Arviointitutkimus tiheysgradientin ja alasuinnin välillä siemennesteen käsittelyä varten
Tutkimuksen yleiskatsaus
Tila
Ehdot
Yksityiskohtainen kuvaus
Erilaisiin ART-toimenpiteisiin käytettävä siemennesteen käsittely on olennainen vaihe kuolleiden siittiöiden sekä epänormaalin rakenteellisen tai morfologian eristämiseksi. Siemennesteen valmistelu säilyy poistamaan siemennesteet ja läsnä olevat solut ja kontaminaation mätäsolut tai bakteerisolut.
Eri protokollista Density Gradient ja swim-up ovat yleisimpiä. Huonolle liikkuvuudelle ja näytteen lukumäärälle ilmoitetaan tiheysgradientti. Tuotetun tai erotetun siittiömuodon käsittelymenetelmien lopullista arviointia ei vielä arvioitu.
Valmistelu arviointitutkimukseen, jossa verrataan pääasiallisen protokollan Density Gradient (DG) tuotoksia muihin protokolliin, koska uiminen alaspäin käyttämällä erilaisia tutkimuskriteerejä voi selventää arviointia parempien prosessointimenettelyjen saavuttamiseksi.
Arvioitavaksi järjestetyissä tapauksissa siemennestenäytteet ovat liikkuvuuden osalta WHO 2010 -normien sisällä ja niiden lukumäärä on yli 5 miljoonaa/ml. Kaikki näytteet jaetaan kahteen osaan prosessointia varten kahdella valmistustekniikalla.
Valmistelun jälkeinen arviointi suoritetaan kahdelle ulostulolle käyttäen: Motiliteettiseurantaa 48 tunnin ajan 37,0 Dc:ssä, epänormaalit muodot, hyaluronaaniaffiniteettitestaus ja kontaminoiva bakteerikasvu.
Tässä tutkimuksessa näytämme siittiöille prosessoinnin aikana sovelletun fyysisen ja aikarasituksen rajapinnan haittavaikutuksia ja verrataan ulostulotuloksia ilman sentrifugointirajapintaa tai enemmän käsittelyaikaa käsitellyistä siittiöistä saatuihin tuloksiin. Koska siittiöt erottuvat itsestään luonnollisen liikkeensä ja normaalin käyttäytymisensä avulla.
Arviointi suoritetaan kolmessa kategoriassa:
- Lopputuloksen laatu: erittäin progressiivisina siittiöiden nettomääränä ja niiden lukumääränä (siittiöiden morfologia, määrä ja liikkuvuus): koska tuloksemme osoittivat fonologisesti normaalimpia siittiöitä, jotka on haettu SD-menetelmällä korkeammalla määrällä ja enemmän progressiivisesti liikkuvia siittiöitä.
Tuotetun siittiöiden laatu: tarkkailemalla siittiöiden elinvoimaisuutta tai siittiöiden liikkuvuustehoa 2 päivän aikana 37,0 Ds. Motiliteetti arvioidaan 24 tunnin ja 48 tunnin kuluttua. Molemmat lukemat osoittivat enemmän heikkenemistä siittiöiden liikkuvuudessa ja elinvoimaisuudessa, kun osia käsiteltiin tiheysgradienttia käyttäen. Vaikka SD:llä käsitellyt osat osoittivat huomattavasti parempia lukemia.
Toinen siittiöiden jälkikäsittelyn toiminnallinen aktiivisuus on HBA-testauslasin käyttö, kun arvioimme siittiöiden affiniteettia hyaluronaaniin. Tämä testi tai määritys osoittavat edelleen säilyneen siittiöiden fysiologisen aktiivisuuden. Vaikka se osoitti HBA:n korkeampia merkittäviä tuloksia uimassa alaspäin ryhmätutkimuksessa.
- Loppuarvioinnit, joita käytetään erottelun laadun esittämiseen: seurataan käyttämällä kontaminaatio- ja siirtovaikutusta siemennesteen käsittelyn ja käsittelyn aikana. Bakteerikontaminaatio käyttämällä rutiiniviljelyalustaa (veriagar) 5 mikronin kustakin annoksesta bakteerisolujen esiintymisen ja puuttumisen arvioimiseksi tai käsittelyn ja käsittelyn aikana.
Opintotyyppi
Ilmoittautuminen (Todellinen)
Yhteystiedot ja paikat
Osallistumiskriteerit
Kelpoisuusvaatimukset
Opintokelpoiset iät
Hyväksyy terveitä vapaaehtoisia
Sukupuolet, jotka voivat opiskella
Näytteenottomenetelmä
Tutkimusväestö
Kuvaus
Sisällyttämiskriteerit:
- Siemenneste, jonka liikkuvuus on yli 10 % WHO 2010 -arvioinnin mukaan
- Siemenneste, jonka siittiömäärä on yli 5 milj./ml WHO 2010 -arvioinnin mukaan
Poissulkemiskriteerit:
- Siemennesteen tilavuus alle 1,0 ml
- Siemenneste, jonka nesteytysaika on yli 60 minuuttia
Opintosuunnitelma
Miten tutkimus on suunniteltu?
