Bewertungsstudie zwischen Dichtegradient und Herunterschwimmen für die Samenverarbeitung
Studienübersicht
Status
Bedingungen
Detaillierte Beschreibung
Die Samenverarbeitung, die für verschiedene ART-Verfahren verwendet werden soll, ist ein wesentlicher Schritt, um tote Spermien sowie solche mit abnormaler Struktur oder Morphologie zu isolieren. Die Samenvorbereitung wird beibehalten, um die Samenflüssigkeiten und vorhandenen Zellen und die Kontamination mit Eiterzellen oder Bakterienzellen zu entfernen.
Unter den verschiedenen Protokollen sind Dichtegradient und Swim-up am häufigsten. Bei schlechter Beweglichkeit und Probenanzahl wird der Dichtegradient angezeigt. Während die endgültige Bewertung für die Verarbeitungsverfahren der produzierten oder getrennten Spermienform noch nicht bewertet wurde.
Die Vorbereitung für die Bewertungsstudie zum Vergleich der Ausgabe des hauptsächlich verwendeten Protokolls Dichtegradient (DG) mit anderen Protokollen, da das Herunterschwimmen unter Verwendung unterschiedlicher Studienkriterien eine klarere Bewertung für bessere Verarbeitungsverfahren ermöglichen kann.
Die Fälle, die zur Bewertung angeordnet wurden, waren Samenproben, die innerhalb der WHO-2010-Normalwerte für Beweglichkeit und Anzahl von mehr als 5 Millionen/ml liegen. Alle Proben werden zur Verarbeitung durch die beiden Präparationstechniken in zwei Portionen geteilt.
Bewertung nach der Präparation für die beiden Ausgänge unter Verwendung von: Motilitätsüberwachung für 48 Stunden bei 37,0 Dc, anormale Formen, Hyaluronan-Affinitätstest und kontaminierendes Bakterienwachstum.
In dieser Studie werden wir die nachteiligen Auswirkungen der physikalischen und zeitlichen Belastungsschnittstelle zeigen, die während der Verarbeitung auf Spermien angewendet wird, und die Ausgangsergebnisse mit denen vergleichen, die von Spermien erzeugt wurden, die ohne Zentrifugationsschnittstelle oder mehr Verarbeitungszeit verarbeitet wurden. Da sich das Sperma durch seine natürliche Bewegung und sein normales Verhalten von selbst trennt.
Die Bewertung erfolgt in drei Kategorien:
- Die endgültige Ausgabequalität: als hochprogressive Netto-Spermien und ihre Anzahl (Morphologie, Anzahl und Beweglichkeit der Spermien): Unsere Ergebnisse zeigten mehr phonologisch normale Spermien, die von der SD-Methode mit einer höheren Anzahl und einem höheren Prozentsatz an progressiv beweglichen Spermien gewonnen wurden.
Die Qualität der produzierten Spermien: durch Überwachung der Spermienvitalitätstests oder Spermienmotilitätsleistung innerhalb von 2 Tagen bei 37,0 Ds. Die Beweglichkeit wird nach 24 Stunden und 48 Stunden bewertet. Beide Messwerte zeigten eine stärkere Abnahme der Spermienmotilität und -vitalität bei zeitaufwändigem Zeitaufwand bei Portionen, die unter Verwendung eines Dichtegradienten verarbeitet wurden. Während Portionen, die mit SD verarbeitet wurden, signifikant bessere Messwerte zeigten.
Eine weitere funktionelle Aktivität der Spermiennachbearbeitung ist die Verwendung von HBA-Testobjektträgern, da wir die Spermienaffinität zu Hyaluronan bewerten. Dieser Test oder Assay zeigt die noch erhaltene physiologische Aktivität der Spermien an. Während es HBA signifikantere Ergebnisse mit der Schwimmgruppenstudie zeigte.
- Abschließende Bewertung, die zur Darstellung der Qualität der Trennung dient: wird anhand des Kontaminations- und Verschleppungseffekts während der Samenbehandlung und -verarbeitung überwacht. Bakterielle Kontamination unter Verwendung von Routinekulturmedien (Blutagar), um 5 Mikron von jeder Portion auf Vorhandensein und Fehlen von Bakterienzellen oder während der Verarbeitung und Handhabung zu bewerten.
Studientyp
Einschreibung (Tatsächlich)
Kontakte und Standorte
Teilnahmekriterien
Zulassungskriterien
Studienberechtigtes Alter
Akzeptiert gesunde Freiwillige
Studienberechtigte Geschlechter
Probenahmeverfahren
Studienpopulation
Beschreibung
Einschlusskriterien:
- Samen mit einer Motilität von mehr als 10 % nach WHO-2010-Standern
- Samen mit einer Spermienzahl von mehr als 5 mil/ml gemäß WHO-2010-Standern
Ausschlusskriterien:
- Samenvolumen weniger als 1,0 ml
- Sperma mit einer Verflüssigungszeit von mehr als 60 min
Studienplan
Wie ist die Studie aufgebaut?
