重度の喘息患者におけるメポリズマブの有効性 (MESILICO) (MESILICO)

科学的根拠 インターロイキン (IL)-5 は、好酸球の活性化に関与する主要なサイトカインであるため、治療戦略が研究され、臨床使用のために開発されています。 IL-5 とその受容体を標的とする生物製剤 (最初はメポリズマブ、その後はレスリズマブとベンラリズマブ) が最近承認され、重度の好酸球性喘息の追加療法として使用され、循環好酸球数の減少、肺機能の改善、悪化をもたらしました。重度の喘息患者の減少。

重度の喘息における生物学的療法に対する反応はさまざまで、患者はノンレスポンダー、レスポンダー、またはスーパーレスポンダーのいずれかです。 現在、応答におけるこの広範な変動についての説明はありません。 これらの患者が、治療中の医師が臨床診療で正しい診断を下すのに役立つ明確な特徴を持っているかどうかを調べることが重要です。

この臨床研究の目的は、ヒト化IL-5アンタゴニストモノクローナル抗体であるメポリズマブの有効性を、固定閉塞を伴う遅発性重症好酸球性喘息患者で評価し、メポリズマブ治療下のノンレスポンダーとスーパーレスポンダーの特徴を特定することです。 この研究は非介入と見なされ、含まれるすべての手順は、喘息患者の診断と表現型検査の臨床ルーチンで行われています。

気道炎症の調査には、直接測定 (気管支生検や気管支肺胞洗浄など) と間接的方法 (症状評価、血液サンプル分析、肺機能検査など) のいくつかの方法が使用されます。 直接法には、気道の炎症を確実に評価できるという利点がありますが、侵襲的であり、患者の不快感やリスクが伴うため、大規模には実行できません。 間接的な方法に関しては、気道炎症の直接的な評価との相関はほとんどありません。

この研究では、患者の臨床的特徴のうち、スパイロメトリー、炎症のバイオマーカー（血中好酸球、FeNO、IgEレベル）、インパルスオシロメトリー（IOS）、および気管支鏡による基底膜の肥厚が評価されます。 通常の治療 (ICS/LABA/LAMA) に反応しない固定閉塞を伴う晩発性好酸球性重症喘息患者は、平滑筋量の増加を伴って現れることが示唆されています。 しかし、気道平滑筋量の増加が気道狭窄に及ぼす正確な影響は不明であり、疾患の重症度によって異なる可能性があります。 さらに、生体液（血清、喀痰、喀痰上清および気管支サンプル）中の炎症のバイオマーカーも、52週間のメポリズマブ治療の前後に評価されます。 炎症のバイオマーカーは、レスポンダーとノンレスポンダーを識別するために非常に重要です。

より具体的には、喘息への特定のアプリケーションで肺機能を評価するための代替技術として IOS が導入されました。 この技術は非侵襲的で、潮呼吸中に簡単に実行でき、患者の協力は最小限で済みます。

喀痰採取は、気道から細胞をサンプリングする別の方法であり、気道の炎症を直接評価することができます。 さらに、喀痰上清を用いた例には、メディエーターの分析および好酸球に対するサンプルの走化活性の評価が含まれます。 喀痰細胞は、フローサイトメトリーによって分析することもできます。これにより、とりわけ、免疫表現型検査と細胞の選別が可能になります。 さらに、喀痰細胞を培養することができ、それらのメディエーター産生を in vitro で測定することができます。 この場合、メディエーターの内容は、喀痰の上清に見られるものとは異なることに注意してください。 実際、喀痰上清中のメディエーターは、喀痰細胞培養モデルとは対照的に、気道常在細胞からの分泌物および血漿滲出によって影響を受ける可能性があります。 最後に、免疫細胞化学および in situ ハイブリダイゼーションも、喀痰細胞を使用して実行できます。

表現型、血中好酸球、および血清 IgE レベルを参照として使用することが提案されていますが、以前の研究で確認されているように、血中免疫細胞レベルと気道上皮免疫反応の間には解離があります。 標的免疫細胞の気道上皮免疫組織化学染色は、さまざまなタイプの気道炎症を特定するために使用されてきました。ただし、この手法は臨床現場ではめったに使用されません。 以前の研究では、重度の喘息患者に対して気管支鏡生検を実施することの相対的な安全性が明らかにされています。 鼻生検、鼻または気管支ブラッシング、気管支肺胞洗浄などの組織診断に使用されるサンプリング技術の中で、気管支鏡ガイド下気管支上皮サンプリングは、組織の状況における上皮および炎症細胞に関するより正確な情報を提供します。 したがって、困難な臨床条件で最も適した生物製剤を選択するための強力なツールです。

