Evaluatiestudie tussen dichtheidsgradiënt en afzwemmen voor spermaverwerking
Studie Overzicht
Toestand
Conditie
Gedetailleerde beschrijving
Spermaverwerking die voor verschillende ART-procedures moet worden gebruikt, is een essentiële stap om dode spermacellen te isoleren, evenals die met een abnormale structuur of morfologie. Spermavoorbereiding zal doorgaan met het verwijderen van de zaadvloeistoffen en aanwezige cellen en besmetting met puscellen of bacteriële cellen.
Van de verschillende protocollen zijn Density Gradient en swim-up de meest voorkomende. Voor slechte motiliteit en aantalmonsters wordt dichtheidsgradiënt aangegeven. Terwijl de definitieve evaluatie voor procedures voor de verwerking van geproduceerde of gescheiden spermavormen nog niet was geëvalueerd.
Voorbereiding voor evaluatieonderzoek om de output van het belangrijkste gebruikte protocol Density Gradient (DG) te vergelijken met een ander protocol, aangezien zwemmen met verschillende studiecriteria een duidelijkere evaluatie kan maken voor betere verwerkingsprocedures.
De voor evaluatie gearrangeerde gevallen waren spermamonsters die binnen de WHO 2010 normale waarden voor motiliteit vielen en meer dan 5 miljoen/ml tellen. Alle monsters moeten worden verdeeld in twee porties voor verwerking door de twee bereidingstechnieken.
Evaluatie na voorbereiding moet worden uitgevoerd voor de twee outputs met behulp van: motiliteitsmonitoring gedurende 48 uur bij 37,0 Dc, abnormale vormen, hyaluronan-affiniteitstesten en verontreinigende bacteriegroei.
In deze studie zullen we het nadelige effect laten zien van fysieke en tijdsstress-interface toegepast op spermacellen tijdens de verwerking, en de uitvoerresultaten vergelijken met de resultaten geproduceerd uit sperma dat is verwerkt zonder centrifugatie-interface of meer verwerkingstijd. Omdat het sperma zichzelf zal scheiden door zijn natuurlijke beweging en normaal gedrag.
Evaluatie vindt plaats op drie categorieën:
- De uiteindelijke uitvoerkwaliteit: als netto zeer progressieve zaadcellen en hun aantal (spermamorfologie, aantal en beweeglijkheid): aangezien onze resultaten meer fonologisch normaal sperma lieten zien dat werd opgehaald uit de SD-methode met een hoger aantal en meer percentage progressief beweeglijke spermacellen.
De kwaliteit van het geproduceerde sperma: door het testen van de vitaliteit van het sperma of de beweeglijkheid van het sperma gedurende 2 dagen bij 37,0 Ds. Motiliteit wordt na 24 uur en 48 uur geëvalueerd. Beide metingen toonden een meer afname van de beweeglijkheid en vitaliteit van het sperma met tijdrovende gedeelten die werden verwerkt met behulp van dichtheidsgradiënt. Terwijl delen die met SD waren verwerkt, aanzienlijk betere waarden vertoonden.
Een andere functionele activiteit van de nabewerking van sperma is het gebruik van HBA-testglaasjes, omdat we de affiniteit van sperma met hyaluronan evalueren. Deze test of test geeft aan dat de fysiologische activiteit van het sperma nog steeds wordt behouden. Hoewel het HBA hogere significante resultaten liet zien met een zwemmende groepsstudie.
- Eindevaluatie, die wordt gebruikt om de kwaliteit van de scheiding weer te geven: wordt gecontroleerd aan de hand van het besmettings- en verslepingseffect tijdens spermamanipulatie en -verwerking. Bacteriële verontreiniging met behulp van routinekweekmedia (bloedagar) om 5 micron van elke portie te evalueren op aanwezigheid en afwezigheid van bacteriële cellen of tijdens verwerking en manipulatie.
Studietype
Inschrijving (Werkelijk)
Contacten en locaties
Deelname Criteria
Geschiktheidscriteria
Leeftijden die in aanmerking komen voor studie
Accepteert gezonde vrijwilligers
Geslachten die in aanmerking komen voor studie
Bemonsteringsmethode
Studie Bevolking
Beschrijving
Inclusiecriteria:
- Sperma met een beweeglijkheid van meer dan 10 % volgens de WHO 2010-standers
- Sperma met een spermatelling van meer dan 5 mil/ml volgens de normen van de WHO 2010
Uitsluitingscriteria:
- Spermavolume minder dan 1,0 ml
- Sperma met liquefactietijd van meer dan 60 minuten
Studie plan
Hoe is de studie opgezet?