Suunnittelun yksityiskohdat
- Havaintomallit: Case-Control
- Aikanäkymät: Tulevaisuuden
Kohortit ja interventiot
Ryhmä/Kohortti |
Interventio / Hoito |
|---|---|
|
Tiheysgradienttikäsittely
Siemennesteosa käsitelty käyttäen tiheysgradienttia (80/40 %) Linkous 1200 rpm/20 min Pesu 1200 rpm/5 min Uudelleenpesu 1200 rpm/5 min. sitten arviointi suoritetaan käyttämällä: Diff-Quik-värjäys morfologian arviointia varten Motiliteettiarviointi luokille A ja B Pitoisuus (mil/ml) 24 h puoliintumisaika 48 h puoliintumisaika HBA-testaus Bakteerikontaminaatio |
Papanicolaou-väri (hematoksyliini, oranssi G6 ja EA50) antaa selvän eron basofiilisten ja asidofiilisten solujen aineosien välillä ja mahdollistaa siten kromatiinikuvion yksityiskohtaisen tutkimuksen, mikä on hyödyllistä arvioitaessa siittiöiden morfologiaa ja arvioitaessa epäkypsien siittiöiden läsnäoloa. Sytoplasminen värjäys voi vaihdella punaisen ja vihreän välillä riippuen ionivahvuudesta, pH:sta ja soluosaston ja värjäyksen koostumuksesta (OG6 ja EA50). Siemennesteen käsiteltyjen osien morfologinen arviointi. Erotusprosessin tulee minimoida morfologiset epänormaalit siittiöt.
Muut nimet:
Parempi erotusmenetelmä takaa progressiivisemmat siittiöt käsittelyn jälkeen. Arviointi A- ja B-asteikolla (WHO 2010) -viitteiden mukaan.
Muut nimet:
eristettyjen siittiöiden lukumäärä Makler-kammion avulla kunkin osan siittiöiden lukumäärästä käsittelyn jälkeen.
Muut nimet:
aktiivisten ja liikkumattomien siittiöiden prosenttiosuus. Jokaisen näytteen mikroskooppinen tutkimus 24 tunnin inkubaation jälkeen progressiivisesti liikkuvien siittiöiden ja ei-progressiivisten tai liikkumattomien siittiöiden arvioimiseksi.
Muut nimet:
aktiivisten ja liikkumattomien siittiöiden prosenttiosuus. Jokaisen näytteen mikroskooppinen tutkimus 48 tunnin inkubaation jälkeen progressiivisesti liikkuvien siittiöiden ja ei-progressiivisten tai liikkumattomien siittiöiden arvioimiseksi.
Muut nimet:
Hyaluronic Binding Assay (HBA®) on tärkeä diagnostinen työkalu epäillyn miehen hedelmättömyyden selvittämiseen siemennesteen analysoinnissa. HBA®-levy antaa muutamassa minuutissa vastauksen kypsien sitoutuvien siittiöiden osuuteen näytteessä (HBA®-pistemäärä %). Käyttämällä HBA-lasia voimme laskea fysiologisesti aktiiviset siittiöt kussakin näytteessä ja laskea aktiivisten siittiöiden prosenttiosuuden suhteessa 3. tutkimushaaran käsittelyn jälkeiseen määrään.
Muut nimet:
Rutiininomainen bakteeriviljely käyttämällä Blood Agar -viljelylevyjä 10 mikronin lopuksi pestyille näytteille, jotta voidaan varmistaa käsittelyn aikana tapahtuneen siirron aiheuttaman bakteerikontaminaation olemassaolo.
Muut nimet:
|
|
Uinti alas Käsittely
Siemennesteosa käsitelty uima-altaalla (100 %) 30 min huoneenlämmössä käsittely uimista varten Pesu 1200 rpm/5 min Uudelleenpesu 1200 rpm/5 min. sitten arviointi suoritetaan käyttämällä: Diff-Quik-värjäys morfologian arviointia varten Motiliteettiarviointi luokille A ja B Pitoisuus (mil/ml) 24 h puoliintumisaika 48 h puoliintumisaika HBA-testaus Bakteerikontaminaatio |
Papanicolaou-väri (hematoksyliini, oranssi G6 ja EA50) antaa selvän eron basofiilisten ja asidofiilisten solujen aineosien välillä ja mahdollistaa siten kromatiinikuvion yksityiskohtaisen tutkimuksen, mikä on hyödyllistä arvioitaessa siittiöiden morfologiaa ja arvioitaessa epäkypsien siittiöiden läsnäoloa. Sytoplasminen värjäys voi vaihdella punaisen ja vihreän välillä riippuen ionivahvuudesta, pH:sta ja soluosaston ja värjäyksen koostumuksesta (OG6 ja EA50). Siemennesteen käsiteltyjen osien morfologinen arviointi. Erotusprosessin tulee minimoida morfologiset epänormaalit siittiöt.
