Estudio de evaluación entre gradiente de densidad y natación hacia abajo para el procesamiento de semen
Descripción general del estudio
Estado
Condiciones
Intervención / Tratamiento
Descripción detallada
El procesamiento de semen que se utilizará para diferentes procedimientos de ART es un paso esencial para aislar los espermatozoides muertos, así como aquellos con una estructura o morfología anormal. La preparación del semen se mantendrá para eliminar los fluidos seminales y las células presentes y células de pus de contaminación o células bacterianas.
Entre los diferentes protocolos, Density Gradient y swim-up son los más comunes. Para motilidad deficiente y número de muestras, se indica el Gradiente de Densidad. Mientras que la evaluación final para los procedimientos de procesamiento de forma de esperma producido o separado aún no se evaluó.
La preparación para el estudio de evaluación para comparar la salida del principal protocolo utilizado Density Gradient (DG) con otro protocolo como nadar hacia abajo utilizando diferentes criterios de estudio puede hacer una evaluación más clara para mejores procedimientos de procesamiento.
Los casos organizados para la evaluación fueron muestras de semen que se encuentran dentro de los valores normales de la OMS de 2010 para la motilidad y el recuento supera los 5 millones/ml. Todas las muestras se dividirán en dos porciones para su procesamiento mediante las dos técnicas de preparación.
Se debe realizar una evaluación posterior a la preparación para las dos salidas usando: monitoreo de la motilidad durante 48 horas a 37,0 Dc, formas anormales, pruebas de afinidad con hialuronano y crecimiento bacteriano contaminante.
En este estudio, mostraremos el efecto negativo de la interfaz de estrés físico y temporal aplicada a los espermatozoides durante el procesamiento, y compararemos los resultados de salida con los resultados producidos a partir de espermatozoides procesados sin interfaz de centrifugación o más tiempo de procesamiento. Como el esperma se separará por su movimiento natural y comportamiento normal.
La evaluación será en tres categorías:
- La calidad del resultado final: como espermatozoides altamente progresivos netos y su número de conteo (morfología, conteo y motilidad de los espermatozoides): como nuestros resultados mostraron más espermatozoides fonológicamente normales recuperados del método SD con mayor conteo y más porcentaje de espermatozoides progresivamente móviles.
La calidad de los espermatozoides producidos: mediante el seguimiento de pruebas de vitalidad espermática o poder de motilidad espermática entre 2 días a 37,0 Ds. La motilidad se evaluará a las 24 y 48 horas. Ambas lecturas mostraron una mayor disminución en la motilidad y vitalidad de los espermatozoides con el consumo de tiempo con porciones procesadas utilizando gradiente de densidad. Mientras que las porciones procesadas con SD mostraron lecturas significativamente mejores.
Otra actividad funcional del procesamiento posterior de espermatozoides es el uso de portaobjetos de prueba HBA, ya que evaluamos la afinidad de los espermatozoides con el hialuronano. Estas pruebas o ensayos indican que la actividad fisiológica de los espermatozoides aún se mantiene. Si bien mostró HBA resultados significativos más altos con el estudio de grupo nadando hacia abajo.
- Evaluación final, que se utiliza para presentar la calidad de la separación: se monitorea utilizando la contaminación y el efecto de arrastre durante la manipulación y el procesamiento del semen. Contaminación bacteriana utilizando medios de cultivo de rutina (agar sangre) para evaluar 5 micras de cada porción en busca de presencia o ausencia de células bacterianas o durante el procesamiento y la manipulación.
Tipo de estudio
Inscripción (Actual)
Contactos y Ubicaciones
Criterios de participación
Criterio de elegibilidad
Edades elegibles para estudiar
Acepta Voluntarios Saludables
Géneros elegibles para el estudio
Método de muestreo
Población de estudio
Descripción
Criterios de inclusión:
- Semen con motilidad superior al 10 % según standers OMS 2010
- Semen con recuento de espermatozoides superior a 5 mil/ml según estándares de la OMS de 2010
Criterio de exclusión:
- Volumen de semen inferior a 1,0 ml
- Semen con tiempo de licuefacción superior a 60 min
Plan de estudios
¿Cómo está diseñado el estudio?
