重度の喘息患者における好酸球のフローサイトメトリー分析。
重度喘息患者における好酸球活性と膜受容体発現のフローサイトメトリー分析: 生物学的薬物によって誘発される変化の基本的な特徴付けと評価。
調査の概要
詳細な説明
適格基準を満たす被験者は研究に参加するよう求められます。全員が研究の性質、目的についての詳細な説明を受けます。 インフォームドコンセントに署名した後、患者は臨床状態に基づいて 2 つのグループに分けられます: コントロールされた喘息グループ (グループ A) と重度の喘息グループ (グループ B)。 訪問は、一次および二次治療を最適化し、重度の喘息の診断を確認することを目的とした導入期間（3か月）の後、採用時に計画されます。 導入期間の後、患者は再評価され、適切な医学療法が調整されます (T0)。 グループBには、標準ガイドラインに従ってメポリズマブまたはオマリズマブによる治療が施されます。 T0 で、フローサイトメトリーによって好酸球の表現型を評価するために血液サンプル (3ml) が収集されます (下記を参照)。 6 か月後 (T1/2) と 12 か月後 (T1) に患者を再度訪問し、フローサイトメトリー分析のために血液サンプルを採取します。すべてのサンプルは、ベストプラクティスと最新技術に従って適切に保管され、分析のために出荷されます。基準を満たしている場合、サンプル採取から 6 時間以内。 データは GDPR (一般データ保護規則、EU 2016/679) に従って収集および保存されます。 収集された生体物質は指定されたアッセイにのみ使用され、余分な物質は排出されます。
- ベースライン評価 (T'0) 受け入れの場合、インフォームドコンセントに署名した後、参加者はアレルギーや喘息関連の併存疾患を含む完全な病歴を収集するよう求められます。包括的な身体検査と呼吸機能検査は、流量肺活量測定と残気量および DLCO 測定から構成されます。 喘息の最初の診断の場合、気管支拡張薬反応またはメタコリン負荷試験が行われます。 喘息の既往診断がある場合には、診断を確認および証明する過去の検査が収集されます。
- 評価ツール 以下のデータは、T'0、T'1/2 (6 か月)、および T'1 (12 か月) に収集されます。 臨床評価: ACT、オンデマンドまたはレスキュー療法、急性増悪、医療訪問、欠勤、入院。 機能評価: 流量曲線、残留量、Ig E および好酸球の数、FeNO、6 分間の歩行テスト。
- フローサイトメトリー 研究者らは、血液サンプルの操作を最小限に抑え、アーチファクトの可能性を減らすために、全血染色プロトコルを使用して、多色フローサイトメトリーによって好酸球の膜上の分子の発現を評価します。 簡単に説明すると、末梢血サンプルは採取から 6 時間以内に処理されます。 サンプルは処理するまで室温で保管されます。 血液サンプルは、好酸球の表面分子に向けられた蛍光色素結合抗体を使用して染色されます。 特に、研究者らは、他の白血球間の好酸球を識別するために使用される、CD45、CD66、CD15、CD16、および Siglec-8 に対する抗体を使用します。 CD63、CD294 (CRTH2、プロスタグランジン D2 受容体)、CD125 (IL-5 受容体)、CD193 (RANTES、エオタキシン、MCP-3、MIP1α などのいくつかのケモカインの受容体)、および HLA-DR: これらの分子は、以下によって上方制御されます。好酸球が活性化されるため、重度の喘息患者では好酸球の発現が変化する可能性があります。 4℃で30分間インキュベートした後、メーカーの指示に従って、FACS溶解溶液(BD Bioscience)を使用して赤血球を除去します。 サンプルはリン酸緩衝食塩水 (PBS) に再懸濁され、4 つのレーザーを備えた LSRFortessa X-20 (BD Bioscience) フローサイトメーターで取得されます。
研究の種類
入学 (予想される)
段階
- フェーズ 4
連絡先と場所
研究連絡先
- 名前：Simone Scarlata, M.D.
