Studio di valutazione tra gradiente di densità e nuoto verso il basso per l'elaborazione del seme
Panoramica dello studio
Stato
Condizioni
Intervento / Trattamento
Descrizione dettagliata
L'elaborazione del seme da utilizzare per diverse procedure ART è un passaggio essenziale per isolare gli spermatozoi morti così come quelli anormalmente strutturali o morfologici. La preparazione del seme continuerà a rimuovere i fluidi seminali e le cellule presenti e la contaminazione delle cellule del pus o delle cellule batteriche.
Tra i diversi protocolli, Density Gradient e swim-up sono i più comuni. Per scarsa motilità e numero di campioni è indicato il gradiente di densità. Mentre la valutazione finale per le procedure di elaborazione della forma dello sperma prodotto o separato non è stata ancora valutata.
Preparazione per lo studio di valutazione per confrontare l'output del protocollo principale utilizzato Density Gradient (DG) con altri protocolli poiché il nuoto verso il basso utilizzando diversi criteri di studio può rendere più chiara la valutazione per migliori procedure di elaborazione.
I casi predisposti per la valutazione erano campioni di sperma che rientravano nei valori normali dell'OMS 2010 per la motilità e contavano oltre 5 milioni/ml. Tutti i campioni devono essere divisi in due porzioni per l'elaborazione con le due tecniche di preparazione.
Valutazione post preparazione da eseguire per le due uscite utilizzando: monitoraggio della motilità per 48 ore a 37,0 Dc, forme anormali, test di affinità ialuronanica e crescita batterica contaminante.
In questo studio mostreremo l'effetto negativo dell'interfaccia di stress fisico e temporale applicata agli spermatozoi durante l'elaborazione e confronteremo i risultati ottenuti con quelli prodotti dallo sperma processato senza interfaccia di centrifugazione o più tempo di elaborazione. Poiché lo sperma si separerà da solo dal suo movimento naturale e dal suo comportamento normale.
La valutazione sarà su tre categorie:
- La qualità dell'output finale: come spermatozoi netti altamente progressivi e il loro numero di conteggio (morfologia, conteggio e motilità degli spermatozoi): poiché i nostri risultati hanno mostrato più spermatozoi fonologicamente normali recuperati dal metodo SD con conteggio più elevato e più percentuale di spermatozoi progressivamente mobili.
La qualità dello sperma prodotto: attraverso il monitoraggio del test di vitalità dello sperma o il potere di motilità dello sperma tra 2 giorni a 37,0 Ds. La motilità sarà valutata dopo 24 ore e 48 ore. Entrambe le letture hanno mostrato una maggiore diminuzione della motilità e della vitalità degli spermatozoi con il tempo che richiede con le porzioni elaborate utilizzando il gradiente di densità. Mentre le porzioni elaborate utilizzando SD hanno mostrato letture significativamente migliori.
Un'altra attività funzionale della post-elaborazione dello sperma è l'utilizzo del vetrino per il test HBA, poiché valutiamo l'affinità dello sperma con l'acido ialuronico. Questo test o analisi indica l'attività fisiologica dello sperma ancora mantenuta. Mentre ha mostrato risultati significativi più alti dell'HBA con lo studio di gruppo di nuoto verso il basso.
- Valutazione finale, utilizzata per presentare la qualità della separazione: viene monitorata utilizzando la contaminazione e l'effetto di trascinamento durante la manipolazione e la lavorazione del seme. Contaminazione batterica utilizzando terreni di coltura di routine (agar sangue) per valutare la presenza e l'assenza di cellule batteriche a 5 micron da ciascuna porzione o durante l'elaborazione e la manipolazione.
Tipo di studio
Iscrizione (Effettivo)
Contatti e Sedi
Criteri di partecipazione
Criteri di ammissibilità
Età idonea allo studio
Accetta volontari sani
Sessi ammissibili allo studio
Metodo di campionamento
Popolazione di studio
Descrizione
Criterio di inclusione:
- Sperma con motilità superiore al 10% secondo gli standers dell'OMS 2010
- Sperma con numero di spermatozoi superiore a 5 mil/ml secondo gli standard dell'OMS 2010
Criteri di esclusione:
- Volume di sperma inferiore a 1,0 ml
- Sperma con tempo di liquefazione superiore a 60 min
Piano di studio
Come è strutturato lo studio?