その上、喘息疾患は、今日「気管支リモデリング」として知られている気管支壁の不可逆的な変化をもたらす慢性粘膜炎症過程を特徴としています。 腺および平滑筋線維の過形成および/または肥大、杯細胞の過形成、および気道上皮の下に存在する基底膜 (BM) の可変肥厚は、これらの形態学的変化の一部です。 上皮結合界面で生成された変化は、炎症性ストレスおよび散発性気管支収縮に対する「適応反応」を説明します。 ただし、喘息患者のBM反応性に関する現在のデータは、主に網状板のコラーゲン沈着が疾患の重症度と相関していないため、病因、特に気管支壁のリモデリングへの関与を正確に評価するにはまだ不完全です。

さらに、喘息患者に見られるさまざまな臨床症状、生理学的特徴、および転帰によって証明されるように、重度の喘息が単一の疾患ではないことがますます明らかになっています。 この異質性をよりよく理解するために、喘息の表現型とエンド型の概念が登場しました。 フェノタイピングは、分子、細胞、形態、機能から患者志向の特徴まで、生物学的および臨床的特徴の両方を統合し、治療を改善することを目的としています。 最終的に、これらの表現型は喘息の「エンドタイプ」に発展し、臨床的特徴と識別可能なメカニズム経路が組み合わされます。 客観的に測定でき、根底にある生物学的プロセスまたは病因の指標として機能する特性として定義されるバイオマーカーは、表現型とエンドタイプを定義する上で重要です。 喘息では、遺伝的多型、気道生理学の尺度、および尿、血液、喀痰、組織、呼気ガス、および呼気凝縮液中の炎症メディエーターのレベルがすべて、喘息の診断と管理を改善および客観化するための潜在的なマーカーとして研究されてきました。 このようなツールを開発することで、特定のバイオマーカープロファイルに基づいて治療を調整するという最終的な目標を持って、喘息で説明されているさまざまな臨床パターンを表現型およびエンドタイプすることができます。 バイオマーカーは、介入に対する薬理学的反応をよりよく理解し、それに応じて治療を調整するのに役立ちます。

バイオ マーカーは、病気の病因の研究と重症喘息の新しい治療法の開発にとって重要です。 特に、タイプ 2 炎症のバイオマーカーは、新しい生物剤のエンドタイピングとターゲッティングに価値があることが証明されています。 これらの 2 型炎症の理解とマーキングの成功により、喘息における非 2 型炎症メカニズムに関する知識の欠如は、まもなく、重症喘息の新しい治療法と管理戦略の開発に対する主要な障害となるでしょう。 他の潜在的なバイオマーカーには、自然リンパ球、IL-33、または胸腺間質リンホポエチンが含まれます。

最近の出版物では、喘息の病態機序における miRNA の重要な調節的役割が確認されています。 一部の単一の miRNA またはそのセットは、診断や治療結果の予測を容易にする喘息バイオマーカーとしての使用が期待されています。 それらはまた、将来の治療の標的となる可能性があります。 しかし、この分野の研究は不足しています。 最近、関連する miRNA のほとんどが Th2 サイトカインの分泌を増加させ、Th1 サイトカインの分泌を減少させ、T 細胞の Th2 への分化を促進し、気管支平滑筋細胞の過形成と肥大に関与することが示されました。 miRNA のプロファイルは、肺機能、表現型、喘息の重症度などの臨床的特徴と相関しています。

業界が後援する生物学的臨床試験のほとんどは、SARP の重度の喘息臨床表現型 (高強度コントローラー投薬レジメン、頻繁な増悪、および低肺機能) に似ている研究対象を選択することにより、上記のアプローチを効果的に使用していますが、バイオマーカーの上昇が必要です (血液、呼気ガス、または喀痰) から、それらの臨床表現型内の特定の免疫調節剤に対する応答者である可能性が最も高い患者を特定する必要があります。 最近発表された臨床試験の生物製剤は、2 型炎症経路を標的とし、2 型バイオマーカー (血液または喀痰の好酸球または FeNO) が上昇している被験者への参加を制限しています。 どの患者が生物学的免疫調節剤から最大の利益を得ているかをよりよく理解するための「グループ化」バイオマーカーへの事後レスポンダー分析は、2型炎症性バイオマーカーの同時上昇が「高レスポンダー」患者をさらに特定する可能性があるという理解につながります。