Muut nimet:
Parempi erotusmenetelmä takaa progressiivisemmat siittiöt käsittelyn jälkeen. Arviointi A- ja B-asteikolla (WHO 2010) -viitteiden mukaan.
Muut nimet:
eristettyjen siittiöiden lukumäärä Makler-kammion avulla kunkin osan siittiöiden lukumäärästä käsittelyn jälkeen.
Muut nimet:
aktiivisten ja liikkumattomien siittiöiden prosenttiosuus. Jokaisen näytteen mikroskooppinen tutkimus 24 tunnin inkubaation jälkeen progressiivisesti liikkuvien siittiöiden ja ei-progressiivisten tai liikkumattomien siittiöiden arvioimiseksi.
Muut nimet:
aktiivisten ja liikkumattomien siittiöiden prosenttiosuus. Jokaisen näytteen mikroskooppinen tutkimus 48 tunnin inkubaation jälkeen progressiivisesti liikkuvien siittiöiden ja ei-progressiivisten tai liikkumattomien siittiöiden arvioimiseksi.
Muut nimet:
Hyaluronic Binding Assay (HBA®) on tärkeä diagnostinen työkalu epäillyn miehen hedelmättömyyden selvittämiseen siemennesteen analysoinnissa. HBA®-levy antaa muutamassa minuutissa vastauksen kypsien sitoutuvien siittiöiden osuuteen näytteessä (HBA®-pistemäärä %). Käyttämällä HBA-lasia voimme laskea fysiologisesti aktiiviset siittiöt kussakin näytteessä ja laskea aktiivisten siittiöiden prosenttiosuuden suhteessa 3. tutkimushaaran käsittelyn jälkeiseen määrään.
Muut nimet:
Rutiininomainen bakteeriviljely käyttämällä Blood Agar -viljelylevyjä 10 mikronin lopuksi pestyille näytteille, jotta voidaan varmistaa käsittelyn aikana tapahtuneen siirron aiheuttaman bakteerikontaminaation olemassaolo.
Muut nimet:
|
Mitä tutkimuksessa mitataan?
Ensisijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
HBA
Aikaikkuna: 1 päivä
|
Affiniteetti mitataan ei-liikkuvien siittiöiden prosenttiosuuden mukaan, joka on tuotettu 10 ul:sta käsiteltyä näytettä.
|
1 päivä
|
|
Epänormaalit muodot
Aikaikkuna: 1 päivä
|
Normaalisti värjäytyneiden siittiöiden prosenttiosuus käsittelyn jälkeen
|
1 päivä
|
Toissijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Lopullinen keskittyminen
Aikaikkuna: 1 päivä
|
Pitoisuus vaihteli alkuperäisen liikkuvuuden ja konsentraation, DG, mukaan
|
1 päivä
|
|
24 tunnin liikkuvuus
Aikaikkuna: 1 päivä
|
Motiliteettiarviointi 37,0 Dc:n inkubaation jälkeen
|
1 päivä
|
|
48 tunnin liikkuvuus
Aikaikkuna: 2 päivää
|
Motiliteettiarviointi 37,0 Dc:n inkubaation jälkeen
|
2 päivää
|
Muut tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Bakteerikontaminaatio
Aikaikkuna: 2 päivää
|
bakteeriviljelmä 5 mikronin käsitellyille näytteille bakteerisolujen puuttumisen varmistamiseksi.
|
2 päivää
|
Yhteistyökumppanit ja tutkijat
Sponsori
Tutkijat
- Opintojohtaja: Ahmad M Metwalley, Adliyah
Julkaisuja ja hyödyllisiä linkkejä
Opintojen ennätyspäivät
Opi tärkeimmät päivämäärät
Opiskelun aloitus
Ensisijainen valmistuminen (Todellinen)
Opintojen valmistuminen (Todellinen)
Opintoihin ilmoittautumispäivät
Ensimmäinen lähetetty
Ensimmäinen toimitettu, joka täytti QC-kriteerit
Ensimmäinen Lähetetty (Arvio)
Tutkimustietojen päivitykset
Viimeisin päivitys julkaistu (Arvio)
Viimeisin lähetetty päivitys, joka täytti QC-kriteerit
Viimeksi vahvistettu
Lisää tietoa
Tähän tutkimukseen liittyvät termit
Avainsanat
Muita asiaankuuluvia MeSH-ehtoja
Muut tutkimustunnusnumerot
- AlBarakaSD2
Nämä tiedot haettiin suoraan verkkosivustolta clinicaltrials.gov ilman muutoksia. Jos sinulla on pyyntöjä muuttaa, poistaa tai päivittää tutkimustietojasi, ota yhteyttä register@clinicaltrials.gov. Heti kun muutos on otettu käyttöön osoitteessa clinicaltrials.gov, se päivitetään automaattisesti myös verkkosivustollemme .