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Estudo de avaliação entre gradiente de densidade e natação para processamento de sêmen

30 de dezembro de 2014 atualizado por: Ahmad Mustafa Mohamed Metwalley
Este estudo avalia a qualidade do esperma produzido após o processamento do sêmen usando Gradiente de Densidade (DG) e natação (SD).

Visão geral do estudo

Descrição detalhada

O processamento do sêmen para ser usado em diferentes procedimentos de ART é uma etapa essencial para isolar espermatozóides mortos, bem como aqueles com estrutura ou morfologia anormal. A preparação do sêmen continuará a remover os fluidos seminais e células presentes e células pus de contaminação ou células bacterianas.

Entre os diferentes protocolos, o Gradiente de Densidade e o swim-up são os mais comuns. Para motilidade fraca e amostra numérica, o gradiente de densidade é indicado. Embora a avaliação final para procedimentos de processamento de formulários de esperma produzidos ou separados ainda não tenha sido avaliada.

Preparação para estudo de avaliação para comparar a saída do principal protocolo usado Gradiente de Densidade (DG) com outro protocolo como natação usando diferentes critérios de estudo pode fazer uma avaliação mais clara para melhores procedimentos de processamento.

Os casos agendados para avaliação em que as amostras de sêmen estão dentro dos valores normais de motilidade de 2010 da OMS e contam com mais de 5 milhões/ml. Todas as amostras devem ser divididas em duas porções para processamento pelas duas técnicas de preparação.

Avaliação pós-preparação a ser feita para os dois resultados usando: monitoramento de motilidade por 48 horas a 37,0 Dc, formas anormais, teste de afinidade de hialuronano e crescimento bacteriano contaminante.

Neste estudo, mostraremos o efeito negativo da interface de estresse físico e de tempo aplicada nos espermatozoides durante o processamento e compararemos os resultados de saída com os resultados produzidos a partir do esperma processado sem interface de centrifugação ou mais tempo de processamento. Como o esperma se separará por seu movimento natural e comportamento normal.

A avaliação será em três categorias:

  1. A qualidade de saída final: como espermatozóides líquidos altamente progressivos e seu número de contagem (morfologia, contagem e motilidade espermática): como nossos resultados mostraram mais espermatozóides fonologicamente normais recuperados do método SD com maior contagem e maior porcentagem de espermatozoides progressivamente móveis.
  2. A qualidade do esperma produzido: através do monitoramento de testes de vitalidade espermática ou poder de motilidade espermática entre 2 dias a 37,0 Ds. A motilidade será avaliada após 24 horas e 48 horas. Ambas as leituras mostraram maior diminuição na motilidade e vitalidade dos espermatozóides com o tempo consumido com porções processadas usando gradiente de densidade. Enquanto as porções processadas usando SD mostraram leituras significativamente melhores.

    Outra atividade funcional do pós-processamento do esperma é usar a lâmina de teste HBA, pois avaliamos a afinidade do esperma ao hialuronano. Este teste ou ensaio indica que a atividade fisiológica do esperma ainda é mantida. Embora tenha mostrado resultados significativos mais altos de HBA com o estudo do grupo de natação.

  3. Avaliação final, que é usada para apresentar a qualidade da separação: é monitorada usando a contaminação e o efeito de carry over durante a manipulação e processamento do sêmen. Contaminação bacteriana usando meios de cultura de rotina (ágar sangue) para avaliar 5 mícrons de cada porção quanto à presença e ausência de quaisquer células bacterianas ou durante o processamento e manipulação.

Tipo de estudo

Observacional

Inscrição (Real)

100

Contactos e Locais

Esta seção fornece os detalhes de contato para aqueles que conduzem o estudo e informações sobre onde este estudo está sendo realizado.

Locais de estudo

    • Adliyah
      • Manama, Adliyah, Bahrein, 15006
        • Al Baraka Fertility Hospital
      • Sohag, Egito, 15006
        • Ibn Sina IVF Center- Ibn Sina Hospital

Critérios de participação

Os pesquisadores procuram pessoas que se encaixem em uma determinada descrição, chamada de critérios de elegibilidade. Alguns exemplos desses critérios são a condição geral de saúde de uma pessoa ou tratamentos anteriores.

Critérios de elegibilidade

Idades elegíveis para estudo

18 anos a 60 anos (Adulto)

Aceita Voluntários Saudáveis

Não

Gêneros Elegíveis para o Estudo

Macho

Método de amostragem

Amostra Não Probabilística

População do estudo

Os casos organizados para estudo foram submetidos à análise de sêmen de rotina. Acordos dos pacientes coletados como termo de consentimento assinado durante o envio da amostra.