仮説には、遅発性重度の好酸球性喘息患者におけるメポリズマブ治療の有効性と、臨床的および炎症性バイオマーカーとの関係が含まれます。

研究課題 遅発性好酸球性重症喘息患者のメポリズマブ治療開始から 1 年目における増悪率の改善はあるか、ノンレスポンダーとスーパーレスポンダーの特徴は何か？ 平滑筋細胞のリモデリングに改善はありますか? 遅発性好酸球性重症喘息患者のメポリズマブ治療に対する反応を予測するバイオマーカーはありますか? 呼吸パラメータの改善はありますか? 喘息のコントロールと患者の生活の質に改善はありますか? 目的

この調査の主な目的は次のとおりです。

1. 固定閉塞を伴う遅発性重度好酸球性喘息患者の増悪率におけるメポリズマブ治療の効果を実証すること。
2. ノンレスポンダーとスーパーレスポンダーの特徴を特定する。

この研究の主な副次的な目的は次のとおりです。

1. リモデリングの改善 (気管支平滑筋細胞の肥厚)。
2. 反応の可能性のあるバイオマーカー。
3. 遅発性重度の好酸球性喘息患者の固定閉塞を伴うメポリズマブ治療中の喘息コントロールおよび患者の生活の質の改善。

研究デザインおよび方法 患者は、ギリシャの人口をカバーする各サイト (8 人) の気管支喘息の外来診療所から収集されます。 これらのクリニックはすべて、リクルートメントを強化し、国際的な影響力を持つ気管支鏡専門医を含めるために含まれています。 Covid-19のパンデミックに関する現在の状況により、研究者は、この臨床研究が私たちの診療所の作業負荷を妨げないと想定しています.

全体として、これは 8 つの呼吸器クリニックを含む前向き多施設研究です。 5 つの呼吸器大学クリニック、2 つの国立医療システム、および 1 つの陸軍総合病院。

この研究には、適格性を評価し、書面によるインフォームドコンセントを取得するための最大2週間のスクリーニング期間、52週間のメポリズマブ治療期間、4週間ごとに1回、治療中の3か月ごとのフォローアップ訪問が含まれます。

研究集団は、20歳以上でメポリズマブを投与されている遅発性好酸球性喘息および固定閉塞を有する45人の患者で構成されます。

研究への参加、評価、フォローアップ:

スクリーニング: 治験責任医師は、選択された被験者を参加クリニック (重症喘息外来クリニック) でスクリーニングします。 被験者は同意に署名するために来ます。 臨床評価と手順、および構造的面接がスクリーニング中に行われます。 スクリーニング訪問を完了する資格がある/完了することができる被験者は、同じ日にそうすることができ、必要に応じて、2週間以内にベースライン評価を完了します。 喘息の悪化が進行中の被験者は、被験者がベースラインの喘息状態に戻ったと調査員が考えるまで、スクリーニングと治療開始の訪問を遅らせる必要があります。 2 週間のスクリーニング期間が経過した場合、被験者はスクリーニング不合格と見なされます。 被験者は、スクリーニング期間を通じて現在の維持療法を続けます。 患者の適格性は、次のセクションに記載されている基準に基づいています。

過去12か月間の喘息増悪の病歴は、スクリーニング訪問時に報告されます。 また、増悪は、報告された各来院時に評価されます。

バイタルサインは、スクリーニング訪問時、ベースライン時、および3か月ごとに実行されます。 測定には、収縮期および拡張期血圧、脈拍数、体温が含まれます。

センチメートル（cm）単位の身長とキログラム（kg）単位の体重は、スクリーニング訪問時に測定されます。 体格指数 (BMI) は、体重 (kg) を身長 (m) の 2 乗で割って計算されます。

検査室評価 (血液学、血液化学、尿検査):

