新生児敗血症の診断: ; PCR商用技術と血液培養
NICU での敗血症の早期発見のための市販検査と血液培養の PCR 技術
新生児ケアの進歩により、早産児の生存率が向上し、合併症が減少しましたが、敗血症は、特に超低出生体重児 (VLBW、<1500 g) および新生児集中治療室 (NICU) での死亡率に依然として大きく寄与しています。 -低出生体重（ELBW、<1000g）。 感染のタイミングに基づいて、新生児敗血症は早期発症敗血症 (EOS) と遅発性敗血症 (LOS) に分類されており、感染様式と優勢な微生物が異なります。 EOS は、通常、分娩中の母親から乳児への細菌の垂直感染による生後 3 日間の発症と定義されています。 LOS は生後 3 日後に発生し、出生後に獲得した病原体に起因します (水平感染)。 ヨーロッパの一般的な新生児敗血症を考慮すると、原因となる細菌の 90% は、Streptococcus agalactiae、Escherichia coli、Klebsiella pneumoniae、e Listeria monocytogenes であることがわかりました。 臨床徴候、特に疾患経過の初期の臨床徴候は微妙で非特異的であり、臨床検査や血液培養は常に信頼できるとは限らないため、診断は困難です。 さらに。 血液培養 (「ゴールド スタンダード」と見なされます) は、結果が出るまで 48 ～ 72 時間かかります。 実際、培養法では生きた細菌の存在が必要であり、サンプルの量によって異なります - 新生児集団における深刻な問題 - サンプルを処理するのに数時間かかります。偽陽性の結果は、汚染によって検出される可能性があります。 分子生物学に基づく方法は、生きている細菌を必要としないため、感度の制限によって特徴付けられません。 このような方法は、抗生物質療法を受けている患者に非常に効果的です。
本研究では、乳児が敗血症の可能性を確認するために細菌培養のために血液サンプルを受けなければならない場合、分子生物学に基づくキットを使用して残りの血液（200μl）を同時に処理します。
このキットは、満期産児や早産児に影響を与えるほとんどの侵襲性細菌性疾患 (髄膜炎、敗血症、肺炎など) の決定において最高の感度と特異性を得て、肺炎桿菌のすべての血清型に属する細菌 DNA の存在を決定するように設計されています。 、大腸菌、ストレプトコッカス・アガラクティエおよびリステリア・モノサイトゲネス。
対象となる細菌は、現在のイタリアの疫学的状況に基づいて選択されており、新生児集団の髄膜炎/敗血症の約 90% を引き起こす細菌が含まれます。 この検出システムは、他の細菌やヒト DNA との交差反応を引き起こすことなく、対象の細菌を間違いなく識別することができます。
この方法で得られた結果は、100% の特異性を示しました (偽陽性の結果はありません)。この方法の感度は、文化的方法と比較して 2 倍高いことが判明しました。
本研究の目的は、NICU の関連する疫学を考慮して、血液培養法と細菌 DNA (肺炎桿菌、大腸菌、ストレプトコッカス アガラクティエ、リステリア モノサイトゲネスのすべての血清型) の分子検出のためのキットの有効性を比較することです。私たちの病棟のすべての敗血症の原因となる細菌の全頻度で、標的細菌によって引き起こされる敗血症の相対頻度 (EOS および LOS) を検証するために。
調査の概要
詳細な説明
新生児敗血症は、正期産児と早産児の両方の罹患率と死亡率の主要な原因の 1 つです。 新生児ケアの進歩により、早産児の生存率が向上し、合併症が減少しましたが、敗血症は依然として死亡率と新生児集中治療室 (NICU) での重大な原因となっています。 特に極低出生体重児 (VLBW < 1500 g) および超低出生体重児 (ELBW < 1000 g) の場合です。新生児敗血症の徴候と症状は非特異的です。 これらには、発熱または低体温症、チアノーゼおよび無呼吸を含む呼吸困難、摂食困難、無気力または過敏性、筋緊張低下、発作、泉門の膨らみが含まれます...感染のタイミングに基づいて、新生児敗血症は早期発症敗血症（EOS）および早期発症敗血症に分類されています。遅発性敗血症（LOS）、伝染様式と優勢な微生物の違い。 EOS は、通常、分娩中の母親から乳児への細菌の垂直感染による生後 3 日間の発症と定義されています。 