Descrição

Critério de inclusão:

  • Sêmen com motilidade superior a 10% de acordo com os padrões de 2010 da OMS
  • Sêmen com contagem de espermatozoides superior a 5 mil/ml de acordo com os padrões de 2010 da OMS

Critério de exclusão:

  • Volume de sêmen inferior a 1,0 ml
  • Sêmen com tempo de liquefação superior a 60 min

Plano de estudo

Esta seção fornece detalhes do plano de estudo, incluindo como o estudo é projetado e o que o estudo está medindo.

Como o estudo é projetado?

Detalhes do projeto

  • Modelos de observação: Controle de caso
  • Perspectivas de Tempo: Prospectivo

Coortes e Intervenções

Grupo / Coorte
Intervenção / Tratamento
Processamento de Gradiente de Densidade

Porção de sêmen processada usando Gradiente de Densidade (80/40%) Centrifugação a 1200 r.p.m./20min Lavagem a 1200 r.p.m./5min Relavagem a 1200 r.p.m./5min

em seguida, a avaliação a ser feita usando: coloração Diff-Quik para avaliação da morfologia Avaliação da motilidade para graus A e B Concentração (mil/ml) 24 H meia-vida 48 H meia-vida Teste HBA Contaminação bacteriana

A coloração de Papanicolaou (hematoxilina, laranja G6 e EA50) dá uma clara diferença entre os constituintes celulares basofílicos e acidófilos e, assim, permite um exame detalhado do padrão da cromatina, o que é útil na avaliação da morfologia espermática e na avaliação da presença de espermatozóides imaturos. A coloração citoplasmática pode variar entre vermelho e verde dependendo da força iônica, pH e composição do departamento celular e da coloração (OG6 e EA50).

Avaliação morfológica de porções processadas de sêmen. Como o processo de separação tem que minimizar o esperma morfológico anormal.

Outros nomes:
  • Formas anormais %

O melhor método de separação garantirá espermatozóides mais progressivos após o processamento.

Classificação usando as escalas A e B pontuadas pelas referências (OMS 2010).

Outros nomes:
  • Motilidade %
contagem de espermatozoides isolados Usando a câmara de Makler para contagem de espermatozoides para cada porção pós-processamento.
Outros nomes:
  • Concentração para saída final

porcentagem de espermatozoides móveis a não móveis.

Exame microscópico de cada amostra após 24 horas de incubação, para avaliar os espermatozoides progressivamente móveis e os não progressivos ou imóveis.

Outros nomes:
  • Motilidade após 24 horas de incubação a 37 Dc.

porcentagem de espermatozoides móveis a não móveis.

Exame microscópico de cada amostra após 48 horas de incubação, para avaliar os espermatozoides progressivamente móveis e os não progressivos ou imóveis.

Outros nomes:
  • Avaliação da motilidade após 48 horas de incubação a 37 Dc.

O Hyaluronic Binding Assay (HBA®) é uma importante ferramenta de diagnóstico para suspeita de infertilidade masculina na análise do sêmen. Em questão de minutos, a lâmina HBA® fornece uma resposta para a proporção de espermatozóides maduros na amostra (a pontuação HBA® %).

Ao usar a lâmina HBA, podemos contar os espermatozóides fisiologicamente ativos em cada amostra e calcular a porcentagem de espermatozóides ativos com referência à contagem pós-processamento do terceiro braço de investigação.

Outros nomes:
  • Avaliação da atividade fisiológica do esperma Ligação do HA
Cultura bacteriana de rotina usando placas de cultura Blood Agar para amostras finalmente lavadas de 10 mícrons, para confirmar a presença de qualquer contaminação bacteriana causada por transferência durante o processamento.
Outros nomes:
  • Presença de contaminação bacteriana de amostras pós-processamento
Nadando para baixo Processamento

Porção de sêmen processada usando swim down (100%) 30 min em temperatura ambiente processamento para swim down Lavagem a 1200 r.p.m./5min Relavagem a 1200 r.p.m./5min

em seguida, a avaliação a ser feita usando: coloração Diff-Quik para avaliação da morfologia Avaliação da motilidade para graus A e B Concentração (mil/ml) 24 H meia-vida 48 H meia-vida Teste HBA Contaminação bacteriana

A coloração de Papanicolaou (hematoxilina, laranja G6 e EA50) dá uma clara diferença entre os constituintes celulares basofílicos e acidófilos e, assim, permite um exame detalhado do padrão da cromatina, o que é útil na avaliação da morfologia espermática e na avaliação da presença de espermatozóides imaturos. A coloração citoplasmática pode variar entre vermelho e verde dependendo da força iônica, pH e composição do departamento celular e da coloração (OG6 e EA50).

Avaliação morfológica de porções processadas de sêmen. Como o processo de separação tem que minimizar o esperma morfológico anormal.

Outros nomes:
  • Formas anormais %

O melhor método de separação garantirá espermatozóides mais progressivos após o processamento.

