For tidlig koronararteriesygdom - kliniske og molekylærgenetiske aspekter (PIHS)

Formål Undersøgelsesdel 1: Kvantificere forekomsten af ​​risikofaktorer for åreforkalkning blandt patienter med meget præmatur CAD i Region Midtjylland og undersøge i hvilken grad patienter behandles efter nationale retningslinjer.

Studiedel 2: Undersøg forekomsten af ​​CAD blandt midaldrende 1. grads pårørende til etablerede patienter med meget for tidlig CAD.

Studiedel 3: Evaluer mulige genetiske "risikofaktorer" i familier med høj CAD-prævalens ved hjælp af exome-sekventeringsanalyse.

Hypoteser Hypotese 1: Patienter med meget for tidlig CAD har modificerbare risikofaktorer, som er utilstrækkeligt behandlet i forhold til gældende nationale retningslinjer.

Hypotese 2: Forekomsten af ​​meget for tidlig CAD er forbundet med familiær ophobning af sygdommen.

Hypotese 3: Anvendelsen af ​​exome-sekventering i udvalgte familier med fænotypisk svær præmatur CAD vil identificere sygdomsfremkaldende genetiske varianter.

Metodestudie del 1. Patienter, der lider af præmatur CAD, som har fået foretaget en perkutan koronar intervention (PCI) eller en koronararterie bypassoperation (CABG) inden de fyldte 40 år, vil blive udvalgt fra Vestdanmarks Hjerteregister (VDHD). Specifikt vil patienter behandlet på Aarhus Universitetshospital (AUH) i Skejby for myokardieinfarkt (MI), stabil eller ustabil angina pectoris i perioden 1. januar 2007 - 31. december 2013 blive rekrutteret, og forekomsten af ​​registrerede risikofaktorer vil blive evalueret (prøve angiver app. 170 patienter om året). Efter informeret samtykke er opnået, vil de deltage i denne undersøgelse. Deltagerne vil blive interviewet i hjerteambulatoriet på Afd. kardiologi, AUH, Skejby. Følgende oplysninger om kardiovaskulære risikofaktorer vil blive indsamlet; familiehistorie med åreforkalkning (en stamtavleanalyse vil blive udført, og tilfælde af diagnosticeret CVD vil blive identificeret), tidligere sygehistorie (dvs. hypertension, dyslipidæmi, diabetes, kronisk nyresygdom, karsygdomme), rygestatus og antal pakkeår, alkoholforbrug og vaskulære symptomer (dvs. angina pectoris, claudicatio intermittens). Indsamlede oplysninger vil blive sammenlignet med de registrerede oplysninger i patientjournaler og VDHD. Derudover vil information om lokalisering af den invasive behandling, graden af ​​CAD og det seneste estimat for venstre ventrikel ejektionsfraktion (LVEF) blive sammenstillet. Alle patienter vil blive undersøgt med hensyn til højde og vægt, abdominal omkreds, og der tages en blodprøve. En automatisk kontorblodtryksmåling (Bp-TRU-enhed) vil blive udført. Niveauer af kreatinin (e-GFR), total kolesterol, LDL kolesterol, HDL kolesterol, triglycerider og HbA1c vil blive målt. Yderligere vil en blodprøve blive gemt til fremtidig DNA-analyse (nedenfor). Efterforskerne vil vurdere, i hvilken grad behandlingsmålene er nået i overensstemmelse med nationale retningslinjer. Analyse vil blive korrigeret for at afspejle ændringer i disse behandlingsvejledninger, som er sket i de senere år.

Undersøgelsesdel 2. Patienter fra undersøgelse 1 (indekspatienter) anmodes om at etablere kontakt til 1. grads pårørende mellem 30 og 65 år med henblik på deltagelse i Studiedel 2. Kontaktformen følger faste afdelingsvejledninger for kontakt til familie. medlemmer. 1. grads pårørende, der giver deres informerede samtykke, vil indgå i studiedel 2 (deltagere). Patientjournaler fra deltagere, der er diagnosticeret med åreforkalkning, vil blive indhentet. Eksklusionskriterier vil være tidligere diagnose af CAD ved CTCA eller perkutan transluminal koronar angiografi, kronisk atrieflimren, nyresvigt (e-GFR < 30ml/min), fedme (BMI > 30 er vejledende, men kropsgeometri spiller en rolle), tidligere allergisk kontrast reaktion og graviditet. En traditionel risikoprofil og blodprøver vil blive indsamlet som i undersøgelsesdel 1. Forud for CTCA estimeres LVEF ved ekkokardiografi. En CTCA udføres efter standardprotokollen på afdelingen. Indledningsvis udføres CT-scanningen uden kontrast for at estimere koronarforkalkningen ved Agatstons metode. Derefter foretages en scanning med 70 ml jodholdig kontrast. EKG-modulation og strålingsreducerede protokoller vil blive brugt, således at en gennemsnitlig deltager (70 kg) kan forvente at modtage en stråledosis under 3 mSv. Analysen af ​​kontraststudiet vil fokusere på automatiseret- og semi-automatiseret plakkvantificering. Ikke-kardiale fund vil blive beskrevet i henhold til afdelingens standardprocedurer af Afd. for radiologi, AUH, Skejby, og medicinsk intervention udført som klinisk indiceret.