LOS は生後 3 日後に発生し、出生後に獲得した病原体に起因します (水平感染)。 新生児敗血症の疫学は変化している状況であるにもかかわらず、特に早産児の間で EOS 大腸菌敗血症の発生率が増加しており、B 型連鎖球菌 (GBS)、特に S. agalactiae が原因微生物の 70% であることが判明しました。国立小児保健人間発達研究所 (NICHD) の新生児研究ネットワーク (NRN) センターに入院した 6215 人の乳児に関する研究では、最初のエピソードの遅発性感染症の 70% がグラム陽性菌によって引き起こされ、コアグラーゼ陰性のブドウ球菌が原因でした。感染の48％。 ヨーロッパの一般的な新生児敗血症を考慮すると、原因となる細菌の 90% は、Streptococcus agalactiae、Escherichia coli、Klebsiella pneumoniae、e Listeria monocytogenes であることがわかりました。 新生児敗血症の診断は困難です。臨床徴候、特に疾患の初期段階では微妙で非特異的であり、臨床検査や血液培養は常に信頼できるとは限らず、さらに血液培養 (「ゴールド スタンダード」) には 48 ～ 72 時間かかるためです。以上の結果が得られます。 実際、文化的方法には多くの弱点があります。生きた細菌と生命力のある細菌の存在が必要であり、収集されたサンプルの量に依存します - 新生児集団における深刻な問題 - サンプルを処理するのに数時間必要であり、結果的に結果として生じる可能性があります併用抗生物質治療を受けている被験者の偽陰性または偽陽性の結果は、汚染によって発見される可能性があります。 分子生物学に基づく方法は、生きた細菌を必要としないため、文化的な方法に典型的な感度の制限によって特徴付けられません。 このため、このような方法は、すでに抗生物質療法を受けている患者に非常に効果的であり、迅速な輸送の影響を受けません (サンプルを室温で数日間保存できるほど)。 、任意の培地を必要としません。
本研究では、乳児が敗血症の可能性を確認するために細菌培養のために血液サンプルを受けなければならない場合、分子生物学に基づくキットを使用して残りの血液（200μl）を同時に処理します。 このキットは、満期産児や早産児に影響を与えるほとんどの侵襲性細菌性疾患 (髄膜炎、敗血症、肺炎など) の決定において最高の感度と特異性を得て、肺炎桿菌のすべての血清型に属する細菌 DNA の存在を決定するように設計されています。 、Escherichia coli、Streptococcus agalactiae および Listeria monocytogenes 対象となる細菌は、現在のイタリアの疫学的状況に基づいて選択されており、新生児集団の髄膜炎/敗血症の約 90% を引き起こす細菌が含まれます。 検出システムは、他の細菌やヒト DNA との交差反応を引き起こすことなく、対象の細菌を間違いなく識別することができます。
この方法で得られた結果は、100% の特異性を示しています (偽陽性の結果はありません)。 文化的な方法と比較して、この方法の感度は 2 倍高いことが判明しました。
本研究の目的は、NICU の関連する疫学を考慮して、血液培養法と細菌 DNA (肺炎桿菌、大腸菌、ストレプトコッカス アガラクティエ、リステリア モノサイトゲネスのすべての血清型) の分子検出のためのキットの有効性を比較することです。私たちの病棟のすべての敗血症の原因となる細菌の全頻度で、標的細菌によって引き起こされる新生児敗血症（EOSおよびLOS）の相対頻度を検証するために。
100 個の測定可能なサンプルを収集するための観測推定期間は、登録の開始から 18 か月です。
サンプルは、敗血症の疑いがあるために採血を必要とした早期産新生児の登録に対応し、両方の方法で処理されます。
研究の種類
入学 (実際)
連絡先と場所
研究場所
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PV
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Pavia、PV、イタリア、27100
- Neonatal Unit, IRCCS Policlinico S. Matteo.
