Оценочное исследование между градиентом плотности и плаванием для обработки спермы
Обзор исследования
Статус
Условия
Вмешательство/лечение
Подробное описание
Обработка спермы, которая будет использоваться для различных процедур ВРТ, является важным шагом для выделения мертвых сперматозоидов, а также сперматозоидов с аномальной структурой или морфологией. Подготовка спермы будет поддерживаться для удаления семенной жидкости и присутствующих клеток, а также клеток загрязнения гнойных или бактериальных клеток.
Среди различных протоколов наиболее распространены градиент плотности и плавание. Для плохой подвижности и количества образцов указывается градиент плотности. В то время как окончательная оценка процедур обработки полученной или отделенной формы спермы еще не проводилась.
Подготовка к оценочному исследованию для сравнения результатов основного используемого протокола Gradient Density (DG) с другим протоколом, поскольку плавание с использованием различных критериев исследования может сделать более четкую оценку для улучшения процедур обработки.
Для оценки были организованы случаи, когда образцы спермы соответствовали нормальным значениям подвижности ВОЗ 2010 г. и превышали 5 миллионов/мл. Все образцы должны быть разделены на две части для обработки двумя методами подготовки.
Оценка после подготовки должна быть выполнена для двух результатов с использованием: Мониторинга подвижности в течение 48 часов при 37,0 Dc, аномальных форм, тестирования сродства к гиалуроновой кислоте и роста контаминирующих бактерий.
В этом исследовании мы продемонстрируем отрицательное влияние интерфейса физического и временного стресса, применяемого к сперме во время обработки, и сравним выходные результаты с результатами, полученными для спермы, обработанной без интерфейса центрифугирования или с большим временем обработки. Поскольку сперматозоиды отделятся сами по себе благодаря своему естественному движению и нормальному поведению.
Оценка будет проходить по трем номинациям:
- Окончательное качество вывода: как чистые высокоподвижные сперматозоиды и их количество (морфология сперматозоидов, количество и подвижность): поскольку наши результаты показали больше фонологически нормальных сперматозоидов, полученных методом SD, с более высоким количеством и большим процентом прогрессивно подвижных сперматозоидов.
Качество полученной спермы: путем мониторинга жизнеспособности сперматозоидов или силы подвижности сперматозоидов в течение 2 дней при 37,0 Ds. Подвижность будет оцениваться через 24 часа и 48 часов. Оба показания показали большее снижение подвижности и жизнеспособности сперматозоидов с увеличением времени обработки порций с использованием градиента плотности. В то время как порции, обработанные с использованием SD, показали значительно лучшие показания.
Другой функциональной активностью постобработки спермы является использование предметного стекла для тестирования HBA, поскольку мы оцениваем сродство сперматозоидов к гиалуроновой кислоте. Это тестирование или анализ показывают, что физиологическая активность сперматозоидов все еще сохраняется. В то время как он показал более высокие значимые результаты HBA при групповом исследовании плавания.
- Окончательная оценка, которая используется для представления качества разделения: отслеживается с помощью контаминации и эффекта переноса во время манипуляций со спермой и ее обработки. Бактериальное заражение с использованием обычной питательной среды (кровяной агар) для оценки 5 микрон от каждой порции на наличие и отсутствие каких-либо бактериальных клеток или во время обработки и манипуляций.
Тип исследования
Регистрация (Действительный)
Контакты и местонахождение
Критерии участия
Критерии приемлемости
Возраст, подходящий для обучения
Принимает здоровых добровольцев
Полы, имеющие право на обучение
Метод выборки
Исследуемая популяция
Описание
Критерии включения:
- Сперма с подвижностью более 10 % по стандартам ВОЗ 2010 г.
- Сперма с количеством сперматозоидов более 5 мил/мл в соответствии со стандартами ВОЗ 2010 г.
Критерий исключения:
- Объем спермы менее 1,0 мл
- Сперма со временем разжижения более 60 мин.