Detalles de diseño
- Modelos observacionales: Control de caso
- Perspectivas temporales: Futuro
Cohortes e Intervenciones
Grupo / Cohorte |
Intervención / Tratamiento |
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Procesamiento de gradiente de densidad
Porción de semen procesada con gradiente de densidad (80/40 %) Centrifugado a 1200 rpm/20 min Lavado a 1200 rpm/5 min Relavado a 1200 rpm/5 min luego se realizará la evaluación usando: Tinción Diff-Quik para evaluación morfológica Evaluación de motilidad para grado A y B Concentración (mil/ml) Vida media de 24 H Vida media de 48 H Prueba HBA Contaminación bacteriana |
La tinción de Papanicolaou (hematoxilina, naranja G6 y EA50) brinda una clara diferencia entre los constituyentes celulares basófilos y acidófilos y, por lo tanto, permite un examen detallado del patrón de cromatina, que es útil en la evaluación de la morfología de los espermatozoides y la evaluación de la presencia de espermatozoides inmaduros. La tinción citoplasmática puede variar entre rojo y verde según la fuerza iónica, el pH y la composición del departamento celular y la tinción (OG6 y EA50). Evaluación morfológica de porciones procesadas de semen. Como proceso de separación se ha de minimizar la anomalía morfológica de los espermatozoides.
Otros nombres:
El mejor método de separación asegurará espermatozoides más progresivos después del procesamiento. Calificación usando la escala A y B puntuada por referencias (WHO 2010).
Otros nombres:
conteo de espermatozoides aislados Uso de la cámara Makler para el conteo de espermatozoides para cada porción posterior al procesamiento.
Otros nombres:
porcentaje de espermatozoides activos móviles a no móviles. Examen microscópico de cada muestra después de 24 horas de incubación, para evaluar los espermatozoides progresivamente móviles y los no progresivos o inmóviles.
Otros nombres:
porcentaje de espermatozoides activos móviles a no móviles. Examen microscópico de cada muestra después de 48 horas de incubación, para evaluar los espermatozoides progresivamente móviles y los no progresivos o inmóviles.
Otros nombres:
El ensayo de unión hialurónica (HBA®) es una herramienta de diagnóstico importante para la sospecha de infertilidad masculina en el análisis de semen. En cuestión de minutos, el portaobjetos HBA® proporciona una respuesta a la proporción de espermatozoides vinculantes maduros en la muestra (la puntuación HBA® %). Al usar el portaobjetos HBA, podemos contar los espermatozoides fisiológicamente activos en cada muestra y calcular el porcentaje de espermatozoides activos con referencia al recuento posterior al procesamiento del tercer brazo de investigación.
Otros nombres:
Cultivo bacteriano de rutina utilizando placas de cultivo de agar sangre para muestras finalmente lavadas de 10 micras, para confirmar la presencia de cualquier contaminación bacteriana causada por el arrastre durante el procesamiento.
Otros nombres:
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Procesamiento nadando hacia abajo
Porción de semen procesada mediante baño (100 %) 30 min a temperatura ambiente procesamiento para baño hacia abajo Lavado a 1200 rpm/5 min Relavado a 1200 rpm/5 min luego se realizará la evaluación usando: Tinción Diff-Quik para evaluación morfológica Evaluación de motilidad para grado A y B Concentración (mil/ml) Vida media de 24 H Vida media de 48 H Prueba HBA Contaminación bacteriana |
La tinción de Papanicolaou (hematoxilina, naranja G6 y EA50) brinda una clara diferencia entre los constituyentes celulares basófilos y acidófilos y, por lo tanto, permite un examen detallado del patrón de cromatina, que es útil en la evaluación de la morfología de los espermatozoides y la evaluación de la presencia de espermatozoides inmaduros. La tinción citoplasmática puede variar entre rojo y verde según la fuerza iónica, el pH y la composición del departamento celular y la tinción (OG6 y EA50). Evaluación morfológica de porciones procesadas de semen. Como proceso de separación se ha de minimizar la anomalía morfológica de los espermatozoides.