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参加基準
適格基準
就学可能な年齢
健康ボランティアの受け入れ
サンプリング方法
調査対象母集団
説明
乳児: 血流感染症の疑い、NICU に入院、SIRS ≧2。
除外基準：遺伝性疾患および/または先天性疾患のある乳児、両親が書面によるインフォームドコンセントへの署名を拒否している。
研究計画
研究はどのように設計されていますか？
デザインの詳細
コホートと介入
グループ/コホート |
介入・治療 |
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血液検査・分子生物学による敗血症診断
敗血症の疑いでNICUに入院した満期/早産の新生児
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血液培養と同時に実施
他の名前：
分子アッセイと同時に実施
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この研究は何を測定していますか？
主要な結果の測定
結果測定 |
メジャーの説明 |
時間枠 |
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陽性検査の頻度
時間枠：1週間
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分子アッセイによって検出された陽性検査 (新生児敗血症、EOS または LOS) の頻度を血液培養の頻度と比較して検証する
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1週間
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協力者と研究者
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捜査官
- スタディディレクター：Mauro Stronati, MD、Fondazione IRCCS Policlinico S. Matteo, 27100 Pavia Italy
出版物と役立つリンク
一般刊行物
- • Istituto Superiore di Sanità. http//www.simi.iss.it/dati.htm • Shah BA, Neonatal sepsis: an old problem with new insights PadburyJF. Virulence 5:1, 163-171; January 1, 2014; © 2014 • Stoll BJ, Hansen NI, Sánchez PJ, Faix RG, Poindexter BB, Van Meurs KP, Bizzarro MJ, Goldberg RN, Frantz ID 3rd, Hale EC, et al.; Eunice Kennedy Shriver National Institute of Child Health and Human Development Neonatal Research Network. Early onset neonatal sepsis: the burden of group B Streptococcal and E. coli disease continues. Pediatrics 2011; 127:817-26. • Libster R, Edwards KM, Levent F, Edwards MS, Rench MA, Castagnini LA, Cooper T, Sparks RC, Baker CJ, Shah PE. Long-term outcomes of group B streptococcal meningitis. Pediatrics 2012; • Stoll BJ, Hansen N, Fanaroff AA, Wright LL, Carlo WA, Ehrenkranz RA, Lemons JA, Donovan EF, Stark AR, Tyson JE, et al. Late-onset sepsis in very low birth weight neonates: the experience of the NICHD Neonatal Research Network. Pediatrics 2002; 110:285-91; • Levy MM, Fink MP, Marshall JC et al. "2001 SCCM/ESICM/ACCP ATS/SIS International Sepsis Definitions Conference" Critical Care Medicine . 31 n 4 pp: 1250-1256, 2003. • Arnon S. Litmanovitz I. Diagnostic tests in neonatal sepsis. Curr Opinion Infectious Dis 2008; 21: 223-27. • Russell JA. Management of sepsis. N Engl J Med 2006;355:1699-713. • Overturf GD. Defining bacterial meningitis and other infections of the central nervous system. Pediatr Crit Care Med. 2005;6(3 Suppl):S14-8.
- Mazzucchelli I, Garofoli F, Angelini M, Tinelli C, Tzialla C, Decembrino L. Rapid detection of bacteria in bloodstream infections using a molecular method: a pilot study with a neonatal diagnostic kit. Mol Biol Rep. 2020 Jan;47(1):363-368. doi: 10.1007/s11033-019-05138-2. Epub 2019 Oct 22.
研究記録日
主要日程の研究
研究開始 (実際)
一次修了 (実際)
研究の完了 (実際)
試験登録日
最初に提出
QC基準を満たした最初の提出物
最初の投稿 (実際)
学習記録の更新
投稿された最後の更新 (実際)
QC基準を満たした最後の更新が送信されました
最終確認日
詳しくは
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