Evalueringsstudie mellom tetthetsgradient og nedsvømming for sædbehandling
Studieoversikt
Status
Forhold
Intervensjon / Behandling
Detaljert beskrivelse
Sædbehandling som skal brukes til forskjellige ART-prosedyrer er avgjørende trinn for å isolere døde sædceller så vel som de unormalt strukturelle eller morfologiske. Semen forberedelse vil opprettholde for å fjerne sædvæskene og presentere celler og forurensning pus celler eller bakterieceller.
Blant forskjellige protokoller er densitetsgradient og swim-up de vanligste. For dårlig motilitet og antall prøver er tetthetsgradient indikert. Mens endelig evaluering for prosesseringsprosedyrer for produsert eller separert sædform ikke ble evaluert ennå.
Forberedelse for evalueringsstudie for å sammenligne utdata fra hovedprotokollen Density Gradient (DG) med andre protokoller, da svømming ned ved å bruke forskjellige studiekriterier kan gjøre mer tydelig evaluering for bedre behandlingsprosedyrer.
Tilfellene som ble arrangert for evaluering var sædprøver innenfor WHOs 2010 normale verdier for motilitet og teller mer enn 5 millioner/ml. Alle prøver skal deles i to porsjoner for bearbeiding med de to tilberedningsteknikkene.
Evaluering etter forberedelse for de to utgangene ved bruk av: Motilitetsovervåking i 48 timer ved 37,0 DC, unormale former, hyaluronan-affinitetstesting og kontaminerende bakterievekst.
I denne studien vil vi vise ulempeeffekten av fysisk og tidsstressgrensesnitt brukt på sædceller under prosessering, og sammenligne utgangsresultatene med resultatene produsert fra sædceller behandlet uten sentrifugeringsgrensesnitt eller mer behandlingstid. Ettersom sædcellene vil skille seg selv ved sin naturlige bevegelse og normale oppførsel.
Evaluering vil skje i tre kategorier:
- Den endelige utdatakvaliteten: som netto svært progressive sædceller og deres antall (spermmorfologi, antall og bevegelighet): ettersom resultatene våre viste mer fonologisk normal sæd fra SD-metoden med høyere antall og mer prosentandel av progressivt bevegelige sædceller.
Kvaliteten på sperm som produseres: gjennom overvåking av spermvitalitetstesting eller spermmotilitetsstyrke i løpet av 2 dager ved 37,0 Ds. Motilitet vil bli evaluert etter 24 timer og 48 timer. Begge avlesningene viste mer reduksjon i spermmotilitet og vitalitet med tidkrevende med porsjoner behandlet ved bruk av tetthetsgradient. Mens porsjoner behandlet med SD viste betydelig bedre avlesninger.
En annen funksjonell aktivitet ved etterbehandling av sæd er å bruke HBA-testglass, da vi evaluerer sædaffiniteten til hyaluronan. Denne testen eller analysen indikerer den fysiologiske aktiviteten til sædceller som fortsatt opprettholdes. Mens det viste HBA høyere signifikante resultater med svømming ned gruppestudie.
- Sluttevaluering, som brukes til å presentere kvaliteten på separasjonen: overvåkes ved hjelp av forurensnings- og overførselseffekten under sædmanipulasjon og -behandling. Bakteriell kontaminering ved bruk av rutinekulturmedier (blodagar) for å evaluere 5 mikron fra hver porsjon for tilstedeværelse og fravær av bakterieceller eller under prosessering og manipulering.
Studietype
Registrering (Faktiske)
Kontakter og plasseringer
Deltakelseskriterier
Kvalifikasjonskriterier
Alder som er kvalifisert for studier
Tar imot friske frivillige
Kjønn som er kvalifisert for studier
Prøvetakingsmetode
Studiepopulasjon
Beskrivelse
Inklusjonskriterier:
- Sæd med en motilitet på over 10 % i henhold til WHO 2010-standarder
- Sæd med spermateller mer enn 5 mil/ml i henhold til WHO 2010 stands
Ekskluderingskriterier:
- Sædvolum mindre enn 1,0 ml
- Sæd med flytetid mer enn 60 min
Studieplan
Hvordan er studiet utformet?