Dettagli di progettazione
- Modelli osservazionali: Caso di controllo
- Prospettive temporali: Prospettiva
Coorti e interventi
Gruppo / Coorte |
Intervento / Trattamento |
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Elaborazione del gradiente di densità
Porzione di seme processata utilizzando il gradiente di densità (80/40%) Centrifuga a 1200 giri/min/20 min Lavaggio a 1200 giri/5 min Rilavaggio a 1200 giri/5 min quindi valutazione da eseguire utilizzando: Colorazione Diff-Quik per la valutazione della morfologia Valutazione della motilità per il grado A e B Concentrazione (mil/ml) Emivita di 24 ore Emivita di 48 ore Test HBA Contaminazione batterica |
La colorazione di Papanicolaou (ematossilina, arancio G6 e EA50) fornisce una chiara differenza tra costituenti cellulari basofili e acidofili e consente quindi un esame dettagliato del pattern cromatinico, utile nella valutazione della morfologia degli spermatozoi e nella valutazione della presenza di spermatozoi immaturi. La colorazione citoplasmatica può variare tra rosso e verde a seconda della forza ionica, del pH e della composizione del reparto cellulare e della colorazione (OG6 e EA50). Valutazione morfologica per porzioni processate di seme. Poiché il processo di separazione deve ridurre al minimo lo sperma anormale morfologico.
Altri nomi:
Il metodo di separazione migliore assicurerà spermatozoi più progressivi dopo l'elaborazione. Classificazione utilizzando la scala A e B segnata da riferimenti (WHO 2010).
Altri nomi:
conteggio degli spermatozoi isolati Utilizzo della camera di Makler per il conteggio degli spermatozoi per ogni porzione dopo l'elaborazione.
Altri nomi:
percentuale di spermatozoi attivi da mobili a non mobili. Esame microscopico per ogni campione dopo 24 ore di incubazione, per valutare gli spermatozoi progressivamente mobili e quelli non progressivi o non mobili.
Altri nomi:
percentuale di spermatozoi attivi da mobili a non mobili. Esame microscopico per ogni campione dopo 48 ore di incubazione, per valutare gli spermatozoi progressivamente mobili e quelli non progressivi o non mobili.
Altri nomi:
Lo Hyaluronic Binding Assay (HBA®) è un importante strumento diagnostico per sospetta infertilità maschile nell'analisi del seme. In pochi minuti il vetrino HBA® fornisce una risposta alla proporzione di spermatozoi leganti maturi nel campione (The HBA® score %). Utilizzando il vetrino HBA possiamo contare gli spermatozoi fisiologicamente attivi in ogni campione e calcolare la percentuale di spermatozoi attivi con riferimento al conteggio post-elaborazione dal 3° braccio investigativo.
Altri nomi:
Coltura batterica di routine utilizzando piastre di coltura di agar sangue per campioni da 10 micron infine lavati, per confermare la presenza di qualsiasi contaminazione batterica causata dal trascinamento durante la processazione.
Altri nomi:
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Elaborazione a nuoto
Porzione di seme processata utilizzando swimming down (100%) 30 min a temperatura ambiente lavorazione per swim down Lavaggio a 1200 giri/min/5 min Rilavaggio a 1200 giri/5 min quindi valutazione da eseguire utilizzando: Colorazione Diff-Quik per la valutazione della morfologia Valutazione della motilità per il grado A e B Concentrazione (mil/ml) Emivita di 24 ore Emivita di 48 ore Test HBA Contaminazione batterica |
La colorazione di Papanicolaou (ematossilina, arancio G6 e EA50) fornisce una chiara differenza tra costituenti cellulari basofili e acidofili e consente quindi un esame dettagliato del pattern cromatinico, utile nella valutazione della morfologia degli spermatozoi e nella valutazione della presenza di spermatozoi immaturi. La colorazione citoplasmatica può variare tra rosso e verde a seconda della forza ionica, del pH e della composizione del reparto cellulare e della colorazione (OG6 e EA50). Valutazione morfologica per porzioni processate di seme. Poiché il processo di separazione deve ridurre al minimo lo sperma anormale morfologico.