ベースラインで静脈血と尿を採取する。 血液学：ヘモグロビン、ヘマトクリット、赤血球数、分画付き白血球数、および血小板は、各サイトの病院の検査室で測定されます。 基本的な臨床化学と尿検査が評価されます。 女性被験者の尿の収集も妊娠を評価します。

IgEレベルは、immunoCAPテストを使用してスクリーニング訪問時に評価され、IU / mLとして報告されます。

次のアンケートが実施されます。1）現在の喘息コントロールを評価するための喘息コントロールアンケート（ACQ-5）および喘息コントロールテスト（ACT）。 2) 喘息の生活の質に関する質問票 (AQLQ+12) を使用して、生活の質と心理的罹患率を評価します。 睡眠の質をさらに評価するには、1) Athens Insomnia Scale (AIS)、2) Epworth Sleepiness Scale (ESS)、3) St. George's Respiratory Questionnaire (SGRQ)、4) WHO (Five) Well-Being Index (WHO-5)、 5) 疲労重症度尺度 (FSS)。

吐き出された一酸化窒素（NO）は、米国胸部学会のガイドラインに従って、および製造元の指定に従って、ベースラインおよび3か月ごとに測定されます。 FeNO レベルは、10 億分の 1 単位で報告されます。 スパイロメトリーを行う前に測定を行います。

静脈血サンプルは、メポリズマブ治療による52週間の期間中、ベースライン時および3か月ごとに午前8時から10時の間に取得されます。 絶対血中好酸球数は、細胞/μlとして報告されます。

スパイロメトリー: スパイロメトリー A は、訪問時にサイト独自の機器を使用して実施されます (ベースラインおよび 3 か月ごと)。 すべての診療所への訪問は午前中に行う必要があります。 治療期間中、スパイロメトリーは現在の ATS/ERS ガイドラインを満たし、スパイロメーターは生成されたすべてのデータのプリントアウトを作成する必要があり、被験者のメモに保存する必要があります。 スパイロメーターは、メーカーの指示に従って校正されます。 スパイロメトリーは、Visit 0 のスパイロメトリーと同時に (±1 時間) 実行する必要があります。 可能であれば、被験者は短時間作用型ベータ 2 アゴニスト (SABA) を 4 時間以上、LABA を 15 時間以上控えるようにしてください (GINA 2019)。 記録される評価には、FEV1、FVC、FEV1/FVC%、PEF、および FEF25-75 が含まれます。 200～400mcgのアルブテロールまたは同等物を使用して、気管支拡張薬後の測定値を来院ごとに取得します。

スパイロメトリー B は、訪問時にサイト独自の機器を使用して実施されます (ベースライン、6 か月後、および 52 週の時点での治療後)。 スパイロメトリー B には、拡散、肺容量および容量が含まれます。

インパルスオシロメトリー (オプション):

インパルスオシロメトリー（IOS）は、ベースライン時および52週間の治療後に実施されます。 IOS には、5 Hz での抵抗 - 20 Hz での抵抗 (R5-R20) が含まれます。これは、小型から中型の導電性および末梢気道の呼吸抵抗を反映する測定値であり、AX は、末梢肺 (つまり、柔組織と小型の末梢気道) の拡張性を反映する測定値です。 、および呼吸器系リアクタンス (X5)、慣性および弾性または静電容量 (小さな末梢気道を含む) を反映する尺度。

生物製剤による治療：

スクリーニング訪問が完了すると、参加者は1か月以内に生物学的療法（メポリズマブ）による治療を開始できます。 治療中、被験者は、研究に参加するために研究グループに紹介した呼吸器専門医の管理下に置かれます。 これらの呼吸器専門医は、「準呼吸器専門医」と呼ばれます。 治療は製品メーカーの指示に従って提供されます。

研究中に生物学的治療を提供する呼吸器専門医は、プロトコルに従って研究を実施するための同意書に署名し、彼/彼女が医療行為と研究の実施に責任があることを認め、アソシエイト (およびその同僚)および従業員）研究の実施を支援する彼らの義務について通知されます。 アソシエートスタッフが研究全体を通して研究グループから適切な情報とサポートを受けられるようにするためのメカニズムが整備されます。

生物学的療法中のフォローアップ: 生物学的療法の開始時および投与のたびに、情報の収集は准呼吸器科医によって行われ、准呼吸器科医から要求された場合は研究グループによるサポートを受けます。顔の接触は、患者にインタビューします。 さらに、コンプライアンスは、患者の口頭確認に基づいて医師から記録されます。 薬物投与の日付形式は、訪問ごとに記録され、即時および遅延の副作用も記録されます。

