精液処理における密度勾配とスイミングダウンの評価研究
調査の概要
状態
条件
詳細な説明
さまざまな ART 手順に使用される精液処理は、死んだ精子だけでなく、異常な構造または形態の精子を分離するために不可欠なステップです。 精液の準備は、精液を除去し、現在の細胞と汚染された膿細胞または細菌細胞を維持します。
さまざまなプロトコルの中で、密度勾配とスイムアップが最も一般的です。 運動性が低く、サンプル数が多い場合は、密度勾配が示されます。 生成または分離された精子フォーム処理手順の最終評価はまだ評価されていません。
異なる研究基準を使用して泳ぐように、主に使用されるプロトコル密度勾配（DG）の出力を他のプロトコルと比較するための評価研究の準備は、より良い処理手順のためのより明確な評価を行うことができます。
評価のために準備されたケースは、精液サンプルが WHO 2010 の正常値内にあり、運動性が 500 万/ml を超えている場合でした。 すべてのサンプルは、2 つの準備技術による処理のために 2 つの部分に分割されます。
37.0 Dc で 48 時間の運動性モニタリング、異常な形態、ヒアルロン酸親和性試験、汚染細菌の増殖を使用して、2 つのアウトプットに対して行われる準備後の評価。
この研究では、処理中に精子に適用される物理的および時間的ストレス インターフェイスの欠点効果を示し、出力された結果を、遠心分離インターフェイスまたはより多くの処理時間なしで処理された精子から生成された結果と比較します。 精子は自然な動きと通常の行動によって自分自身を分離します。
評価は次の 3 つのカテゴリで行われます。
- 最終的な出力品質: 正味の非常に進行性の精子とそのカウント数 (精子の形態、数、および運動性): 我々の結果は、より高いカウントとより多くの割合の漸進的に運動する精子を持つ SD メソッドから取得された、より音韻的に正常な精子を示しました。
生産された精子の質: 37.0 Ds で 2 日間の精子活力検査または精子運動力のモニタリングによる 運動性は、24 時間および 48 時間後に評価されます。 両方の測定値は、密度勾配を使用して処理された部分で時間のかかる精子の運動性と活力のより多くの減少を示しました. 一方、SD を使用して処理された部分は、有意に優れた測定値を示しました。
精子後処理の別の機能的活動は、ヒアルロン酸に対する精子の親和性を評価するため、HBA テスト スライドを使用することです。 このテストまたはアッセイは、精子の生理活性がまだ維持されていることを示しています。 一方、水泳グループ研究では、HBA がより高い有意な結果を示しました。
- 分離の品質を示すために使用される最終評価: 精液の操作および処理中の汚染および持ち越し効果を使用して監視されます。 通常の培養培地 (血液寒天培地) を使用した細菌汚染は、各部分から 5 ミクロンを評価して、細菌細胞の有無、または処理および操作中に評価します。
研究の種類
入学 (実際)
連絡先と場所
参加基準
適格基準
就学可能な年齢
健康ボランティアの受け入れ
受講資格のある性別
サンプリング方法
調査対象母集団
説明
包含基準:
- WHO 2010 基準によると、運動率が 10% を超える精液
- WHO 2010 基準によると、精子数が 5 ミル/ml を超える精液
除外基準:
- 精液量が1.0ml未満
- 液化時間が60分以上の精液
研究計画
研究はどのように設計されていますか？
デザインの詳細
- 観測モデル：ケースコントロール
- 時間の展望：見込みのある
コホートと介入
グループ/コホート |
介入・治療 |
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濃度勾配処理
密度勾配 (80/40 %) を使用して処理された精液部分 1200 r.p.m./20 分でスピン 1200 r.p.m./5 分で洗浄 1200 r.p.m./5 分で再洗浄 形態評価のための Diff-Quik 染色 グレード A および B の運動性評価 濃度 (mil/ml) 24 H 半減期 48 H 半減期 HBA 試験 細菌汚染 |
パパニコロー染色 (ヘマトキシリン、オレンジ G6、および EA50) は、好塩基性細胞成分と好酸性細胞成分の明確な違いを示し、クロマチン パターンの詳細な検査を可能にし、精子の形態の評価や未成熟精子の存在の評価に役立ちます。 細胞質染色は、イオン強度、pH、および細胞部門と染色の組成 (OG6 および EA50) に応じて、赤と緑の間で変化する可能性があります。 精液の処理部分の形態学的評価。 分離プロセスとして、形態学的異常精子を最小限に抑える必要があります。
他の名前：
より良い分離方法は、処理後により進行性の精子を保証します. (WHO 2010) 参考文献によって採点された A および B スケールを使用した等級付け。
他の名前：
分離された精子の数 処理後の各部分の精子数を測定するために、Makler チャンバーを使用します。
他の名前：
非運動性精子に対するアクティブな運動性精子の割合。 24 時間のインキュベーション後の各サンプルの顕微鏡検査で、漸進的に運動する精子とそれらの非進行性または非運動性を評価します。
他の名前：
非運動性精子に対するアクティブな運動性精子の割合。 48 時間のインキュベーション後の各サンプルの顕微鏡検査で、漸進的に運動する精子と非前進または非運動の精子を評価します。
他の名前：
Hyaluronic Binding Assay (HBA®) は、精液分析における男性不妊の疑いに対する重要な診断ツールです。 ほんの数分で、HBA® スライドは、サンプル中の成熟結合精子の割合に対する答えを提供します (HBA® スコア %)。 HBA スライドを使用することで、各サンプルで生理的に活性な精子を数え、第 3 調査アームからの後処理カウントを参照して活性精子の割合を計算できます。
他の名前：
10ミクロンの血液寒天培養プレートを使用した通常の細菌培養は、最終的に洗浄されたサンプルであり、処理中のキャリーオーバーによって引き起こされる細菌汚染の存在を確認します。
他の名前：
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スイミングダウン処理
