Evalueringsundersøgelse mellem tæthedsgradient og nedsvømning til sædbehandling
Studieoversigt
Status
Betingelser
Detaljeret beskrivelse
Sædbehandling, der skal bruges til forskellige ART-procedurer, er et vigtigt skridt for at isolere døde sædceller såvel som de unormalt strukturelle eller morfologiske. Sædpræparation vil opretholde for at fjerne sædvæsken og præsentere celler og kontaminering af pusceller eller bakterieceller.
Blandt forskellige protokoller er tæthedsgradient og swim-up de mest almindelige. Ved dårlig motilitet og antal er prøvedensitetsgradient angivet. Mens den endelige evaluering for producerede eller separerede sædformsbehandlingsprocedurer ikke blev evalueret endnu.
Forberedelse til evalueringsundersøgelse for at sammenligne output fra den primære anvendte protokol Density Gradient (DG) med anden protokol, da svømning ned ved hjælp af forskellige undersøgelseskriterier kan gøre en mere klar evaluering for bedre behandlingsprocedurer.
De tilfælde, der blev arrangeret til evaluering, var sædprøver, der ligger inden for WHO 2010's normale værdier for motilitet og tæller til at være mere end 5 millioner/ml. Alle prøver skal opdeles i to portioner til forarbejdning ved de to forberedelsesteknikker.
Evaluering efter forberedelse skal udføres for de to output ved hjælp af: Motilitetsmonitorering i 48 timer ved 37,0 DC, unormale former, hyaluronan-affinitetstest og kontaminerende bakterievækst.
I denne undersøgelse vil vi vise ulempeeffekten af fysisk og tidsstress-grænseflade anvendt på sædceller under forarbejdning, og sammenligne output-resultaterne med resultater produceret fra sæd behandlet uden centrifugeringsgrænseflade eller mere behandlingstid. Da sæden vil adskille sig selv ved sin naturlige bevægelse og normale adfærd.
Evaluering vil være på tre kategorier:
- Den endelige outputkvalitet: som netto meget progressive sædceller og deres antal (spermmorfologi, antal og motilitet): da vores resultater viste mere fonologisk normal sæd fra SD-metoden med højere antal og mere procentdel af progressivt bevægelige sædceller.
Kvaliteten af sperm produceret: gennem overvågning af spermvitalitetstest eller spermmotilitetsstyrke over 2 dage ved 37,0 Ds. Motiliteten vil blive evalueret efter 24 timer og 48 timer. Begge aflæsninger viste mere fald i spermmotilitet og vitalitet med tidskrævende med portioner behandlet ved hjælp af tæthedsgradient. Mens portioner behandlet med SD viste signifikant bedre aflæsninger.
En anden funktionel aktivitet ved efterbehandling af sæd er at bruge HBA-testglas, da vi evaluerer sædaffiniteten til hyaluronan. Denne test eller assay viser den fysiologiske aktivitet af sæd, der stadig opretholdes. Mens det viste HBA højere signifikante resultater med svømning ned gruppe undersøgelse.
- Slutevaluering, der bruges til at præsentere kvaliteten af separation: overvåges ved hjælp af kontamineringen og overførselseffekten under sædmanipulation og -behandling. Bakteriel kontaminering ved hjælp af rutinedyrkningsmedier (blodagar) til at evaluere 5 mikrometer fra hver portion for tilstedeværelse og fravær af bakterieceller eller under behandling og manipulation.
Undersøgelsestype
Tilmelding (Faktiske)
Kontakter og lokationer
Deltagelseskriterier
Berettigelseskriterier
Aldre berettiget til at studere
Tager imod sunde frivillige
Køn, der er berettiget til at studere
Prøveudtagningsmetode
Studiebefolkning
Beskrivelse
Inklusionskriterier:
- Sæd med en motilitet på mere end 10 % ifølge WHO 2010 standarder
- Sæd med et sædtal på mere end 5 mil/ml ifølge WHO 2010 standarder
Ekskluderingskriterier:
- Sædvolumen mindre end 1,0 ml
- Sæd med likvefaktionstid mere end 60 min
Studieplan
Hvordan er undersøgelsen tilrettelagt?