Учебный план
Как устроено исследование?
Детали дизайна
- Наблюдательные модели: Кейс-контроль
- Временные перспективы: Перспективный
Когорты и вмешательства
Группа / когорта |
Вмешательство/лечение |
|---|---|
|
Обработка градиента плотности
Порция спермы, обработанная с использованием градиента плотности (80/40 %), Отжим при 1200 об/мин/20 мин Промывка при 1200 об/мин/5 мин Повторная промывка при 1200 об/мин/5 мин затем следует провести оценку с использованием: окрашивания Diff-Quik для оценки морфологии; оценки подвижности для степени A и B; концентрации (мл/мл); период полувыведения 24 ч; период полувыведения 48 ч; |
Окрашивание по Папаниколау (гематоксилин, оранжевый G6 и EA50) дает четкое различие между базофильными и ацидофильными составляющими клеток и, таким образом, позволяет детально изучить структуру хроматина, что полезно при оценке морфологии сперматозоидов и оценке присутствия незрелых сперматозоидов. Цитоплазматическое окрашивание может варьироваться от красного до зеленого в зависимости от ионной силы, pH и состава клеточного отдела и красителя (OG6 и EA50). Морфологическая оценка обработанных порций спермы. Поскольку процесс разделения должен свести к минимуму морфологически аномальные сперматозоиды.
Другие имена:
Лучший метод разделения обеспечит более прогрессивные сперматозоиды после обработки. Оценка с использованием шкалы A и B по ссылкам (WHO 2010).
Другие имена:
подсчет изолированных сперматозоидов Использование камеры Маклера для подсчета сперматозоидов для постобработки каждой порции.
Другие имена:
процент активных подвижных сперматозоидов к неподвижным. Микроскопическое исследование каждого образца после 24-часовой инкубации для оценки прогрессивно подвижных сперматозоидов, а также непрогрессивных или неподвижных сперматозоидов.
Другие имена:
процент активных подвижных сперматозоидов к неподвижным. Микроскопическое исследование каждого образца после 48 часов инкубации для оценки прогрессивно подвижных сперматозоидов, а также непрогрессивных или неподвижных.
Другие имена:
Анализ гиалуронового связывания (HBA®) является важным диагностическим инструментом при подозрении на мужское бесплодие при анализе спермы. За считанные минуты слайд HBA® дает ответ на долю зрелых связывающих сперматозоидов в образце (показатель HBA® %). Используя слайд HBA, мы можем подсчитать физиологически активные сперматозоиды в каждом образце и рассчитать процент активных сперматозоидов со ссылкой на подсчет постобработки из 3-й исследовательской группы.
Другие имена:
Обычная бактериальная культура с использованием культуральных чашек с кровяным агаром для 10-микронных окончательно промытых образцов, чтобы подтвердить наличие любого бактериального загрязнения, вызванного переносом во время обработки.
Другие имена:
|
|
Плавание вниз Обработка
Порция спермы, обработанная методом плавания (100 %) 30 мин при комнатной температуре обработка для плавания Промывка при 1200 об/мин/5 мин Повторная промывка при 1200 об/мин/5 мин затем следует провести оценку с использованием: окрашивания Diff-Quik для оценки морфологии; оценки подвижности для степени A и B; концентрации (мл/мл); период полувыведения 24 ч; период полувыведения 48 ч; |
Окрашивание по Папаниколау (гематоксилин, оранжевый G6 и EA50) дает четкое различие между базофильными и ацидофильными составляющими клеток и, таким образом, позволяет детально изучить структуру хроматина, что полезно при оценке морфологии сперматозоидов и оценке присутствия незрелых сперматозоидов. Цитоплазматическое окрашивание может варьироваться от красного до зеленого в зависимости от ионной силы, pH и состава клеточного отдела и красителя (OG6 и EA50). Морфологическая оценка обработанных порций спермы. Поскольку процесс разделения должен свести к минимуму морфологически аномальные сперматозоиды.