- 電話番号：+393939259912
- メール：s.scarlata@unicampus.it
研究場所
-
-
-
Roma、イタリア、00136
- 募集
- Campus Bio Medico University and Teaching Hospital
-
コンタクト：
- Simone Scarlata, MD
- 電話番号：+393939259912
- メール：s.scarlata@unicampus.it
-
-
参加基準
適格基準
就学可能な年齢
健康ボランティアの受け入れ
受講資格のある性別
説明
包含基準:
- GINAの推奨事項および国際ERS/ATSガイドラインに従って、重度の難治性好酸球性喘息と診断されたことが証明されている。
- この研究に参加することに同意し、インフォームドコンセントに署名すること。
除外基準:
- 現在の喫煙習慣（タバコと電子タバコの両方）、
- 喘息以外の疾患に対して免疫抑制剤、生物学的製剤、または全身性コルチコステロイドの慢性投与を必要とする付随疾患
- -定量的および定性的方法の両方で、好酸球数に直接的または間接的に影響を与えることが知られている、以前のまたは併発した急性または慢性疾患の病歴（好酸球性肺および胃腸疾患、全身性血管炎、アレルギー性気管支肺アスペルギルス症、寄生虫感染症など）
- COPD/喘息の重複。
- インフォームド・コンセントへの署名ができない、または拒否される。
研究計画
研究はどのように設計されていますか？
デザインの詳細
- 主な目的：診断
- 割り当て：ランダム化
- 介入モデル：並列代入
- マスキング：なし（オープンラベル）
武器と介入
参加者グループ / アーム |
介入・治療 |
|---|---|
|
実験的：グループA
抗IL5R抗体で治療されている重度の喘息患者
|
重度のコントロールされていない喘息を患っている被験者は、医師のアドバイスおよび喘息治療の標準化されたプロトコールに従って、オマリズマブ（抗 Ig E 抗体）またはメポリズマブ（抗 IL-5 抗体）による治療に割り当てられます。
|
|
介入なし：グループB
従来の治療法で治療されている重度の喘息患者
|
この研究は何を測定していますか？
主要な結果の測定
結果測定 |
メジャーの説明 |
時間枠 |
|---|---|---|
|
フローサイトメトリーによる活性化関連分子を発現する好酸球の割合の違いの測定
時間枠：12ヶ月
|
活性化された好酸球の存在は、好酸球膜上の CD193、CD63、CD294、CD125、および HLA-DR の発現のフローサイトメトリー分析によって評価されます。 結果は、分子を発現する好酸球の割合 (%) で表されます。 |
12ヶ月
|
|
フローサイトメトリーによる好酸球膜上の活性化マーカー発現量の測定
時間枠：12ヶ月
|
好酸球膜上の活性化関連膜マーカー (CD193、CD63、CD294、CD125、および HLA-DR) はフローサイトメトリーによって評価され、結果は分子の平均蛍光強度 (MFI) として表されます。 MFI は、好酸球膜上で発現される分子の量の尺度です。MFI が高いほど、細胞膜上の分子の密度が高くなります。 値は、サンプルを陰性 (未染色) コントロールと比較して、機器によって定義された任意単位 (AU) として表されます。 |
12ヶ月
|
二次結果の測定
結果測定 |
メジャーの説明 |
時間枠 |
|---|---|---|
|
活性化された好酸球の表現型と疾患の進行との相関関係
時間枠：12ヶ月
|
統計分析は、好酸球上の活性化マーカーの発現（主要結果1および2に記載）と、流量曲線、残存量、Ig Eおよび好酸球数によって評価される患者の臨床状態との間の可能性のある相関関係を定義するために使用されます。 , 6分間のウォーキングテスト。
|
12ヶ月
|
|
生物学的治療を受けた患者グループにおける活性化好酸球の割合の変化。
時間枠：12ヶ月
|
好酸球のフローサイトメトリー分析は、IL-5 または IL-5R に対する抗体による 1 年間の治療の前後に実行されます。
活性化された好酸球の割合は、主要結果に記載されているように測定されます。
|
12ヶ月
|
協力者と研究者
スポンサー
研究記録日
主要日程の研究
研究開始 (実際)
一次修了 (予想される)
研究の完了 (予想される)
試験登録日
最初に提出
QC基準を満たした最初の提出物
最初の投稿 (実際)
学習記録の更新
投稿された最後の更新 (実際)
QC基準を満たした最後の更新が送信されました
最終確認日
詳しくは
この情報は、Web サイト clinicaltrials.gov から変更なしで直接取得したものです。研究の詳細を変更、削除、または更新するリクエストがある場合は、register@clinicaltrials.gov。 までご連絡ください。 clinicaltrials.gov に変更が加えられるとすぐに、ウェブサイトでも自動的に更新されます。