Étude d'évaluation entre gradient de densité et nage vers le bas pour le traitement du sperme
Aperçu de l'étude
Statut
Les conditions
Description détaillée
Le traitement du sperme à utiliser pour différentes procédures ART est une étape essentielle pour isoler les spermatozoïdes morts ainsi que ceux présentant une structure ou une morphologie anormale. La préparation du sperme se maintiendra pour éliminer les liquides séminaux et les cellules présentes et la contamination des cellules de pus ou des cellules bactériennes.
Parmi les différents protocoles, Density Gradient et swim-up sont les plus courants. Pour une motilité et un nombre d'échantillons médiocres, le gradient de densité est indiqué. Alors que l'évaluation finale des procédures de traitement des formes de sperme produit ou séparé n'a pas encore été évaluée.
Préparation de l'étude d'évaluation pour comparer la sortie du principal protocole utilisé Density Gradient (DG) avec un autre protocole, car nager en utilisant différents critères d'étude peut rendre l'évaluation plus claire pour de meilleures procédures de traitement.
Les cas classés pour évaluation étaient des échantillons de sperme se situant dans les valeurs normales 2010 de l'OMS pour la motilité et comptant pour plus de 5 millions/ml. Tous les échantillons doivent être divisés en deux portions pour traitement par les deux techniques de préparation.
Une évaluation post-préparation doit être effectuée pour les deux sorties en utilisant : la surveillance de la motilité pendant 48 heures à 37,0 Dc, les formes anormales, les tests d'affinité à l'hyaluronane et la croissance bactérienne contaminante.
Dans cette étude, nous montrerons l'effet d'inconvénient de l'interface de contrainte physique et temporelle appliquée sur les spermatozoïdes pendant le traitement, et comparerons les résultats de sortie avec ceux produits à partir de spermatozoïdes traités sans interface de centrifugation ou plus de temps de traitement. Comme le sperme se séparera par son mouvement naturel et son comportement normal.
L'évaluation portera sur trois catégories :
- La qualité de sortie finale : en tant que spermatozoïdes nets hautement progressifs et leur nombre (morphologie, nombre et motilité des spermatozoïdes) : nos résultats ont montré plus de spermatozoïdes phonologiquement normaux extraits de la méthode SD avec un nombre plus élevé et un pourcentage plus élevé de spermatozoïdes progressivement mobiles.
La qualité des spermatozoïdes produits : grâce au suivi des tests de vitalité des spermatozoïdes ou de la puissance de motilité des spermatozoïdes sur 2 jours à 37,0 Ds. La motilité sera évaluée après 24 heures et 48 heures. Les deux lectures ont montré une plus grande diminution de la motilité et de la vitalité des spermatozoïdes avec du temps avec des portions traitées à l'aide d'un gradient de densité. Alors que les portions traitées à l'aide de SD ont montré de meilleures lectures significatives.
Une autre activité fonctionnelle du post-traitement du sperme consiste à utiliser une lame de test HBA, car nous évaluons l'affinité du sperme avec l'hyaluronane. Ce test ou test indique l'activité physiologique du sperme toujours maintenue. Bien qu'il ait montré des résultats significatifs plus élevés pour le HBA avec une étude de groupe sur la nage.
- L'évaluation finale, qui sert à présenter la qualité de la séparation : est surveillée à l'aide de la contamination et de l'effet de transfert lors de la manipulation et du traitement du sperme. Contamination bactérienne en utilisant des milieux de culture de routine (gélose au sang) pour évaluer 5 microns de chaque portion pour la présence et l'absence de cellules bactériennes ou pendant le traitement et la manipulation.
Type d'étude
Inscription (Réel)
Contacts et emplacements
Critères de participation
Critère d'éligibilité
Âges éligibles pour étudier
Accepte les volontaires sains
Sexes éligibles pour l'étude
Méthode d'échantillonnage
Population étudiée
La description
Critère d'intégration:
- Sperme avec motilité supérieure à 10 % selon les normes OMS 2010
- Sperme avec un nombre de spermatozoïdes supérieur à 5 mil / ml selon les normes de l'OMS 2010
Critère d'exclusion:
- Volume de sperme inférieur à 1,0 ml
- Sperme avec temps de liquéfaction supérieur à 60 min
Plan d'étude
Comment l'étude est-elle conçue ?