Ontwerpdetails
- Observatiemodellen: Case-control
- Tijdsperspectieven: Prospectief
Cohorten en interventies
Groep / Cohort |
Interventie / Behandeling |
|---|---|
|
Dichtheid Verloopverwerking
Spermaportie verwerkt met dichtheidsgradiënt (80/40%) Centrifugeren op 1200 toeren per minuut/20 min Wassen op 1200 toeren per minuut/5 min Opnieuw wassen op 1200 toeren per minuut/5 min vervolgens moet de evaluatie worden uitgevoerd met behulp van: Diff-Quik-kleuring voor evaluatie van de morfologie Motiliteit Evaluatie voor graad A en B Concentratie (mil/ml) 24 uur halfwaardetijd 48 uur halfwaardetijd HBA-testen Bacteriële verontreiniging |
Papanicolaou-kleuring (haematoxyline, oranje G6 en EA50) geeft een duidelijk verschil tussen basofiele en acidofiele celbestanddelen en maakt daardoor een gedetailleerd onderzoek van het chromatinepatroon mogelijk, wat nuttig is bij de evaluatie van de spermamorfologie en de beoordeling van de aanwezigheid van onrijpe spermatozoa. Cytoplasmatische kleuring kan variëren tussen rood en groen, afhankelijk van de ionsterkte, pH en samenstelling van de celafdeling en de kleuring (OG6 en EA50). Morfologische beoordeling voor verwerkte delen van sperma. Omdat het scheidingsproces het morfologische abnormale sperma moet minimaliseren.
Andere namen:
De betere scheidingsmethode zorgt voor meer progressieve spermacellen na verwerking. Beoordeling met behulp van A- en B-schaal gescoord door (WHO 2010) referenties.
Andere namen:
telling van geïsoleerde spermacellen Makler-kamer gebruiken voor telling van spermacellen voor elke portie na verwerking.
Andere namen:
percentage actief beweeglijk tot niet-beweeglijk sperma. Microscopisch onderzoek voor elk monster na 24 uur incubatie, om het progressief beweeglijke sperma en de niet-progressieve of niet-mobiele spermacellen te evalueren.
Andere namen:
percentage actief beweeglijk tot niet-beweeglijk sperma. Microscopisch onderzoek voor elk monster na 48 uur incubatie, om het progressief beweeglijke sperma en de niet-progressieve of niet-mobiele spermacellen te evalueren.
Andere namen:
De Hyaluronic Binding Assay (HBA®) is een belangrijk diagnostisch hulpmiddel voor vermoedelijke mannelijke onvruchtbaarheid bij de analyse van sperma. Binnen enkele minuten geeft het HBA®-glaasje een antwoord op het aandeel volwassen bindende spermatozoa in het monster (de HBA®-score %). Door HBA-dia te gebruiken, kunnen we de fysiologisch actieve spermacellen bij elk monster tellen en het percentage actieve spermacellen berekenen met verwijzing naar de telling na verwerking van de 3e onderzoeksarm.
Andere namen:
Routinematige bacteriekweek met behulp van Blood Agar-kweekplaten voor uiteindelijk gewassen monsters van 10 micron, om de aanwezigheid van eventuele bacteriële besmetting te bevestigen die is veroorzaakt door overdracht tijdens de verwerking.
Andere namen:
|
|
Zwemmen naar beneden Verwerking
Spermaportie verwerkt met afzwemmen (100 %) 30 min bij kamertemperatuur verwerking voor afzwemmen Wassen op 1200 tpm/5min Opnieuw wassen op 1200 tpm/5min vervolgens moet de evaluatie worden uitgevoerd met behulp van: Diff-Quik-kleuring voor evaluatie van de morfologie Motiliteit Evaluatie voor graad A en B Concentratie (mil/ml) 24 uur halfwaardetijd 48 uur halfwaardetijd HBA-testen Bacteriële verontreiniging |
Papanicolaou-kleuring (haematoxyline, oranje G6 en EA50) geeft een duidelijk verschil tussen basofiele en acidofiele celbestanddelen en maakt daardoor een gedetailleerd onderzoek van het chromatinepatroon mogelijk, wat nuttig is bij de evaluatie van de spermamorfologie en de beoordeling van de aanwezigheid van onrijpe spermatozoa. Cytoplasmatische kleuring kan variëren tussen rood en groen, afhankelijk van de ionsterkte, pH en samenstelling van de celafdeling en de kleuring (OG6 en EA50). Morfologische beoordeling voor verwerkte delen van sperma. Omdat het scheidingsproces het morfologische abnormale sperma moet minimaliseren.