Design detaljer
- Observationsmodeller: Case-Control
- Tidsperspektiver: Fremadrettet
Kohorter og interventioner
Gruppe / kohorte |
Intervention / Behandling |
|---|---|
|
Densitetsgradientbehandling
Sædportion behandlet ved hjælp af densitetsgradient (80/40 %) Centrifugering ved 1200 r.p.m./20 min. Vask ved 1200 r.p.m./5 min. Genvask ved 1200 r.p.m./5 min. derefter evaluering skal udføres ved hjælp af: Diff-Quik farvning til morfologi evaluering Motilitet Evaluering for grad A og B Koncentration (mil/ml) 24 H halveringstid 48 H halveringstid HBA testning Bakteriel kontaminering |
Papanicolaou-farvning (hæmatoxylin, orange G6 og EA50) giver en klar forskel mellem basofile og acidofile cellebestanddele og muliggør derved en detaljeret undersøgelse af kromatinmønsteret, hvilket er nyttigt i evalueringen af spermmorfologi og vurdering af tilstedeværelsen af umodne spermatozoer. Cytoplasmatisk farvning kan variere mellem rød og grøn afhængig af ionstyrke, pH og sammensætning af celleafdelingen og farven (OG6 og EA50). Morfologisk vurdering for forarbejdede dele af sæd. Som separation proces er nødt til at minimere den morfologiske unormale sædceller.
Andre navne:
Den bedre separationsmetode vil sikre mere progressive sædceller efter behandling. Bedømmelse ved hjælp af A- og B-skalaen, der er scoret efter (WHO 2010) referencer.
Andre navne:
optælling af isolerede sædceller Brug af Makler-kammer til optælling af sæd for hver portion efter behandling.
Andre navne:
procentdelen af aktive bevægelige til ikke-bevægelige sædceller. Mikroskopisk undersøgelse for hver prøve efter 24 timers inkubation for at evaluere de progressivt bevægelige sædceller og de ikke-progressive eller ikke-motile.
Andre navne:
procentdelen af aktive bevægelige til ikke-bevægelige sædceller. Mikroskopisk undersøgelse for hver prøve efter 48 timers inkubation for at evaluere de progressivt bevægelige sædceller og de ikke-progressive eller ikke-motile.
Andre navne:
Hyaluronic Binding Assay (HBA®) er et vigtigt diagnostisk værktøj til mistanke om mandlig infertilitet i analysen af sæd. I løbet af få minutter giver HBA®-glasset et svar på andelen af modne bindende spermatozoer i prøven (HBA®-score %). Ved at bruge HBA-slide kan vi tælle de fysiologisk aktive sædceller ved hver prøve og beregne procentdelen af aktive sædceller med reference til efterbehandlingstal fra 3. undersøgelsesarm.
Andre navne:
Rutinemæssig bakteriekultur ved hjælp af blodagar-kulturplader til 10 mikron endeligt vaskede prøver for at bekræfte tilstedeværelsen af bakteriekontaminering forårsaget af overførsel under behandling.
Andre navne:
|
|
Svømme ned Bearbejdning
Sædportion behandlet ved hjælp af nedsvømning (100 %) 30 min ved stuetemperatur behandling for nedsvømning Vask ved 1200 omdr./min./5 min. Genvask ved 1200 omdr./min. derefter evaluering skal udføres ved hjælp af: Diff-Quik farvning til morfologi evaluering Motilitet Evaluering for grad A og B Koncentration (mil/ml) 24 H halveringstid 48 H halveringstid HBA testning Bakteriel kontaminering |
Papanicolaou-farvning (hæmatoxylin, orange G6 og EA50) giver en klar forskel mellem basofile og acidofile cellebestanddele og muliggør derved en detaljeret undersøgelse af kromatinmønsteret, hvilket er nyttigt i evalueringen af spermmorfologi og vurdering af tilstedeværelsen af umodne spermatozoer. Cytoplasmatisk farvning kan variere mellem rød og grøn afhængig af ionstyrke, pH og sammensætning af celleafdelingen og farven (OG6 og EA50). Morfologisk vurdering for forarbejdede dele af sæd. Som separation proces er nødt til at minimere den morfologiske unormale sædceller.