Designdetaljer
- Observasjonsmodeller: Case-Control
- Tidsperspektiver: Potensielle
Kohorter og intervensjoner
Gruppe / Kohort |
Intervensjon / Behandling |
|---|---|
|
Tetthetsgradientbehandling
Sædporsjon behandlet ved bruk av tetthetsgradient (80/40 %) Sentrifugering på 1200 r.p.m./20 min Vask på 1200 r.p.m./5 min Vask på nytt ved 1200 r.p.m./5 min. deretter evaluering som skal gjøres ved hjelp av: Diff-Quik-farging for morfologievaluering Motilitetsevaluering for grad A og B Konsentrasjon (mil/ml) 24 H halveringstid 48 H halveringstid HBA-testing Bakteriell kontaminering |
Papanicolaou-farging (hematoxylin, oransje G6 og EA50) gir en klar forskjell mellom basofile og acidofile cellebestanddeler og muliggjør derved en detaljert undersøkelse av kromatinmønsteret, noe som er nyttig ved evaluering av spermmorfologi og vurdering av tilstedeværelse av umodne spermatozoer. Cytoplasmatisk farging kan variere mellom rød og grønn avhengig av ionestyrke, pH og sammensetning av celleavdelingen og flekken (OG6 og EA50). Morfologisk vurdering for bearbeidede deler av sæd. Som separasjonsprosessen må minimere morfologisk unormal sperm.
Andre navn:
Den bedre separasjonsmetoden vil sikre mer progressive sædceller etter behandling. Karakterer ved hjelp av A- og B-skalaen skåret etter (WHO 2010) referanser.
Andre navn:
telling av isolerte spermier Bruke Makler-kammer for telling av sperm for hver porsjon etter behandling.
Andre navn:
prosentandel av aktive bevegelige til ikke-bevegelige sædceller. Mikroskopisk undersøkelse for hver prøve etter 24 timers inkubasjon, for å evaluere den progressivt bevegelige spermien og de som ikke er progressive eller ikke-bevegelige.
Andre navn:
prosentandel av aktive bevegelige til ikke-bevegelige sædceller. Mikroskopisk undersøkelse for hver prøve etter 48 timers inkubasjon, for å evaluere den progressivt bevegelige spermien og de som ikke er progressive eller ikke-bevegelige.
Andre navn:
Hyaluronic Binding Assay (HBA®) er et viktig diagnostisk verktøy for mistanke om mannlig infertilitet ved analyse av sæd. I løpet av få minutter gir HBA®-glasset et svar på andelen av modne bindende sædceller i prøven (HBA®-score %). Ved å bruke HBA-slide kan vi telle de fysiologisk aktive sædcellene ved hver prøve og beregne prosentandelen av aktive sædceller med referanse til antall etterbehandling fra 3. undersøkende arm.
Andre navn:
Rutinemessig bakteriekultur ved bruk av blodagarkulturplater for 10 mikron endelig vaskede prøver, for å bekrefte tilstedeværelsen av bakterieforurensning forårsaket av overførsel under behandling.
Andre navn:
|
|
Svømme ned Behandling
Sædporsjon behandlet ved bruk av nedsvømming (100 %) 30 min ved romtemperatur behandling for nedsvømming Vask på 1200 r.p.m./5min Vask på nytt ved 1200 r.p.m./5min deretter evaluering som skal gjøres ved hjelp av: Diff-Quik-farging for morfologievaluering Motilitetsevaluering for grad A og B Konsentrasjon (mil/ml) 24 H halveringstid 48 H halveringstid HBA-testing Bakteriell kontaminering |
Papanicolaou-farging (hematoxylin, oransje G6 og EA50) gir en klar forskjell mellom basofile og acidofile cellebestanddeler og muliggjør derved en detaljert undersøkelse av kromatinmønsteret, noe som er nyttig ved evaluering av spermmorfologi og vurdering av tilstedeværelse av umodne spermatozoer. Cytoplasmatisk farging kan variere mellom rød og grønn avhengig av ionestyrke, pH og sammensetning av celleavdelingen og flekken (OG6 og EA50). Morfologisk vurdering for bearbeidede deler av sæd. Som separasjonsprosessen må minimere morfologisk unormal sperm.