Altri nomi:
Il metodo di separazione migliore assicurerà spermatozoi più progressivi dopo l'elaborazione. Classificazione utilizzando la scala A e B segnata da riferimenti (WHO 2010).
Altri nomi:
conteggio degli spermatozoi isolati Utilizzo della camera di Makler per il conteggio degli spermatozoi per ogni porzione dopo l'elaborazione.
Altri nomi:
percentuale di spermatozoi attivi da mobili a non mobili. Esame microscopico per ogni campione dopo 24 ore di incubazione, per valutare gli spermatozoi progressivamente mobili e quelli non progressivi o non mobili.
Altri nomi:
percentuale di spermatozoi attivi da mobili a non mobili. Esame microscopico per ogni campione dopo 48 ore di incubazione, per valutare gli spermatozoi progressivamente mobili e quelli non progressivi o non mobili.
Altri nomi:
Lo Hyaluronic Binding Assay (HBA®) è un importante strumento diagnostico per sospetta infertilità maschile nell'analisi del seme. In pochi minuti il vetrino HBA® fornisce una risposta alla proporzione di spermatozoi leganti maturi nel campione (The HBA® score %). Utilizzando il vetrino HBA possiamo contare gli spermatozoi fisiologicamente attivi in ogni campione e calcolare la percentuale di spermatozoi attivi con riferimento al conteggio post-elaborazione dal 3° braccio investigativo.
Altri nomi:
Coltura batterica di routine utilizzando piastre di coltura di agar sangue per campioni da 10 micron infine lavati, per confermare la presenza di qualsiasi contaminazione batterica causata dal trascinamento durante la processazione.
Altri nomi:
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Cosa sta misurando lo studio?
Misure di risultato primarie
Misura del risultato |
Misura Descrizione |
Lasso di tempo |
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HBA
Lasso di tempo: 1 giorno
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L'affinità viene misurata in base alla percentuale di spermatozoi non mobili prodotti da 10 µL di campione processato.
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1 giorno
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Forme anormali
Lasso di tempo: 1 giorno
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Percentuale di spermatozoi normalmente colorati dopo la processazione
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1 giorno
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Misure di risultato secondarie
Misura del risultato |
Misura Descrizione |
Lasso di tempo |
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Concentrazione finale
Lasso di tempo: 1 giorno
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La concentrazione era la fluttuazione secondo la motilità e la concentrazione originarie, DG
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1 giorno
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Mobilità di 24 ore
Lasso di tempo: 1 giorno
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Valutazione della motilità dopo 37,0 Dc di incubazione
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1 giorno
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Mobilità di 48 ore
Lasso di tempo: 2 giorni
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Valutazione della motilità dopo 37,0 Dc di incubazione
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2 giorni
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Altre misure di risultato
Misura del risultato |
Misura Descrizione |
Lasso di tempo |
|---|---|---|
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Contaminazione batterica
Lasso di tempo: 2 giorni
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coltura batterica per 5 micron di campioni trattati per assicurare l'assenza di cellule batteriche.
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2 giorni
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Collaboratori e investigatori
Sponsor
Investigatori
- Direttore dello studio: Ahmad M Metwalley, Adliyah
Pubblicazioni e link utili
Studiare le date dei record
Studia le date principali
Inizio studio
Completamento primario (Effettivo)
Completamento dello studio (Effettivo)
Date di iscrizione allo studio
Primo inviato
Primo inviato che soddisfa i criteri di controllo qualità
Primo Inserito (Stima)
Aggiornamenti dei record di studio
Ultimo aggiornamento pubblicato (Stima)
Ultimo aggiornamento inviato che soddisfa i criteri QC
Ultimo verificato
Maggiori informazioni
Termini relativi a questo studio
Parole chiave
Termini MeSH pertinenti aggiuntivi
Altri numeri di identificazione dello studio
- AlBarakaSD2
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