スイム ダウンを使用して処理された精液部分 (100%) スイム ダウン用に室温で 30 分間処理 1200 r.p.m./5 分で洗浄 1200 r.p.m./5 分で再洗浄 形態評価のための Diff-Quik 染色 グレード A および B の運動性評価 濃度 (mil/ml) 24 H 半減期 48 H 半減期 HBA 試験 細菌汚染 |
パパニコロー染色 (ヘマトキシリン、オレンジ G6、および EA50) は、好塩基性細胞成分と好酸性細胞成分の明確な違いを示し、クロマチン パターンの詳細な検査を可能にし、精子の形態の評価や未成熟精子の存在の評価に役立ちます。 細胞質染色は、イオン強度、pH、および細胞部門と染色の組成 (OG6 および EA50) に応じて、赤と緑の間で変化する可能性があります。 精液の処理部分の形態学的評価。 分離プロセスとして、形態学的異常精子を最小限に抑える必要があります。
他の名前：
より良い分離方法は、処理後により進行性の精子を保証します. (WHO 2010) 参考文献によって採点された A および B スケールを使用した等級付け。
他の名前：
分離された精子の数 処理後の各部分の精子数を測定するために、Makler チャンバーを使用します。
他の名前：
非運動性精子に対するアクティブな運動性精子の割合。 24 時間のインキュベーション後の各サンプルの顕微鏡検査で、漸進的に運動する精子とそれらの非進行性または非運動性を評価します。
他の名前：
非運動性精子に対するアクティブな運動性精子の割合。 48 時間のインキュベーション後の各サンプルの顕微鏡検査で、漸進的に運動する精子と非前進または非運動の精子を評価します。
他の名前：
Hyaluronic Binding Assay (HBA®) は、精液分析における男性不妊の疑いに対する重要な診断ツールです。 ほんの数分で、HBA® スライドは、サンプル中の成熟結合精子の割合に対する答えを提供します (HBA® スコア %)。 HBA スライドを使用することで、各サンプルで生理的に活性な精子を数え、第 3 調査アームからの後処理カウントを参照して活性精子の割合を計算できます。
他の名前：
10ミクロンの血液寒天培養プレートを使用した通常の細菌培養は、最終的に洗浄されたサンプルであり、処理中のキャリーオーバーによって引き起こされる細菌汚染の存在を確認します。
他の名前：
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この研究は何を測定していますか？
主要な結果の測定
結果測定 |
メジャーの説明 |
時間枠 |
|---|---|---|
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HBA
時間枠：1日
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親和性は、処理されたサンプルの 10 μ L から生成された非運動精子のパーセンテージに従って測定されます。
|
1日
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異常な形
時間枠：1日
|
処理後に正常に染色された精子の割合
|
1日
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二次結果の測定
結果測定 |
メジャーの説明 |
時間枠 |
|---|---|---|
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最終濃度
時間枠：1日
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濃度は本来の運動性と濃度に応じて変動、DG
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1日
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24時間の運動性
時間枠：1日
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37.0 Dc インキュベーション後の運動性評価
|
1日
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48時間の運動性
時間枠：2日
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37.0 Dc インキュベーション後の運動性評価
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2日
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その他の成果指標
結果測定 |
メジャーの説明 |
時間枠 |
|---|---|---|
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細菌汚染
時間枠：2日
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細菌細胞が存在しないことを保証するために、処理されたサンプルの 5 ミクロンの細菌培養。
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2日
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協力者と研究者
捜査官
- スタディディレクター：Ahmad M Metwalley、Adliyah
出版物と役立つリンク
研究記録日
主要日程の研究
研究開始
一次修了 (実際)
研究の完了 (実際)
試験登録日
最初に提出
QC基準を満たした最初の提出物
最初の投稿 (見積もり)
学習記録の更新
投稿された最後の更新 (見積もり)
QC基準を満たした最後の更新が送信されました
最終確認日
詳しくは
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