自己免疫性肝炎における免疫抑制離脱の成功を予測するためのバイオマーカー

研究デザイン: これは、1 型 AIH 患者の安全で効果的な治療中止のための予測バイオマーカーを確立するための、制御されていない、無作為化されていない、単一中心の前向き研究です。

研究期間：スクリーニングには1年かかると予想されます。 治療の中止は 6 か月かけて徐々に行われ、18 か月のフォローアップが行われます。

サンプルサイズ: 一部の研究では、再発率は約 36% です。 ただし、この率は不確実であり、調査対象の集団とその後のフォローアップによって異なります。 そのため、研究者は、この率の信頼区間と 87 人の患者の 10% の精度でサンプル サイズを計算しました。 10% の損失が予想されるため、最終的なサンプル サイズは 96 人の患者です。

患者: 治験責任医師は、ホスピタル クリニック バルセロナで免疫抑制治療を受けている少なくとも 3 年間の生化学的寛解を伴う 1 型 AIH と診断された 96 人の患者を選択します。 再発のリスクが高いことが証明されているため、2型AIHの患者は除外されます。 その他の包含および除外基準は次のとおりです。

治療中止: IS は 6 か月かけて徐々に減量します。 最初の 3 か月間はアザチオプリンを中止し、毎月の投与量を 50% 減らします。 プレドニゾンは、完全に離脱するまで毎月 2.5mg ずつ漸減します。 離脱中および治療中止後の最初の 1 年間は、患者は毎月臨床検査を受け、その後、プロジェクトの終了まで 3 か月ごとにフォローアップが行われます。

持続的寛解：治療を中止した後、AST/ALT を正常上限の 2 倍未満に維持する患者。

再発：以前の基準を満たさない患者。

データ収集：

• 人口統計学的変数：年齢、性別、診断から治療中止までの時間、アミノトランスフェラーゼ、γ-グルタミルトランスフェラーゼ（GGT）、アルカリホスファターゼ（AP）、自己抗体などの検査情報。
• 次の分析が実行される組み込みの時点での組織学的サンプル: 門脈炎症、界面肝炎および線維症の存在を評価するための通常の染色技術。 肝拒絶反応に関与する遺伝子群 (CXCL9、CXCL10、FoxP3、TK1、CD74、MMP9) の発現は、-80ºC で凍結保存された組織サンプルの RNA で定量的ポリメラーゼ連鎖反応 (qPCR) で評価されます。 リンパ球 CD4+、CD8+、および Treg の数を定量化するための免疫化学染色。

• 次の変数は、包含時およびすべてのフォローアップ訪問で収集された血液サンプルで評価されます。

  • フラックスサイトメトリー: Treg (CD4+、CD25+、CD127-、FoxP3) の頻度と特徴。 CTLA-4の細胞内染色も同様に評価されます。
  • Ｔｒｅｇ応答を研究するためのインターロイキン２（ＩＬ２）による刺激（刺激の２０分後のｐＳＴＡＴ５の発現およびその後のＩＬ１０の産生によって測定される）。
  • 自己抗体力価: 抗核自己抗体 (ANA)、抗平滑筋抗体 (ASMA)、抗肝腎ミクロソーム 1 型 (antiLKM)、抗可溶性肝抗原 (antiSLA)、および免疫グロブリンのレベル。

統計分析: カテゴリ変数は、カイ検定またはフィッシャー検定と比較されます。 量的変数は、ノンパラメトリック検定 (独立したサンプルの場合はマンホイットニー、ペアのサンプルの場合はウィルコクソン) で分析されます。 血液および組織サンプル中の遺伝子の発現を定量化するために、遺伝子のCtを3つの「ハウスキーピング」(18S、HPRT、GAPDH)で正規化し、デルタCtを生成します。 結果は、研究のcDNAと較正されたサンプルの相対的な発現として表されます。 の違い

野心: 治験責任医師の仮説は、治療中止後も寛解を維持できる 1 型 AIH に罹患した患者は、特徴的な血清学的および組織学的バイオマーカーを発現し、将来治療を中止することで費用と悪影響を回避することで利益を得る可能性のある患者の特定を可能にするというものです。 同時に、AIH の免疫病因と新しい治療標的の同定を理解するのに役立ちます。 したがって、過去数十年間この分野でほとんど進歩がなかったこの疾患の自然史を変える.