Andere namen:
De betere scheidingsmethode zorgt voor meer progressieve spermacellen na verwerking. Beoordeling met behulp van A- en B-schaal gescoord door (WHO 2010) referenties.
Andere namen:
telling van geïsoleerde spermacellen Makler-kamer gebruiken voor telling van spermacellen voor elke portie na verwerking.
Andere namen:
percentage actief beweeglijk tot niet-beweeglijk sperma. Microscopisch onderzoek voor elk monster na 24 uur incubatie, om het progressief beweeglijke sperma en de niet-progressieve of niet-mobiele spermacellen te evalueren.
Andere namen:
percentage actief beweeglijk tot niet-beweeglijk sperma. Microscopisch onderzoek voor elk monster na 48 uur incubatie, om het progressief beweeglijke sperma en de niet-progressieve of niet-mobiele spermacellen te evalueren.
Andere namen:
De Hyaluronic Binding Assay (HBA®) is een belangrijk diagnostisch hulpmiddel voor vermoedelijke mannelijke onvruchtbaarheid bij de analyse van sperma. Binnen enkele minuten geeft het HBA®-glaasje een antwoord op het aandeel volwassen bindende spermatozoa in het monster (de HBA®-score %). Door HBA-dia te gebruiken, kunnen we de fysiologisch actieve spermacellen bij elk monster tellen en het percentage actieve spermacellen berekenen met verwijzing naar de telling na verwerking van de 3e onderzoeksarm.
Andere namen:
Routinematige bacteriekweek met behulp van Blood Agar-kweekplaten voor uiteindelijk gewassen monsters van 10 micron, om de aanwezigheid van eventuele bacteriële besmetting te bevestigen die is veroorzaakt door overdracht tijdens de verwerking.
Andere namen:
|
Wat meet het onderzoek?
Primaire uitkomstmaten
Uitkomstmaat |
Maatregel Beschrijving |
Tijdsspanne |
|---|---|---|
|
HBA
Tijdsspanne: 1 dag
|
Affiniteit wordt gemeten aan de hand van het percentage niet-beweeglijk sperma geproduceerd uit 10 µL verwerkt monster.
|
1 dag
|
|
Abnormale formulieren
Tijdsspanne: 1 dag
|
Percentage normaal gekleurd sperma na verwerking
|
1 dag
|
Secundaire uitkomstmaten
Uitkomstmaat |
Maatregel Beschrijving |
Tijdsspanne |
|---|---|---|
|
Laatste concentratie
Tijdsspanne: 1 dag
|
Concentratie was fluctuatie volgens oorspronkelijke beweeglijkheid en concentratie, DG
|
1 dag
|
|
24-uurs beweeglijkheid
Tijdsspanne: 1 dag
|
Motiliteitsevaluatie na 37,0 Dc incubatie
|
1 dag
|
|
48 uur beweeglijkheid
Tijdsspanne: 2 dagen
|
Motiliteitsevaluatie na 37,0 Dc incubatie
|
2 dagen
|
Andere uitkomstmaten
Uitkomstmaat |
Maatregel Beschrijving |
Tijdsspanne |
|---|---|---|
|
Bacteriële besmetting
Tijdsspanne: 2 dagen
|
bacteriecultuur voor 5 micron verwerkte monsters om de afwezigheid van bacteriële cellen te verzekeren.
|
2 dagen
|
Medewerkers en onderzoekers
Sponsor
Onderzoekers
- Studie directeur: Ahmad M Metwalley, Adliyah
Publicaties en nuttige links
Studie record data
Bestudeer belangrijke data
Studie start
Primaire voltooiing (Werkelijk)
Studie voltooiing (Werkelijk)
Studieregistratiedata
Eerst ingediend
Eerst ingediend dat voldeed aan de QC-criteria
Eerst geplaatst (Schatting)
Updates van studierecords
Laatste update geplaatst (Schatting)
Laatste update ingediend die voldeed aan QC-criteria
Laatst geverifieerd
Meer informatie
Termen gerelateerd aan deze studie
Trefwoorden
Aanvullende relevante MeSH-voorwaarden
Andere studie-ID-nummers
- AlBarakaSD2
Deze informatie is zonder wijzigingen rechtstreeks van de website clinicaltrials.gov gehaald. Als u verzoeken heeft om uw onderzoeksgegevens te wijzigen, te verwijderen of bij te werken, neem dan contact op met register@clinicaltrials.gov. Zodra er een wijziging wordt doorgevoerd op clinicaltrials.gov, wordt deze ook automatisch bijgewerkt op onze website .