Otros nombres:
El mejor método de separación asegurará espermatozoides más progresivos después del procesamiento. Calificación usando la escala A y B puntuada por referencias (WHO 2010).
Otros nombres:
conteo de espermatozoides aislados Uso de la cámara Makler para el conteo de espermatozoides para cada porción posterior al procesamiento.
Otros nombres:
porcentaje de espermatozoides activos móviles a no móviles. Examen microscópico de cada muestra después de 24 horas de incubación, para evaluar los espermatozoides progresivamente móviles y los no progresivos o inmóviles.
Otros nombres:
porcentaje de espermatozoides activos móviles a no móviles. Examen microscópico de cada muestra después de 48 horas de incubación, para evaluar los espermatozoides progresivamente móviles y los no progresivos o inmóviles.
Otros nombres:
El ensayo de unión hialurónica (HBA®) es una herramienta de diagnóstico importante para la sospecha de infertilidad masculina en el análisis de semen. En cuestión de minutos, el portaobjetos HBA® proporciona una respuesta a la proporción de espermatozoides vinculantes maduros en la muestra (la puntuación HBA® %). Al usar el portaobjetos HBA, podemos contar los espermatozoides fisiológicamente activos en cada muestra y calcular el porcentaje de espermatozoides activos con referencia al recuento posterior al procesamiento del tercer brazo de investigación.
Otros nombres:
Cultivo bacteriano de rutina utilizando placas de cultivo de agar sangre para muestras finalmente lavadas de 10 micras, para confirmar la presencia de cualquier contaminación bacteriana causada por el arrastre durante el procesamiento.
Otros nombres:
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¿Qué mide el estudio?
Medidas de resultado primarias
Medida de resultado |
Medida Descripción |
Periodo de tiempo |
|---|---|---|
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HBA
Periodo de tiempo: 1 día
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La afinidad se mide según el porcentaje de espermatozoides no móviles producidos a partir de 10 µL de muestra procesada.
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1 día
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Formas anormales
Periodo de tiempo: 1 día
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Porcentaje de espermatozoides normalmente teñidos después del procesamiento
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1 día
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Medidas de resultado secundarias
Medida de resultado |
Medida Descripción |
Periodo de tiempo |
|---|---|---|
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Concentración final
Periodo de tiempo: 1 día
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La concentración fluctuó según la motilidad y la concentración originales, DG
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1 día
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Movilidad 24 horas
Periodo de tiempo: 1 día
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Evaluación de la motilidad después de 37,0 Dc de incubación
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1 día
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Motilidad de 48 horas
Periodo de tiempo: 2 días
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Evaluación de la motilidad después de 37,0 Dc de incubación
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2 días
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Otras medidas de resultado
Medida de resultado |
Medida Descripción |
Periodo de tiempo |
|---|---|---|
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Contaminación bacteriana
Periodo de tiempo: 2 días
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cultivo bacteriano de 5 micras de muestras procesadas para asegurar la ausencia de células bacterianas.
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2 días
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Colaboradores e Investigadores
Patrocinador
Investigadores
- Director de estudio: Ahmad M Metwalley, Adliyah
Publicaciones y enlaces útiles
Fechas de registro del estudio
Fechas importantes del estudio
Inicio del estudio
Finalización primaria (Actual)
Finalización del estudio (Actual)
Fechas de registro del estudio
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Primero enviado que cumplió con los criterios de control de calidad
Publicado por primera vez (Estimar)
Actualizaciones de registros de estudio
Última actualización publicada (Estimar)
Última actualización enviada que cumplió con los criterios de control de calidad
Última verificación
Más información
Términos relacionados con este estudio
Palabras clave
Términos MeSH relevantes adicionales
Otros números de identificación del estudio
- AlBarakaSD2
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