Badanie oceniające między gradientem gęstości a pływaniem w celu przetwarzania nasienia
Przegląd badań
Status
Warunki
Szczegółowy opis
Przetwarzanie nasienia do wykorzystania w różnych procedurach ART jest niezbędnym krokiem do izolacji martwych plemników, jak również tych o nienormalnej strukturze lub morfologii. Przygotowanie nasienia pozwoli usunąć płyny nasienne i obecne komórki oraz zanieczyszczenia komórkami ropnymi lub komórkami bakteryjnymi.
Wśród różnych protokołów najczęściej spotykane są gradient gęstości i pływanie. W przypadku słabej ruchliwości i liczby próbek wskazany jest Gradient Gęstości. Ostateczna ocena procedur przetwarzania wyprodukowanych lub oddzielonych plemników nie została jeszcze oceniona.
Przygotowanie do badania ewaluacyjnego w celu porównania wyników głównego stosowanego protokołu Gradient gęstości (DG) z innym protokołem, ponieważ pływanie przy użyciu różnych kryteriów badania może zapewnić bardziej przejrzystą ocenę w celu uzyskania lepszych procedur przetwarzania.
Przypadki przeznaczone do oceny, w których próbki nasienia mieściły się w granicach normy WHO 2010 dla ruchliwości i liczby, przekraczały 5 milionów/ml. Wszystkie próbki należy podzielić na dwie części w celu przetworzenia za pomocą dwóch technik przygotowania.
Ocena po przygotowaniu do wykonania dla dwóch wyjść z wykorzystaniem: monitorowania ruchliwości przez 48 godzin przy 37,0 Dc, form nieprawidłowych, badania powinowactwa hialuronianu i wzrostu bakterii zanieczyszczających.
W tym badaniu pokażemy niekorzystny wpływ interfejsu stresu fizycznego i czasowego zastosowanego na plemniki podczas przetwarzania i porównamy wyniki wyjściowe z wynikami otrzymanymi dla plemników przetworzonych bez interfejsu wirowania lub dłuższego czasu przetwarzania. Ponieważ plemniki rozdzielą się dzięki naturalnemu ruchowi i normalnemu zachowaniu.
Ocena odbywać się będzie w trzech kategoriach:
- Końcowa jakość wyjściowa: jako plemniki wysoce progresywne netto i ich liczba (morfologia plemników, liczba i ruchliwość): ponieważ nasze wyniki wykazały bardziej prawidłowe fonologicznie plemniki pobrane metodą SD z większą liczbą i większym odsetkiem plemników progresywnie ruchliwych.
Jakość wytwarzanych plemników: poprzez monitorowanie żywotności plemników lub siły ruchliwości plemników w ciągu 2 dni przy 37,0 Ds. Ruchliwość zostanie oceniona po 24 godzinach i 48 godzinach. Oba odczyty wykazały większy spadek ruchliwości i żywotności plemników wraz z czasochłonnością w przypadku części przetwarzanych przy użyciu gradientu gęstości. Podczas gdy porcje przetworzone przy użyciu SD wykazały znacznie lepsze odczyty.
Inną funkcjonalną czynnością postprocessingu nasienia jest użycie szkiełka testowego HBA, ponieważ oceniamy powinowactwo plemników do hialuronianu. To badanie lub test wskazuje, że aktywność fizjologiczna plemników jest nadal utrzymywana. Podczas gdy HBA wykazało wyższe znaczące wyniki w badaniu grupowym pływania.
- Ocena końcowa, która służy do przedstawienia jakości separacji: jest monitorowana za pomocą kontaminacji i efektu przenoszenia nasienia podczas manipulacji i przetwarzania nasienia. Skażenie bakteryjne przy użyciu rutynowej pożywki hodowlanej (agar z krwią) w celu oceny 5 mikronów z każdej porcji pod kątem obecności i braku jakichkolwiek komórek bakteryjnych lub podczas przetwarzania i manipulacji.
Typ studiów
Zapisy (Rzeczywisty)
Kontakty i lokalizacje
Kryteria uczestnictwa
Kryteria kwalifikacji
Wiek uprawniający do nauki
Akceptuje zdrowych ochotników
Płeć kwalifikująca się do nauki
Metoda próbkowania
Badana populacja
Opis
Kryteria przyjęcia:
- Nasienie o ruchliwości większej niż 10% według standardów WHO 2010
- Nasienie z liczbą plemników powyżej 5 mil/ml według standardów WHO 2010
Kryteria wyłączenia:
- Objętość nasienia mniejsza niż 1,0 ml
- Nasienie o czasie upłynnienia powyżej 60 min
Plan studiów
Jak projektuje się badanie?