Andre navne:
Den bedre separationsmetode vil sikre mere progressive sædceller efter behandling. Bedømmelse ved hjælp af A- og B-skalaen, der er scoret efter (WHO 2010) referencer.
Andre navne:
optælling af isolerede sædceller Brug af Makler-kammer til optælling af sæd for hver portion efter behandling.
Andre navne:
procentdelen af aktive bevægelige til ikke-bevægelige sædceller. Mikroskopisk undersøgelse for hver prøve efter 24 timers inkubation for at evaluere de progressivt bevægelige sædceller og de ikke-progressive eller ikke-motile.
Andre navne:
procentdelen af aktive bevægelige til ikke-bevægelige sædceller. Mikroskopisk undersøgelse for hver prøve efter 48 timers inkubation for at evaluere de progressivt bevægelige sædceller og de ikke-progressive eller ikke-motile.
Andre navne:
Hyaluronic Binding Assay (HBA®) er et vigtigt diagnostisk værktøj til mistanke om mandlig infertilitet i analysen af sæd. I løbet af få minutter giver HBA®-glasset et svar på andelen af modne bindende spermatozoer i prøven (HBA®-score %). Ved at bruge HBA-slide kan vi tælle de fysiologisk aktive sædceller ved hver prøve og beregne procentdelen af aktive sædceller med reference til efterbehandlingstal fra 3. undersøgelsesarm.
Andre navne:
Rutinemæssig bakteriekultur ved hjælp af blodagar-kulturplader til 10 mikron endeligt vaskede prøver for at bekræfte tilstedeværelsen af bakteriekontaminering forårsaget af overførsel under behandling.
Andre navne:
|
Hvad måler undersøgelsen?
Primære resultatmål
Resultatmål |
Foranstaltningsbeskrivelse |
Tidsramme |
|---|---|---|
|
HBA
Tidsramme: 1 dag
|
Affinitet måles i henhold til procentdelen af ikke-motil sæd, der er produceret fra 10 µL behandlet prøve.
|
1 dag
|
|
Unormale former
Tidsramme: 1 dag
|
Procentdel normalt farvede sædceller efter behandling
|
1 dag
|
Sekundære resultatmål
Resultatmål |
Foranstaltningsbeskrivelse |
Tidsramme |
|---|---|---|
|
Slutkoncentration
Tidsramme: 1 dag
|
Koncentration var fluktuation i henhold til oprindelig motilitet og koncentration, DG
|
1 dag
|
|
24 timers motilitet
Tidsramme: 1 dag
|
Motilitetsevaluering efter 37,0 Dc inkubation
|
1 dag
|
|
48 timers motilitet
Tidsramme: 2 dage
|
Motilitetsevaluering efter 37,0 Dc inkubation
|
2 dage
|
Andre resultatmål
Resultatmål |
Foranstaltningsbeskrivelse |
Tidsramme |
|---|---|---|
|
Bakteriel forurening
Tidsramme: 2 dage
|
bakteriekultur for 5 mikron af behandlede prøver for at sikre fravær af bakterieceller.
|
2 dage
|
Samarbejdspartnere og efterforskere
Sponsor
Efterforskere
- Studieleder: Ahmad M Metwalley, Adliyah
Publikationer og nyttige links
Datoer for undersøgelser
Studer store datoer
Studiestart
Primær færdiggørelse (Faktiske)
Studieafslutning (Faktiske)
Datoer for studieregistrering
Først indsendt
Først indsendt, der opfyldte QC-kriterier
Først opslået (Skøn)
Opdateringer af undersøgelsesjournaler
Sidste opdatering sendt (Skøn)
Sidste opdatering indsendt, der opfyldte kvalitetskontrolkriterier
Sidst verificeret
Mere information
Begreber relateret til denne undersøgelse
Nøgleord
Yderligere relevante MeSH-vilkår
Andre undersøgelses-id-numre
- AlBarakaSD2
Disse oplysninger blev hentet direkte fra webstedet clinicaltrials.gov uden ændringer. Hvis du har nogen anmodninger om at ændre, fjerne eller opdatere dine undersøgelsesoplysninger, bedes du kontakte register@clinicaltrials.gov. Så snart en ændring er implementeret på clinicaltrials.gov, vil denne også blive opdateret automatisk på vores hjemmeside .