Andre navn:
Den bedre separasjonsmetoden vil sikre mer progressive sædceller etter behandling. Karakterer ved hjelp av A- og B-skalaen skåret etter (WHO 2010) referanser.
Andre navn:
telling av isolerte spermier Bruke Makler-kammer for telling av sperm for hver porsjon etter behandling.
Andre navn:
prosentandel av aktive bevegelige til ikke-bevegelige sædceller. Mikroskopisk undersøkelse for hver prøve etter 24 timers inkubasjon, for å evaluere den progressivt bevegelige spermien og de som ikke er progressive eller ikke-bevegelige.
Andre navn:
prosentandel av aktive bevegelige til ikke-bevegelige sædceller. Mikroskopisk undersøkelse for hver prøve etter 48 timers inkubasjon, for å evaluere den progressivt bevegelige spermien og de som ikke er progressive eller ikke-bevegelige.
Andre navn:
Hyaluronic Binding Assay (HBA®) er et viktig diagnostisk verktøy for mistanke om mannlig infertilitet ved analyse av sæd. I løpet av få minutter gir HBA®-glasset et svar på andelen av modne bindende sædceller i prøven (HBA®-score %). Ved å bruke HBA-slide kan vi telle de fysiologisk aktive sædcellene ved hver prøve og beregne prosentandelen av aktive sædceller med referanse til antall etterbehandling fra 3. undersøkende arm.
Andre navn:
Rutinemessig bakteriekultur ved bruk av blodagarkulturplater for 10 mikron endelig vaskede prøver, for å bekrefte tilstedeværelsen av bakterieforurensning forårsaket av overførsel under behandling.
Andre navn:
|
Hva måler studien?
Primære resultatmål
Resultatmål |
Tiltaksbeskrivelse |
Tidsramme |
|---|---|---|
|
HBA
Tidsramme: 1 dag
|
Affinitet måles i henhold til prosentandelen av ikke-bevegelig sperm produsert fra 10 µL behandlet prøve.
|
1 dag
|
|
Unormale former
Tidsramme: 1 dag
|
Prosentandel normalt fargede sædceller etter behandling
|
1 dag
|
Sekundære resultatmål
Resultatmål |
Tiltaksbeskrivelse |
Tidsramme |
|---|---|---|
|
Sluttkonsentrasjon
Tidsramme: 1 dag
|
Konsentrasjon var fluktuasjon i henhold til opprinnelig motilitet og konsentrasjon, DG
|
1 dag
|
|
24 timers motilitet
Tidsramme: 1 dag
|
Motilitetsevaluering etter 37,0 DC inkubering
|
1 dag
|
|
48 timers motilitet
Tidsramme: 2 dager
|
Motilitetsevaluering etter 37,0 DC inkubering
|
2 dager
|
Andre resultatmål
Resultatmål |
Tiltaksbeskrivelse |
Tidsramme |
|---|---|---|
|
Bakteriell forurensning
Tidsramme: 2 dager
|
bakteriekultur for 5 mikron av behandlede prøver for å sikre fravær av bakterieceller.
|
2 dager
|
Samarbeidspartnere og etterforskere
Sponsor
Etterforskere
- Studieleder: Ahmad M Metwalley, Adliyah
Publikasjoner og nyttige lenker
Studierekorddatoer
Studer hoveddatoer
Studiestart
Primær fullføring (Faktiske)
Studiet fullført (Faktiske)
Datoer for studieregistrering
Først innsendt
Først innsendt som oppfylte QC-kriteriene
Først lagt ut (Anslag)
Oppdateringer av studieposter
Sist oppdatering lagt ut (Anslag)
Siste oppdatering sendt inn som oppfylte QC-kriteriene
Sist bekreftet
Mer informasjon
Begreper knyttet til denne studien
Nøkkelord
Ytterligere relevante MeSH-vilkår
Andre studie-ID-numre
- AlBarakaSD2
Denne informasjonen ble hentet direkte fra nettstedet clinicaltrials.gov uten noen endringer. Hvis du har noen forespørsler om å endre, fjerne eller oppdatere studiedetaljene dine, vennligst kontakt register@clinicaltrials.gov. Så snart en endring er implementert på clinicaltrials.gov, vil denne også bli oppdatert automatisk på nettstedet vårt. .