Biomarqueurs pour prédire le succès du sevrage de l'immunosuppression dans l'hépatite auto-immune

Conception de l'étude : Il s'agit d'une étude prospective non contrôlée, non randomisée, unicentrique visant à établir des biomarqueurs prédictifs pour un arrêt de traitement sûr et efficace chez les patients atteints d'AIH de type 1.

Durée de l'étude : Le dépistage devrait durer un an. L'arrêt du traitement se fera progressivement sur une période de 6 mois et il y aura un suivi de 18 mois.

Taille de l'échantillon : le taux de récidive a été d'environ 36 % dans certaines études. Cependant, ce taux est incertain et dépend de la population étudiée et du suivi ultérieur. C'est pourquoi les enquêteurs ont calculé la taille de l'échantillon avec l'intervalle de confiance de ce taux et une précision de 10% qui était de 87 patients. En s'attendant à 10 % de pertes, la taille de l'échantillon final est de 96 patients.

Patients : Les enquêteurs sélectionneront 96 patients diagnostiqués avec une AIH de type 1 avec une rémission biochimique d'au moins 3 ans qui sont sous traitement immunosuppresseur suivi à l'Hospital Clinic Barcelona. Les patients atteints d'AIH de type 2 sont exclus en raison de leur risque avéré élevé de récidive. Les autres critères d'inclusion et d'exclusion sont les suivants :

Arrêt du traitement : l'IS sera progressivement dégressif sur une période de 6 mois. L'azathioprine sera arrêtée pendant les 3 premiers mois en réduisant la dose de 50% tous les mois. La prednisone sera réduite de 2,5 mg par mois jusqu'au retrait total. Pendant le retrait et la première année après l'arrêt du traitement, les patients subiront des tests de laboratoire sur une base mensuelle, par la suite, un suivi sera effectué tous les 3 mois jusqu'à la fin du projet.

Rémission prolongée : les patients qui, après l'arrêt du traitement, maintiennent l'AST/ALT en dessous de 2 fois la limite supérieure de la normale.

Récidive : Patients qui ne remplissent pas les critères précédents.

Collecte de données:

• Variables démographiques : âge, sexe, délai entre le diagnostic et l'arrêt du traitement, informations de laboratoire telles que les aminotransférases, la gamma-glutamyl transférase (GGT), la phosphatase alcaline (AP) et les auto-anticorps.
• Prélèvement histologique au moment de l'inclusion dans lequel l'analyse suivante sera effectuée : techniques de coloration habituelles pour évaluer la présence d'inflammation portale, d'hépatite et de fibrose d'interface. L'expression d'un groupe de gènes impliqués dans le rejet hépatique (CXCL9, CXCL10, FoxP3, TK1, CD74, MMP9) sera évaluée par réaction en chaîne par polymérase quantitative (qPCR) dans l'ARN des échantillons de tissus cryoconservés à -80 °C. Coloration immunochimique pour quantifier le nombre de lymphocytes CD4+, CD8+ et Tregs.

• Les variables suivantes seront évaluées dans les échantillons de sang prélevés à l'inclusion et à chaque visite de suivi :

  • Cytométrie de flux : Fréquence et caractéristiques des Tregs (CD4+, CD25+, CD127- et FoxP3). La coloration intracellulaire de CTLA-4 sera également évaluée.
  • Stimulation avec l'interleukine 2 (IL2) pour étudier la réponse des Tregs (mesurée par l'expression de pSTAT5 après 20 minutes de stimulation et la production ultérieure d'IL10).
  • Titres d'auto-anticorps : auto-anticorps antinucléaires (ANA), anticorps anti-muscle lisse (ASMA), anti-microsome rénal hépatique de type 1 (antiLKM), antigène hépatique anti-soluble (antiSLA) et taux d'immunoglobulines.

Analyse statistique : Les variables catégorielles seront comparées avec des tests de Chi ou de Fisher. Les variables quantitatives seront analysées avec des tests non paramétriques (Mann-Whitney pour les échantillons indépendants et Wilcoxon pour les échantillons appariés). Pour quantifier l'expression des gènes dans le sang et les tissus, le Ct du gène sera normalisé avec les 3 "housekeeping" (18S, HPRT, GAPDH) pour générer le delta Ct. Les résultats seront exprimés en expression relative de l'ADNc de l'étude et de l'échantillon calibré. Différences de

Ambition : L'hypothèse de l'investigateur est que les patients atteints d'AIH de type 1 capables de maintenir la rémission après l'arrêt du traitement exprimeront des biomarqueurs sérologiques et histologiques distinctifs, permettant d'identifier les patients qui pourraient bénéficier de l'arrêt du traitement à l'avenir en évitant ses coûts et ses effets indésirables. En même temps, cela aiderait à comprendre l'immunopathogenèse de l'AIH et l'identification de nouvelles cibles thérapeutiques. Par conséquent, changer l'histoire naturelle de cette maladie où il y a eu peu de progrès dans ce domaine au cours des dernières décennies.