Détails de conception
- Modèles d'observation: Cas-témoins
- Perspectives temporelles: Éventuel
Cohortes et interventions
Groupe / Cohorte |
Intervention / Traitement |
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Traitement du gradient de densité
Portion de sperme traitée à l'aide du gradient de densité (80/40 %) Essorage à 1200 tr/min/20 min Lavage à 1200 tr/min/5 min Relavage à 1200 tr/min/5 min puis évaluation à faire à l'aide de : Coloration Diff-Quik pour l'évaluation de la morphologie Évaluation de la motilité pour les grades A et B Concentration (mil/ml) Demi-vie 24 H Demi-vie 48 H Test HBA Contamination bactérienne |
La coloration de Papanicolaou (hématoxyline, orange G6 et EA50) donne une nette différence entre les constituants cellulaires basophiles et acidophiles et permet ainsi un examen détaillé du schéma de la chromatine, ce qui est utile dans l'évaluation de la morphologie des spermatozoïdes et l'évaluation de la présence de spermatozoïdes immatures. La coloration cytoplasmique peut varier entre le rouge et le vert en fonction de la force ionique, du pH et de la composition du service cellulaire et de la tache (OG6 et EA50). Évaluation morphologique des portions de sperme traitées. Comme le processus de séparation doit minimiser les spermatozoïdes anormaux morphologiques.
Autres noms:
La meilleure méthode de séparation assurera des spermatozoïdes plus progressifs après le traitement. Classement à l'aide des échelles A et B notées par des références (OMS 2010).
Autres noms:
comptage des spermatozoïdes isolés Utilisation de la chambre Makler pour le comptage des spermatozoïdes pour chaque portion post-traitement.
Autres noms:
pourcentage de spermatozoïdes actifs mobiles par rapport aux spermatozoïdes non mobiles. Examen microscopique pour chaque échantillon après 24 heures d'incubation, pour évaluer les spermatozoïdes progressivement mobiles et ceux non progressifs ou non mobiles.
Autres noms:
pourcentage de spermatozoïdes actifs mobiles par rapport aux spermatozoïdes non mobiles. Examen microscopique pour chaque échantillon après 48 heures d'incubation, pour évaluer les spermatozoïdes progressivement mobiles et ceux non progressifs ou non mobiles.
Autres noms:
Le test de liaison hyaluronique (HBA®) est un outil de diagnostic important pour l'infertilité masculine suspectée dans l'analyse du sperme. En quelques minutes, la lame HBA® fournit une réponse à la proportion de spermatozoïdes matures de liaison dans l'échantillon (The HBA® score %). En utilisant la lame HBA, nous pouvons compter les spermatozoïdes physiologiquement actifs à chaque échantillon et calculer le pourcentage de spermatozoïdes actifs en se référant au nombre de post-traitement du 3ème bras d'investigation.
Autres noms:
Culture bactérienne de routine à l'aide de plaques de culture de gélose au sang pour des échantillons finalement lavés de 10 microns, afin de confirmer la présence de toute contamination bactérienne causée par un transfert pendant le traitement.
Autres noms:
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Nager vers le bas
Portion de sperme traitée à l'aide de la nage vers le bas (100 %) 30 min à température ambiante Traitement pour la nage vers le bas Lavage à 1200 tr/min/5 min Relavage à 1200 tr/min/5 min puis évaluation à faire à l'aide de : Coloration Diff-Quik pour l'évaluation de la morphologie Évaluation de la motilité pour les grades A et B Concentration (mil/ml) Demi-vie 24 H Demi-vie 48 H Test HBA Contamination bactérienne |
La coloration de Papanicolaou (hématoxyline, orange G6 et EA50) donne une nette différence entre les constituants cellulaires basophiles et acidophiles et permet ainsi un examen détaillé du schéma de la chromatine, ce qui est utile dans l'évaluation de la morphologie des spermatozoïdes et l'évaluation de la présence de spermatozoïdes immatures. La coloration cytoplasmique peut varier entre le rouge et le vert en fonction de la force ionique, du pH et de la composition du service cellulaire et de la tache (OG6 et EA50). Évaluation morphologique des portions de sperme traitées. Comme le processus de séparation doit minimiser les spermatozoïdes anormaux morphologiques.