Classificação usando as escalas A e B pontuadas pelas referências (OMS 2010).

Outros nomes:
  • Motilidade %
contagem de espermatozoides isolados Usando a câmara de Makler para contagem de espermatozoides para cada porção pós-processamento.
Outros nomes:
  • Concentração para saída final

porcentagem de espermatozoides móveis a não móveis.

Exame microscópico de cada amostra após 24 horas de incubação, para avaliar os espermatozoides progressivamente móveis e os não progressivos ou imóveis.

Outros nomes:
  • Motilidade após 24 horas de incubação a 37 Dc.

porcentagem de espermatozoides móveis a não móveis.

Exame microscópico de cada amostra após 48 horas de incubação, para avaliar os espermatozoides progressivamente móveis e os não progressivos ou imóveis.

Outros nomes:
  • Avaliação da motilidade após 48 horas de incubação a 37 Dc.

O Hyaluronic Binding Assay (HBA®) é uma importante ferramenta de diagnóstico para suspeita de infertilidade masculina na análise do sêmen. Em questão de minutos, a lâmina HBA® fornece uma resposta para a proporção de espermatozóides maduros na amostra (a pontuação HBA® %).

Ao usar a lâmina HBA, podemos contar os espermatozóides fisiologicamente ativos em cada amostra e calcular a porcentagem de espermatozóides ativos com referência à contagem pós-processamento do terceiro braço de investigação.

Outros nomes:
  • Avaliação da atividade fisiológica do esperma Ligação do HA
Cultura bacteriana de rotina usando placas de cultura Blood Agar para amostras finalmente lavadas de 10 mícrons, para confirmar a presença de qualquer contaminação bacteriana causada por transferência durante o processamento.
Outros nomes:
  • Presença de contaminação bacteriana de amostras pós-processamento

O que o estudo está medindo?

Medidas de resultados primários

Medida de resultado
Descrição da medida
Prazo
HBA
Prazo: 1 dia
A afinidade é medida de acordo com a porcentagem de esperma imóvel produzido a partir de 10 µl de amostra processada.
1 dia
Formas anormais
Prazo: 1 dia
Porcentagem de espermatozóides normalmente corados após o processamento
1 dia

Medidas de resultados secundários

Medida de resultado
Descrição da medida
Prazo
Concentração final
Prazo: 1 dia
A concentração foi a flutuação de acordo com a motilidade e concentração originais, DG
1 dia
Motilidade 24 horas
Prazo: 1 dia
Avaliação de motilidade após incubação de 37,0 Dc
1 dia
Motilidade de 48 horas
Prazo: 2 dias
Avaliação de motilidade após incubação de 37,0 Dc
2 dias

Outras medidas de resultado

Medida de resultado
Descrição da medida
Prazo
Contaminação bacteriana
Prazo: 2 dias
cultura bacteriana para 5 mícrons de amostras processadas para garantir a ausência de células bacterianas.
2 dias

Colaboradores e Investigadores

É aqui que você encontrará pessoas e organizações envolvidas com este estudo.

Investigadores

  • Diretor de estudo: Ahmad M Metwalley, Adliyah

Publicações e links úteis

A pessoa responsável por inserir informações sobre o estudo fornece voluntariamente essas publicações. Estes podem ser sobre qualquer coisa relacionada ao estudo.

Datas de registro do estudo

Essas datas acompanham o progresso do registro do estudo e os envios de resumo dos resultados para ClinicalTrials.gov. Os registros do estudo e os resultados relatados são revisados ​​pela National Library of Medicine (NLM) para garantir que atendam aos padrões específicos de controle de qualidade antes de serem publicados no site público.

Datas Principais do Estudo

Início do estudo

1 de maio de 2007

Conclusão Primária (Real)

1 de setembro de 2007

Conclusão do estudo (Real)

1 de setembro de 2007

Datas de inscrição no estudo

Enviado pela primeira vez

28 de dezembro de 2014

Enviado pela primeira vez que atendeu aos critérios de CQ

30 de dezembro de 2014

Primeira postagem (Estimativa)

1 de janeiro de 2015

Atualizações de registro de estudo

Última Atualização Postada (Estimativa)

1 de janeiro de 2015

Última atualização enviada que atendeu aos critérios de controle de qualidade

30 de dezembro de 2014

Última verificação

1 de dezembro de 2014

Mais Informações

Termos relacionados a este estudo

Essas informações foram obtidas diretamente do site clinicaltrials.gov sem nenhuma alteração. Se você tiver alguma solicitação para alterar, remover ou atualizar os detalhes do seu estudo, entre em contato com register@clinicaltrials.gov. Assim que uma alteração for implementada em clinicaltrials.gov, ela também será atualizada automaticamente em nosso site .

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