Szczegóły projektu
- Modele obserwacyjne: Kontrola przypadków
- Perspektywy czasowe: Spodziewany
Kohorty i interwencje
Grupa / Kohorta |
Interwencja / Leczenie |
|---|---|
|
Przetwarzanie gradientu gęstości
Porcja nasienia przetworzona przy użyciu gradientu gęstości (80/40%) Wirować przy 1200 obr./min./20 min. Prać przy 1200 obr./min./5 min. Ponowne pranie przy 1200 obr./min./5 min. następnie ocena do wykonania przy użyciu: Barwienia Diff-Quik do oceny morfologii Ocena ruchliwości dla stopnia A i B Stężenie (mil/ml) Okres półtrwania 24 H Okres półtrwania 48 H Test HBA Zanieczyszczenie bakteryjne |
Barwnik Papanicolaou (hematoksylina, oranż G6 i EA50) pozwala na wyraźne rozróżnienie składników komórek zasadochłonnych i kwasochłonnych, a tym samym umożliwia szczegółowe badanie wzoru chromatyny, co jest przydatne w ocenie morfologii plemników i ocenie obecności plemników niedojrzałych. Barwienie cytoplazmatyczne może wahać się od czerwonego do zielonego w zależności od siły jonowej, pH i składu działu komórkowego i barwnika (OG6 i EA50). Ocena morfologiczna przetworzonych porcji nasienia. Ponieważ proces separacji musi minimalizować morfologię nieprawidłowych plemników.
Inne nazwy:
Lepsza metoda separacji zapewni bardziej postępowe plemniki po przetworzeniu. Klasyfikacja przy użyciu skali A i B według odniesień (WHO 2010).
Inne nazwy:
liczba wyizolowanych plemników Przy użyciu komory Maklera do zliczania plemników dla każdej porcji po przetworzeniu.
Inne nazwy:
procent aktywnych ruchliwych do nieruchliwych plemników. Badanie mikroskopowe każdej próbki po 24 godzinach inkubacji, w celu oceny plemników o postępowej ruchliwości oraz tych, które nie poruszają się lub są nieruchliwe.
Inne nazwy:
procent aktywnych ruchliwych do nieruchliwych plemników. Badanie mikroskopowe każdej próbki po 48 godzinach inkubacji, w celu oceny plemników o postępowej ruchliwości oraz nieruchliwych lub nieruchliwych.
Inne nazwy:
Test wiązania kwasu hialuronowego (HBA®) jest ważnym narzędziem diagnostycznym w przypadku podejrzenia niepłodności męskiej w analizie nasienia. W ciągu kilku minut szkiełko HBA® daje odpowiedź na proporcję dojrzałych plemników wiążących w próbce (wynik HBA® %). Za pomocą szkiełka HBA możemy policzyć fizjologicznie aktywne plemniki w każdej próbce i obliczyć procent aktywnych plemników w odniesieniu do liczby po przetworzeniu z 3. ramienia badawczego.
Inne nazwy:
Rutynowa hodowla bakteryjna na płytkach hodowlanych z agarem z krwią dla ostatecznie wypłukanych próbek o grubości 10 mikronów, w celu potwierdzenia obecności wszelkich zanieczyszczeń bakteryjnych spowodowanych przeniesieniem podczas przetwarzania.
Inne nazwy:
|
|
Pływanie w dół Przetwarzanie
Porcja nasienia przetwarzana przy użyciu spłynięcia (100 %) 30 min w temperaturze pokojowej obróbka do spłynięcia Płukanie przy 1200 obr./min./5 min. Ponowne mycie przy 1200 obr./min./5 min. następnie ocena do wykonania przy użyciu: Barwienia Diff-Quik do oceny morfologii Ocena ruchliwości dla stopnia A i B Stężenie (mil/ml) Okres półtrwania 24 H Okres półtrwania 48 H Test HBA Zanieczyszczenie bakteryjne |
Barwnik Papanicolaou (hematoksylina, oranż G6 i EA50) pozwala na wyraźne rozróżnienie składników komórek zasadochłonnych i kwasochłonnych, a tym samym umożliwia szczegółowe badanie wzoru chromatyny, co jest przydatne w ocenie morfologii plemników i ocenie obecności plemników niedojrzałych. Barwienie cytoplazmatyczne może wahać się od czerwonego do zielonego w zależności od siły jonowej, pH i składu działu komórkowego i barwnika (OG6 i EA50). Ocena morfologiczna przetworzonych porcji nasienia. Ponieważ proces separacji musi minimalizować morfologię nieprawidłowych plemników.