Studiedel 3. Familier fra studiedel 1 og 2, som anses for at være alvorligt ramt af åreforkalkning, vurderet på baggrund af familiestørrelse, antal ramte og sygdommens sværhedsgrad, vil blive udvalgt. Familiemedlemmer (indekspatienter, 1. grads pårørende og eventuelt også deres 1. grads pårørende), der giver samtykke, vil indgå i studiedel 3. Der vil blive forsøgt kontakt til pårørende, der endnu ikke har deltaget i projektet, som i studiedel 2. A traditionel risikoprofil og en blodprøve til DNA-analyse (exome-sekventering) vil blive anmodet om, hvis den ikke allerede er opnået. Analysen foregår på Institut for Molekylær Medicin (MOMA), AUH, Skejby, som har det nødvendige udstyr, software og laboratorieekspertise til at udføre testene samt den bioinformatiske analyse. Først oprenses genomisk DNA og fragmenteres til en størrelse på 200-500 basepar. Illumina TruSeq-biblioteker (til brug sammen med exome-sekventeringen) vil blive produceret på en Caliper Sciclone-robot, hvor exome-berigelsen med Nimblegens EZ i opløsning Exome v3 kit også vil finde sted. Dataanalysen vil foregå på MOMA under vejledning af MOMA-personalet. De første sekvenser vil blive trimmet og justeret til det humane genom. For det andet vil justeringer blive finjusteret, før varianter kaldes, herunder enkeltnukleotidvarianter og insertioner/deletioner af forskellig størrelse. Fortolkningen af ​​dataene vil foregå i softwareprogrammet Cartagenia, som giver adgang til en overflod af offentlige og kommercielle databaser og også giver mulighed for at integrere private databaser. Varianter vil blive filtreret på basis af frekvens, genposition, eksisterende viden og forskellige in-silico forudsigelsesværktøjer. Mulige væsentlige fund vil blive valideret af Sanger-sekventering.

Statistisk analyse Ved de fundne genotyper fra studiedel 3 udføres koblingsanalyse for at identificere områder i genomet, som deles af sygdomsramte individer. Anvendelsen af ​​stamtavleanalyse og koblingsanalyse reducerer kandidatintervallerne i genomet væsentligt og øger derved den statistiske magt til at identificere sygdomsfremkaldende varianter selv i små familier. Fordi den præcise genetiske arkitektur og familiestruktur af de inkluderede familier ikke er kendt, vil nøjagtig beregning af statistisk styrke ikke være mulig. I tilfælde af en dominerende monogenetisk sygdom reducerer en filtrering kun baseret på lokalisering (kobling) de potentielle varianter med ca. 80% inden for et par af berørte søskende og med mere end 95% for monogenetiske recessive sygdomme, hvis ramte individer fra indavlede familier.

Forskningsbiobank Der etableres en forskningsbiobank under Institut for Klinisk Medicin, Sundhed, Aarhus Universitet. En prøve på 2x4 ml (BD Vacutainer K3E 7,2mg Ref. 368860) og 1x4ml (BD Vacutainer SST II Advance, Ref. 367957) blod fra alle deltagere i undersøgelse 1-3 vil blive sendt til biobanken til yderligere analyse. Prøveudtagningen foretages på AUH, Skejby eller et glas og en returkuvert sendes til patienten til blodtapning af familielægen. Prøven er kryokonserveret, og der udføres exome-sekventering på deltagerne i studiedel 3. Biobanken vil blive videreført efter projektets afslutning med henblik på fremtidig forskning. I tilfælde af fremtidig analyse af det bevarede materiale vil den forskningsetiske komité og deltageren (hvis stadig i live) blive bemærket på forhånd. Tilladelse til at opbevare det biologiske materiale vil blive anvendt løbende i henhold til nærmere fastsatte intervaller af Datatilsynet. Alle deltagere kan til enhver tid kræve deres biologiske materiale destrueret.