安全監視:

記録された有害事象（AE）は、調査報告書で必要に応じて監視および照合されます。 有害事象とは、研究への登録を開始した後に発生する望ましくない兆候、症状、または病状の出現または悪化です。 治験薬の開始前に存在した病状/疾患は、治験薬の開始後に悪化した場合にのみ有害事象と見なされます。 異常な臨床検査値または検査結果は、それらが臨床徴候または症状を誘発する場合、臨床的に重要であると見なされる場合、または治療を必要とする場合にのみ、有害事象と見なされます。 また、Covid-19 に関連する有害事象も含まれています。 パートナーの呼吸器専門医または研究スタッフが製品に関連する AE に気付いた場合、自発 AE 報告に関する現地の標準的な慣行に従って製造業者に報告することができます。 報告書のコピーも研究コーディネーターに送付する必要があります。 重篤な有害事象 (SAE) は eCRF ページで報告され、24 時間以内にすべての研究者がテッサロニキの中央委員会に通知する責任があります。 その後、中央委員会は科学委員会とギリシャの医療機関に通知します。 また、被験者が治療を中止すべきかどうかを決定する際には、中央委員会とともに各センターの研究責任者が医学的および科学的判断を下します。

妊娠報告:

最初に、スクリーニングの女性患者は妊娠検査をしなければなりません。 治療中に女性被験者が妊娠を報告した場合、研究を中止するよう求められます (バイアスを防ぐため)。各センターの外来診療所。

事前スクリーニングとスクリーニングの失敗:

被験者には、同意書に署名した時点で試験番号が割り当てられます。 署名したが、スクリーニング訪問評価に進まない被験者は、事前スクリーニング不合格と見なされます。 これらのサブジェクトのデータはデータベースにキャプチャされません。

2回のスクリーニング訪問のうち少なくとも1回は完了するが、生物学的療法を開始しない被験者は、スクリーニング失敗として指定されます。 事前スクリーニングおよびスクリーニング失敗のために収集される情報は、データベースの完成で詳述されます。

撤回訪問:

参加者がフォローアップ中に研究から撤退することを決定した場合 (フォローアップの喪失以外の理由で)、彼らは撤退訪問に出席するよう求められる場合があります (研究者が必要とみなし、同意が必要な場合)。 訪問中、参加者は、喘息や鼻の症状、増悪、受けている治療の進行など、臨床情報収集の一環として現在の状態について質問される場合があります。

血液サンプルの収集と処理:

血液サンプルは、ベースライン訪問時、6か月時、および治療完了後に収集されます。 血液サンプルを採取した後、完全な血栓形成のために約 30 分間静置します。 次に、サンプルを遠心分離して血餅から血清を分離します。 遠心分離後、分析が完了するまで、血清をエッペンドルフチューブ内で-20℃で保存します。 血液表現型もフローサイトメトリーで評価されます。

誘発喀痰 (オプション):

誘発喀痰は、誘発喀痰処理に関する専門家のコンセンサスに基づく詳細な推奨事項が提案されているERSタスクフォースレポートに従って、治療開始前および治療完了後にベースラインで実施されます。

来院時には、ルーチンのスパイロメトリー評価が完了した後、喀痰誘導が行われます。

誘発された喀痰は、研究施設での誘発手順の終了後 2 時間以内に処理されます。 喀痰細胞および細胞懸濁液の上清は、分析のために-80ºCで保存されます。 誘発された喀痰を採取した後、分析が完了するまでサンプルの上清をエッペンドルフチューブ内で-20℃で保存します。 これらの手順に続いて、喀痰の実験室評価は、ガイドラインに従って次です。

気管支鏡検査、気管支生検および洗浄サンプルの収集と処理 (オプション): 来院時に、気管支生検を伴う内視鏡検査、気管支洗浄サンプル (来院 0b) は、患者の書面による同意を得て実施されます。 具体的には、各患者から署名される個別のインフォームド コンセントが含まれます。 気管支鏡検査は 2 つの時点で実施されます (治療開始前のベースラインと治療完了後)。 柔軟な気管支鏡検査と診断技術は、American Thoracic Society と British Thoracic Society が推奨する監視下の麻酔管理下で実施されました。

