비심장 소견은 Dep의 부서 표준 절차에 따라 설명됩니다. 방사선과, AUH, Skejby 및 임상적으로 지시된 대로 수행된 의료 개입.

연구 파트 3. 연구 파트 1 및 2의 가족 중 죽상동맥경화증에 의해 심각하게 영향을 받은 것으로 간주되고 가족 규모, 영향을 받은 수 및 질병의 중증도를 기준으로 평가된 가족이 선택됩니다. 동의한 가족(지표 환자, 1차 친족 및 해당되는 경우 1차 친족도 포함)은 연구 파트 3에 포함됩니다. 아직 프로젝트에 참여하지 않은 친족과의 접촉은 연구 파트 2와 같이 시도됩니다. A 전통적인 위험 프로필 및 DNA 분석(엑솜 시퀀싱)을 위한 혈액 샘플이 아직 확보되지 않은 경우 요청됩니다. 분석은 생체 정보 분석뿐만 아니라 테스트 수행에 필요한 장비, 소프트웨어 및 실험실 전문 지식을 갖춘 AUH, Skejby의 MOMA(분자 의학부)에서 이루어집니다. 먼저, 게놈 DNA를 정제하고 200-500 염기쌍 크기로 단편화합니다. Illumina TruSeq 라이브러리(엑솜 시퀀싱과 함께 사용됨)는 Caliper Sciclone-robot에서 생성되며 여기에서 솔루션 Exome v3 키트의 Nimblegens EZ를 사용한 엑솜 농축도 수행됩니다. 데이터 분석은 MOMA 직원의 지도하에 MOMA에서 진행됩니다. 첫 번째 시퀀스는 인간 게놈에 맞게 트리밍 및 정렬됩니다. 둘째, 단일 뉴클레오티드 변형 및 다양한 크기의 삽입/삭제를 포함하여 변형이 호출되기 전에 정렬이 미세 조정됩니다. 데이터 해석은 소프트웨어 프로그램 Cartagenia에서 이루어지며, 이 프로그램은 풍부한 공공 및 상업 데이터베이스에 대한 액세스를 제공하고 개인 데이터베이스를 통합할 수 있는 기회도 제공합니다. 변이체는 빈도, 유전자 위치, 기존 지식 및 다양한 in-silico 예측 도구를 기반으로 필터링됩니다. 가능한 중요한 결과는 Sanger 시퀀싱에 의해 검증됩니다.

통계 분석 연구 3부에서 발견된 유전자형에서 질병에 걸린 개인이 공유하는 게놈의 영역을 식별하기 위해 결합 분석을 수행합니다. 혈통 분석 및 결합 분석을 사용하면 게놈의 후보 간격이 상당히 줄어들어 소규모 가족에서도 질병을 유발하는 변이를 식별할 수 있는 통계적 능력이 증가합니다. 포함된 가족의 정확한 유전 구조와 가족 구조를 알 수 없기 때문에 정확한 통계적 검정력 계산이 불가능합니다. 우세한 단일 유전 질환의 경우 현지화(커플링)만을 기반으로 한 여과는 앱별 잠재적 변형을 줄입니다. 영향을 받은 형제자매 한 쌍 내에서 80%, 근친 교배 가족의 개인이 영향을 받은 경우 단일유전성 열성 질환의 경우 95% 이상.

연구용 바이오뱅크 연구용 바이오뱅크는 오르후스 대학교 보건 임상 의학 연구소에 설립될 예정입니다. 연구 1-3의 모든 참가자로부터 채취한 2x4ml(BD Vacutainer K3E 7,2mg Ref. 368860) 및 1x4ml(BD Vacutainer SST II Advance, Ref. 367957) 혈액 샘플을 추가 분석을 위해 바이오뱅크에 제출합니다. 샘플링은 AUH, Skejby 또는 유리잔에서 수행되며 가정의가 채혈할 수 있도록 반환 봉투를 환자에게 보냅니다. 샘플은 cryo-preserved되고 연구 파트 3의 참가자에 대해 exome sequencing이 수행됩니다. 바이오뱅크는 향후 연구를 위해 프로젝트가 종료된 후에도 계속됩니다. 향후 보존자료 분석 시 연구윤리위원회와 참여자(생존하는 경우)는 사전에 통보한다. 생물학적 물질의 보관 허가는 덴마크 데이터 보호국이 지정한 간격에 따라 지속적으로 적용됩니다. 모든 참가자는 언제든지 생물학적 물질의 파괴를 요구할 수 있습니다.