Inne nazwy:
Lepsza metoda separacji zapewni bardziej postępowe plemniki po przetworzeniu. Klasyfikacja przy użyciu skali A i B według odniesień (WHO 2010).
Inne nazwy:
liczba wyizolowanych plemników Przy użyciu komory Maklera do zliczania plemników dla każdej porcji po przetworzeniu.
Inne nazwy:
procent aktywnych ruchliwych do nieruchliwych plemników. Badanie mikroskopowe każdej próbki po 24 godzinach inkubacji, w celu oceny plemników o postępowej ruchliwości oraz tych, które nie poruszają się lub są nieruchliwe.
Inne nazwy:
procent aktywnych ruchliwych do nieruchliwych plemników. Badanie mikroskopowe każdej próbki po 48 godzinach inkubacji, w celu oceny plemników o postępowej ruchliwości oraz nieruchliwych lub nieruchliwych.
Inne nazwy:
Test wiązania kwasu hialuronowego (HBA®) jest ważnym narzędziem diagnostycznym w przypadku podejrzenia niepłodności męskiej w analizie nasienia. W ciągu kilku minut szkiełko HBA® daje odpowiedź na proporcję dojrzałych plemników wiążących w próbce (wynik HBA® %). Za pomocą szkiełka HBA możemy policzyć fizjologicznie aktywne plemniki w każdej próbce i obliczyć procent aktywnych plemników w odniesieniu do liczby po przetworzeniu z 3. ramienia badawczego.
Inne nazwy:
Rutynowa hodowla bakteryjna na płytkach hodowlanych z agarem z krwią dla ostatecznie wypłukanych próbek o grubości 10 mikronów, w celu potwierdzenia obecności wszelkich zanieczyszczeń bakteryjnych spowodowanych przeniesieniem podczas przetwarzania.
Inne nazwy:
|
Co mierzy badanie?
Podstawowe miary wyniku
Miara wyniku |
Opis środka |
Ramy czasowe |
|---|---|---|
|
HBA
Ramy czasowe: 1 dzień
|
Powinowactwo jest mierzone na podstawie procentu nieruchliwych plemników wytworzonych z 10 µl przetworzonej próbki.
|
1 dzień
|
|
Nienormalne formy
Ramy czasowe: 1 dzień
|
Odsetek normalnie wybarwionych plemników po przetworzeniu
|
1 dzień
|
Miary wyników drugorzędnych
Miara wyniku |
Opis środka |
Ramy czasowe |
|---|---|---|
|
Stężenie końcowe
Ramy czasowe: 1 dzień
|
Stężenie wahało się zgodnie z pierwotną ruchliwością i stężeniem, DG
|
1 dzień
|
|
24-godzinna ruchliwość
Ramy czasowe: 1 dzień
|
Ocena ruchliwości po inkubacji 37,0 Dc
|
1 dzień
|
|
48-godzinna ruchliwość
Ramy czasowe: 2 dni
|
Ocena ruchliwości po inkubacji 37,0 Dc
|
2 dni
|
Inne miary wyników
Miara wyniku |
Opis środka |
Ramy czasowe |
|---|---|---|
|
Zanieczyszczenie bakteryjne
Ramy czasowe: 2 dni
|
hodowla bakteryjna dla 5 mikronów przetworzonych próbek, aby upewnić się, że nie ma komórek bakteryjnych.
|
2 dni
|
Współpracownicy i badacze
Sponsor
Śledczy
- Dyrektor Studium: Ahmad M Metwalley, Adliyah
Publikacje i pomocne linki
Daty zapisu na studia
Główne daty studiów
Rozpoczęcie studiów
Zakończenie podstawowe (Rzeczywisty)
Ukończenie studiów (Rzeczywisty)
Daty rejestracji na studia
Pierwszy przesłany
Pierwszy przesłany, który spełnia kryteria kontroli jakości
Pierwszy wysłany (Oszacować)
Aktualizacje rekordów badań
Ostatnia wysłana aktualizacja (Oszacować)
Ostatnia przesłana aktualizacja, która spełniała kryteria kontroli jakości
Ostatnia weryfikacja
Więcej informacji
Terminy związane z tym badaniem
Słowa kluczowe
Dodatkowe istotne warunki MeSH
Inne numery identyfikacyjne badania
- AlBarakaSD2
Te informacje zostały pobrane bezpośrednio ze strony internetowej clinicaltrials.gov bez żadnych zmian. Jeśli chcesz zmienić, usunąć lub zaktualizować dane swojego badania, skontaktuj się z register@clinicaltrials.gov. Gdy tylko zmiana zostanie wprowadzona na stronie clinicaltrials.gov, zostanie ona automatycznie zaktualizowana również na naszej stronie internetowej .