組織サンプルは、ホルムアルデヒドまたはグルタルアルデヒドを使用して膨張または浸漬で固定され、パラフィンに包埋されます。 気道は、病理学者の裁量で診断解剖中に体系的にサンプリングまたは取得されます。 各ブロックから厚さ０．５、５および３０μｍの連続切片を切り取り、それぞれマッソントリクローム法、ヘマトキシリンおよびエオシン、ならびにヘマトキシリンを用いて染色した。 免疫組織化学染色は、次のmAbで行われます：抗マスト細胞トリプターゼクローンAA1（Dako UK）、抗アルファ平滑筋アクチンクローン1A4（Dako UK）、抗好酸球主要塩基性タンパク質クローンBMK-13（Monosan、オランダ） ）、抗好中球エラスターゼクローンＮＰ５７（Ｄａｋｏ ＵＫ）、および抗内皮クローンＥＮ４（Ｍｏｎｏｓａｎ、オランダ）または適切なアイソタイプ対照を使用した。

気管支内生検は、臨床的特徴を知らされていない単一の観察者によって評価され（ZEN 2012 光学顕微鏡用画像解析ソフトウェア、Carl Zeiss AG、ドイツ）、少なくとも 2 つのセクションから行われた測定値の平均として表されます。生検または同じ生検から少なくとも20μm離れた非連続組織切片として。 上皮の完全性は、無傷および露出した上皮の長さを測定することによって評価されます。 これらは、すべての網状基底膜 (RBM) の長さのパーセンテージとして表されます。 血管密度は、血管密度と血管面積の両方の代理であるチョークリー数を使用して測定されます。 Chalkley 接眼目盛 (NG52 Chalkley Point Array、Pyser-SGI Ltd、英国) を x200 で使用して、重複しない 4 つの血管ホットスポットで Chalkley カウントを測定します (6)。 気道平滑筋含有量は、総面積の割合として決定されます。 炎症細胞は、有核細胞の数/固有層の面積として表した。

気管支洗浄サンプルは、すぐに実験室に運ばれ、-80 度で保管されます。 気管支洗浄液の検査は、後の段階でいくつかのバイオマーカーを決定するために行われます。

フローサイトメトリー分析 (FACS) または ELIZA による炎症のバイオマーカーの分析:

メポリズマブによる治療前後の 2 ～ 3 時点のバイオマーカー (ベースライン時、治療 6 か月後、および治療完了来院後): リンパ球サブセット、Th2/Th17 サイトカイン、ケモカイン、フローサイトメトリーまたは ELISA によって定量化されるマイクロ RNA 発現)体液（血液、血清、気管支洗浄液、喀痰および喀痰上清）中。

パネル キットと適切な抗体は、メーカーの推奨事項と指示に従って、BD FACS Calibur システム (BD Biosciences、カリフォルニア州サンノゼ) を使用したフローサイトメーター分析によってテストされます。

ELISA（酵素結合免疫吸着アッセイ）は、ペプチド、タンパク質、抗体、ホルモンなどの物質を検出および定量するために設計されたプレートベースのアッセイ技術です。 ELISA キットは、VICTOR X3 分光光度計を使用して、製造元の推奨事項と指示に従って分析されます。

アレルギー検査（該当する場合）患者のアトピー状態は、さまざまな一般的な吸入アレルゲンに対する総IgE抗体を検出するためのエアロアレルゲンの標準パネルへの皮膚プリックテスト（SPT）によるスクリーニング訪問時に評価されます（利用できない場合）。

データベース 電子データ収集プラットフォームは、このデータベースの 1 年間のフォローアップまで、ベースラインで 3 か月ごとに使用される方法です。 治療訪問中、紙のフォーム/アンケートは、准呼吸器専門医によって記入されます。 各サイトは、特定のデータを電子データベースに入力します。 各患者は、担当の監視サイトによって割り当てられたサイト番号と調査員によって割り当てられた連続番号で構成される被験者番号によって一意に識別されます。 インフォームド コンセント フォームに署名すると、治験責任医師は患者に次の連番を割り当てます。 サイトは、中央の研究担当者に連絡し、電子データベースに登録されている患者の要求された識別情報を提供する必要があります。 治療訪問フォームは、中央研究担当者にも送信されます。 認定された研究担当者は、データの収集、編集、および自分のサイトで収集されたデータの保護にも責任を負い、データベースは毎日バックアップされます。 品質のレビュー/管理は、関係するすべての個人と中央研究担当者 [データ管理者] の共同責任となります。