Autres noms:
La meilleure méthode de séparation assurera des spermatozoïdes plus progressifs après le traitement. Classement à l'aide des échelles A et B notées par des références (OMS 2010).
Autres noms:
comptage des spermatozoïdes isolés Utilisation de la chambre Makler pour le comptage des spermatozoïdes pour chaque portion post-traitement.
Autres noms:
pourcentage de spermatozoïdes actifs mobiles par rapport aux spermatozoïdes non mobiles. Examen microscopique pour chaque échantillon après 24 heures d'incubation, pour évaluer les spermatozoïdes progressivement mobiles et ceux non progressifs ou non mobiles.
Autres noms:
pourcentage de spermatozoïdes actifs mobiles par rapport aux spermatozoïdes non mobiles. Examen microscopique pour chaque échantillon après 48 heures d'incubation, pour évaluer les spermatozoïdes progressivement mobiles et ceux non progressifs ou non mobiles.
Autres noms:
Le test de liaison hyaluronique (HBA®) est un outil de diagnostic important pour l'infertilité masculine suspectée dans l'analyse du sperme. En quelques minutes, la lame HBA® fournit une réponse à la proportion de spermatozoïdes matures de liaison dans l'échantillon (The HBA® score %). En utilisant la lame HBA, nous pouvons compter les spermatozoïdes physiologiquement actifs à chaque échantillon et calculer le pourcentage de spermatozoïdes actifs en se référant au nombre de post-traitement du 3ème bras d'investigation.
Autres noms:
Culture bactérienne de routine à l'aide de plaques de culture de gélose au sang pour des échantillons finalement lavés de 10 microns, afin de confirmer la présence de toute contamination bactérienne causée par un transfert pendant le traitement.
Autres noms:
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Que mesure l'étude ?
Principaux critères de jugement
Mesure des résultats |
Description de la mesure |
Délai |
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HBA
Délai: Un jour
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L'affinité est mesurée en fonction du pourcentage de spermatozoïdes non mobiles produits à partir de 10 µL d'échantillon traité.
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Un jour
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Formes anormales
Délai: Un jour
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Pourcentage de spermatozoïdes normalement colorés après traitement
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Un jour
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Mesures de résultats secondaires
Mesure des résultats |
Description de la mesure |
Délai |
|---|---|---|
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Concentration finale
Délai: Un jour
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La concentration était une fluctuation en fonction de la motilité et de la concentration d'origine, DG
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Un jour
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Mobilité sur 24 heures
Délai: Un jour
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Évaluation de la motilité après incubation à 37,0 Dc
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Un jour
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48 heures de motricité
Délai: 2 jours
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Évaluation de la motilité après incubation à 37,0 Dc
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2 jours
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Autres mesures de résultats
Mesure des résultats |
Description de la mesure |
Délai |
|---|---|---|
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Contamination bactérienne
Délai: 2 jours
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culture bactérienne pour 5 microns d'échantillons traités pour assurer l'absence de cellules bactériennes.
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2 jours
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Collaborateurs et enquêteurs
Parrainer
Les enquêteurs
- Directeur d'études: Ahmad M Metwalley, Adliyah
Publications et liens utiles
Dates d'enregistrement des études
Dates principales de l'étude
Début de l'étude
Achèvement primaire (Réel)
Achèvement de l'étude (Réel)
Dates d'inscription aux études
Première soumission
Première soumission répondant aux critères de contrôle qualité
Première publication (Estimation)
Mises à jour des dossiers d'étude
Dernière mise à jour publiée (Estimation)
Dernière mise à jour soumise répondant aux critères de contrôle qualité
Dernière vérification
Plus d'information
Termes liés à cette étude
Mots clés
Termes MeSH pertinents supplémentaires
Autres numéros d'identification d'étude
- AlBarakaSD2
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