Designdetails
- Beobachtungsmodelle: Fallkontrolle
- Zeitperspektiven: Interessent
Kohorten und Interventionen
Gruppe / Kohorte |
Intervention / Behandlung |
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Dichtegradientenverarbeitung
Spermaportion verarbeitet mit Dichtegradient (80/40 %) Schleudern mit 1200 U/min/20 Min. Waschen mit 1200 U/min/5 Min. Nachwaschen mit 1200 U/min/5 Min dann Auswertung mit: Diff-Quik-Färbung für Morphologieauswertung Beweglichkeitsauswertung für Grade A und B Konzentration (mil/ml) 24 h Halbwertszeit 48 h Halbwertszeit HBA-Test Bakterielle Kontamination |
Papanicolaou-Färbung (Hämatoxylin, Orange G6 und EA50) ergibt einen klaren Unterschied zwischen basophilen und acidophilen Zellbestandteilen und ermöglicht dadurch eine detaillierte Untersuchung des Chromatinmusters, was bei der Beurteilung der Spermienmorphologie und der Beurteilung des Vorhandenseins unreifer Spermien nützlich ist. Zytoplasmatische Färbung kann je nach Ionenstärke, pH-Wert und Zusammensetzung der Zellabteilung und der Färbung (OG6 und EA50) zwischen rot und grün variieren. Morphologische Beurteilung für verarbeitete Samenportionen. Als Trennverfahren muss die morphologische Abnormität der Spermien minimiert werden.
Andere Namen:
Die bessere Trennmethode stellt nach der Verarbeitung progressivere Spermien sicher. Benotung anhand der A- und B-Skala, bewertet nach (WHO 2010) Referenzen.
Andere Namen:
Zählung der isolierten Spermien Verwendung der Makler-Kammer zur Zählung der Spermien für jede Portion Nachbearbeitung.
Andere Namen:
Prozentsatz von aktiven beweglichen zu nicht beweglichen Spermien. Mikroskopische Untersuchung für jede Probe nach 24 Stunden Inkubation, um die progressiv beweglichen Spermien und die nicht progressiven oder nicht beweglichen Spermien zu bewerten.
Andere Namen:
Prozentsatz von aktiven beweglichen zu nicht beweglichen Spermien. Mikroskopische Untersuchung für jede Probe nach 48 Stunden Inkubation, um die progressiv beweglichen Spermien und die nicht progressiven oder nicht beweglichen Spermien zu bewerten.
Andere Namen:
Der Hyaluronic Binding Assay (HBA®) ist ein wichtiges diagnostisches Instrument bei Verdacht auf männliche Unfruchtbarkeit bei der Analyse von Sperma. Innerhalb weniger Minuten liefert der HBA®-Objektträger eine Antwort auf den Anteil reifer bindender Spermien in der Probe (der HBA®-Score %). Durch die Verwendung von HBA-Objektträgern können wir die physiologisch aktiven Spermien bei jeder Probe zählen und den Prozentsatz aktiver Spermien unter Bezugnahme auf die Zählung nach der Verarbeitung aus dem 3. Untersuchungsarm berechnen.
Andere Namen:
Routinemäßige Bakterienkultur unter Verwendung von Blutagar-Kulturplatten für abschließend gewaschene 10-Mikrometer-Proben, um das Vorhandensein von Bakterienkontaminationen zu bestätigen, die durch Verschleppung während der Verarbeitung verursacht wurden.
Andere Namen:
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Herunterschwimmen Verarbeitung
Spermaportion aufbereitet durch Abschwimmen (100 %) 30 min bei Raumtemperatur Verarbeitung für Abschwimmen Waschen mit 1200 U/min/5 min Nachwaschen mit 1200 U/min/5 min dann Auswertung mit: Diff-Quik-Färbung für Morphologieauswertung Beweglichkeitsauswertung für Grade A und B Konzentration (mil/ml) 24 h Halbwertszeit 48 h Halbwertszeit HBA-Test Bakterielle Kontamination |
Papanicolaou-Färbung (Hämatoxylin, Orange G6 und EA50) ergibt einen klaren Unterschied zwischen basophilen und acidophilen Zellbestandteilen und ermöglicht dadurch eine detaillierte Untersuchung des Chromatinmusters, was bei der Beurteilung der Spermienmorphologie und der Beurteilung des Vorhandenseins unreifer Spermien nützlich ist. Zytoplasmatische Färbung kann je nach Ionenstärke, pH-Wert und Zusammensetzung der Zellabteilung und der Färbung (OG6 und EA50) zwischen rot und grün variieren. Morphologische Beurteilung für verarbeitete Samenportionen. Als Trennverfahren muss die morphologische Abnormität der Spermien minimiert werden.