サンプル サイズの計算 G パワー分析 サンプル サイズは、G*Power ソフトウェア (Die Heinrich-Heine-Universität Düsseldorf, Germany) を使用して計算されます。 遅発性好酸球性重症喘息患者のメポリズマブ治療前と治療後の年間増悪率の差が、この研究の主要評価項目です。 DREAM 研究 (これまでに主要評価項目と同様の結果を報告した 2 つの研究のうちの 1 つ) では、重度の喘息患者の年間増悪率が、メポリズマブによる治療の開始後に 3.6 から 1.33 に減少したことが報告されました。 このデータと、検出力が 0.95、統計的有意水準が 0.05 の両側検定を使用して、研究者は 0.556 の効果サイズを計算しました。これは、45 人の参加者の合計サンプルサイズを示しました。

統計計画分析 統計分析は、SPSS (バージョン 21.0 IBM SPSS 統計ソフトウェア、米国ニューヨーク州アーモンク) を使用して実行されます。 カテゴリ変数は、数値 (n) とパーセンテージ (%)、連続変数は正規分布の場合は平均 ± SD、そうでない場合は中央値と四分位範囲として表されます。 正規分布のない必要な変数が変換されます。 P < 0.05 は、統計的に有意であると認められました。 パラメトリック変数とノンパラメトリック変数を分離するために、Shapiro-Wilk 検定が実行されます。 メポリズマブ治療の前後に測定された変数の差を検出するために、パラメトリック変数のペアサンプル T 検定または非パラメトリック変数のウィルコクソン符号順位検定が使用されます。

すべての患者が自分でコントロールできるため、比較アームはありません。 ベースライン時、3 か月ごと、および 52 週間の治療完了後に測定されるベースライン特性 (臨床および実験バイオマーカー) があります。 研究のエンドポイントには、ノンレスポンダーとスーパーレスポンダーの特徴の識別として、これらすべてのバイオマーカーの分析が含まれます。 また、副次評価項目には、方法で評価として言及されているバイオマーカーの評価が含まれます。 統計分析は、52週間の治療期間を完了した患者の数で最初に実行されます。 次に、52 週間の治療を完了していない患者を個別に分析し、最後にこれら 2 つのグループを比較します。

より具体的には、単変量解析 (両側独立サンプル検定) を使用して、治験責任医師は、メポリズマブ治療後の結果と比較したすべてのベースライン結果の間の関連/相関をテストします (治療の 1 年まで 3 か月ごと): 喀痰中および血液中のバイオマーカー、臨床転帰。 同様に、潜在的な交絡因子を特定するために、結果と個人/人口統計学的特性との間の一変量関連性がテストされます。 次に、調整された回帰モデルで有意な関連性がテストされます。 関連付け/相関は、ベースラインの臨床的特徴で個別に評価され、治療中の3か月ごとのフォローアップ、ベースライン、およびメポリズマブ治療の1年後に個別に評価されます。 さらに、治療反応に対するバイオマーカーレベルを特定するために、各バイオマーカーに対してサブグループ化分析が実行されます。

メポリズマブ治療の前後に測定された変数の差を検出するために、パラメトリック変数のペアサンプル T 検定または非パラメトリック変数のウィルコクソン符号順位検定が使用されます。 具体的には、ベースラインでのバイオマーカーのレベルは、メポリズマブ治療の1年後のレベルと比較されます。

各結果の1年間（ベースラインから治療開始後1年まで）の治療に対する全体的な反応は、各患者の従属サンプルのペアテスト（パラメトリックおよびノンパラメトリックペアテスト）で測定されます。 その後、治療に対する反応は、1 年間の転帰の変化 (絶対および変化率) として定義されます。 治験責任医師は、臨床病理学的転帰ごとに重回帰モデルを使用して、バイオマーカーなどの治療への反応 (変化) に影響を与える予測因子を評価します。 研究期間中に被験者ごとに2つ以上の観察結果がある場合、研究者は結果の繰り返し測定を使用して混合モデルを使用します。 すべての検定は、統計的有意水準が 5% の両側検定になります。