Другие имена:
Лучший метод разделения обеспечит более прогрессивные сперматозоиды после обработки. Оценка с использованием шкалы A и B по ссылкам (WHO 2010).
Другие имена:
подсчет изолированных сперматозоидов Использование камеры Маклера для подсчета сперматозоидов для постобработки каждой порции.
Другие имена:
процент активных подвижных сперматозоидов к неподвижным. Микроскопическое исследование каждого образца после 24-часовой инкубации для оценки прогрессивно подвижных сперматозоидов, а также непрогрессивных или неподвижных сперматозоидов.
Другие имена:
процент активных подвижных сперматозоидов к неподвижным. Микроскопическое исследование каждого образца после 48 часов инкубации для оценки прогрессивно подвижных сперматозоидов, а также непрогрессивных или неподвижных.
Другие имена:
Анализ гиалуронового связывания (HBA®) является важным диагностическим инструментом при подозрении на мужское бесплодие при анализе спермы. За считанные минуты слайд HBA® дает ответ на долю зрелых связывающих сперматозоидов в образце (показатель HBA® %). Используя слайд HBA, мы можем подсчитать физиологически активные сперматозоиды в каждом образце и рассчитать процент активных сперматозоидов со ссылкой на подсчет постобработки из 3-й исследовательской группы.
Другие имена:
Обычная бактериальная культура с использованием культуральных чашек с кровяным агаром для 10-микронных окончательно промытых образцов, чтобы подтвердить наличие любого бактериального загрязнения, вызванного переносом во время обработки.
Другие имена:
|
Что измеряет исследование?
Первичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
HBA
Временное ограничение: 1 день
|
Сродство измеряется в соответствии с процентом неподвижных сперматозоидов, полученных из 10 мкл обработанного образца.
|
1 день
|
|
Аномальные формы
Временное ограничение: 1 день
|
Процент нормально окрашенных сперматозоидов после обработки
|
1 день
|
Вторичные показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
Конечная концентрация
Временное ограничение: 1 день
|
Концентрация колебалась в соответствии с исходной подвижностью и концентрацией, DG
|
1 день
|
|
24-часовая подвижность
Временное ограничение: 1 день
|
Оценка подвижности после инкубации с 37,0 Dc
|
1 день
|
|
48-часовая подвижность
Временное ограничение: 2 дня
|
Оценка подвижности после инкубации с 37,0 Dc
|
2 дня
|
Другие показатели результатов
Мера результата |
Мера Описание |
Временное ограничение |
|---|---|---|
|
Бактериальное загрязнение
Временное ограничение: 2 дня
|
бактериальная культура для 5 микрон обработанных образцов, чтобы гарантировать отсутствие бактериальных клеток.
|
2 дня
|
Соавторы и исследователи
Спонсор
Следователи
- Директор по исследованиям: Ahmad M Metwalley, Adliyah
Публикации и полезные ссылки
Даты записи исследования
Изучение основных дат
Начало исследования
Первичное завершение (Действительный)
Завершение исследования (Действительный)
Даты регистрации исследования
Первый отправленный
Впервые представлено, что соответствует критериям контроля качества
Первый опубликованный (Оценивать)
Обновления учебных записей
Последнее опубликованное обновление (Оценивать)
Последнее отправленное обновление, отвечающее критериям контроля качества
Последняя проверка
Дополнительная информация
Термины, связанные с этим исследованием
Ключевые слова
Дополнительные соответствующие термины MeSH
Другие идентификационные номера исследования
- AlBarakaSD2
Эта информация была получена непосредственно с веб-сайта clinicaltrials.gov без каких-либо изменений. Если у вас есть запросы на изменение, удаление или обновление сведений об исследовании, обращайтесь по адресу register@clinicaltrials.gov. Как только изменение будет реализовано на clinicaltrials.gov, оно будет автоматически обновлено и на нашем веб-сайте. .