Andere Namen:
Die bessere Trennmethode stellt nach der Verarbeitung progressivere Spermien sicher. Benotung anhand der A- und B-Skala, bewertet nach (WHO 2010) Referenzen.
Andere Namen:
Zählung der isolierten Spermien Verwendung der Makler-Kammer zur Zählung der Spermien für jede Portion Nachbearbeitung.
Andere Namen:
Prozentsatz von aktiven beweglichen zu nicht beweglichen Spermien. Mikroskopische Untersuchung für jede Probe nach 24 Stunden Inkubation, um die progressiv beweglichen Spermien und die nicht progressiven oder nicht beweglichen Spermien zu bewerten.
Andere Namen:
Prozentsatz von aktiven beweglichen zu nicht beweglichen Spermien. Mikroskopische Untersuchung für jede Probe nach 48 Stunden Inkubation, um die progressiv beweglichen Spermien und die nicht progressiven oder nicht beweglichen Spermien zu bewerten.
Andere Namen:
Der Hyaluronic Binding Assay (HBA®) ist ein wichtiges diagnostisches Instrument bei Verdacht auf männliche Unfruchtbarkeit bei der Analyse von Sperma. Innerhalb weniger Minuten liefert der HBA®-Objektträger eine Antwort auf den Anteil reifer bindender Spermien in der Probe (der HBA®-Score %). Durch die Verwendung von HBA-Objektträgern können wir die physiologisch aktiven Spermien bei jeder Probe zählen und den Prozentsatz aktiver Spermien unter Bezugnahme auf die Zählung nach der Verarbeitung aus dem 3. Untersuchungsarm berechnen.
Andere Namen:
Routinemäßige Bakterienkultur unter Verwendung von Blutagar-Kulturplatten für abschließend gewaschene 10-Mikrometer-Proben, um das Vorhandensein von Bakterienkontaminationen zu bestätigen, die durch Verschleppung während der Verarbeitung verursacht wurden.
Andere Namen:
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Was misst die Studie?
Primäre Ergebnismessungen
Ergebnis Maßnahme |
Maßnahmenbeschreibung |
Zeitfenster |
|---|---|---|
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HBA
Zeitfenster: 1 Tag
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Die Affinität wird anhand des Prozentsatzes nicht beweglicher Spermien gemessen, die aus 10 µl der verarbeiteten Probe produziert werden.
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1 Tag
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Abnormale Formen
Zeitfenster: 1 Tag
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Prozentsatz normal gefärbter Spermien nach der Verarbeitung
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1 Tag
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Sekundäre Ergebnismessungen
Ergebnis Maßnahme |
Maßnahmenbeschreibung |
Zeitfenster |
|---|---|---|
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Letzte Konzentration
Zeitfenster: 1 Tag
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Die Konzentration war eine Schwankung gemäß der ursprünglichen Beweglichkeit und Konzentration, DG
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1 Tag
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24 Stunden Beweglichkeit
Zeitfenster: 1 Tag
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Beweglichkeitsbewertung nach 37,0 Dc-Inkubation
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1 Tag
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48 Stunden Beweglichkeit
Zeitfenster: 2 Tage
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Beweglichkeitsbewertung nach 37,0 Dc-Inkubation
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2 Tage
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Andere Ergebnismessungen
Ergebnis Maßnahme |
Maßnahmenbeschreibung |
Zeitfenster |
|---|---|---|
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Bakterielle Kontamination
Zeitfenster: 2 Tage
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Bakterienkultur für 5 Mikron der verarbeiteten Proben, um sicherzustellen, dass keine Bakterienzellen vorhanden sind.
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2 Tage
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Mitarbeiter und Ermittler
Sponsor
Ermittler
- Studienleiter: Ahmad M Metwalley, Adliyah
Publikationen und hilfreiche Links
Allgemeine Veröffentlichungen
Studienaufzeichnungsdaten
Haupttermine studieren
Studienbeginn
Primärer Abschluss (Tatsächlich)
Studienabschluss (Tatsächlich)
Studienanmeldedaten
Zuerst eingereicht
Zuerst eingereicht, das die QC-Kriterien erfüllt hat
Zuerst gepostet (Schätzen)
Studienaufzeichnungsaktualisierungen
Letztes Update gepostet (Schätzen)
Letztes eingereichtes Update, das die QC-Kriterien erfüllt
Zuletzt verifiziert
Mehr Informationen
Begriffe im Zusammenhang mit dieser Studie
Schlüsselwörter
Zusätzliche relevante MeSH-Bedingungen
Andere Studien-ID-Nummern
- AlBarakaSD2
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