非アルコール性脂肪性肝炎を治療するためのシンバイオティクスと糞便微生物叢移植 (SYNCH)

主な目的 A. soehngenii および低温殺菌された A. muciniphila と B. animalis subsp. NASH および NASH 線維症患者の NASH を減少させるための、コンディショニングされたビーガン凍結乾燥糞便微生物叢移植 (LFMT) カプセルの有無にかかわらず、ラクチスおよびフルクトオリゴ糖。

副次的な目的 A. soehngenii および低温殺菌された A. muciniphila と B. animalis subsp. NASH および NASH 線維症患者の NASH の減少における、コンディショニングされたビーガン LFMT カプセルの有無にかかわらず、lactis および FOS。

研究デザイン:

二重盲検ランダム化プラセボ対照介入研究。

調査対象母集団：

生検で証明されたNASHを有する18〜75歳の患者は、2人の肝臓病理学者のタンデムリーディングに基づいて、スクリーニングの最大32週間前に得られました：SAF脂肪症スコア≧1、活動≧2、線維症<4。参加者の 50% は、NASH CRN 線維症ステージング システムに従って、少なくとも NASH 線維症ステージ 1、2、または 3 を持っている必要があります。

除外基準は次のとおりです。 スクリーニング前の 1 年以内に 3 か月以上連続して相当量のアルコールを消費した現在または過去の履歴（相当量のアルコール消費は、女性の場合は 1 日あたり 2 単位以上、男性の場合は 1 日あたり 3 国際単位以上と定義されます） 、平均で、1国際単位には±14グラムのアルコールが含まれています）、肝硬変または肝細胞癌、B型および/またはC型肝炎、自己免疫性肝炎、ウィルソン病、原発性硬化性胆管炎、原発性胆汁性胆管炎、α-1アンチトリプシン欠乏症およびヘモクロマトーシス、肝移植の歴史、肝移植リストへの現在の配置、プレ、プロまたはシンバイオティクスの使用、無作為化の3か月前の全身抗生物質の使用、タモキシフェン、メトトレキサートまたはアミオダロンの使用、以前または計画された肥満手術、 -アクティブなGLP-1受容体アゴニスト治療を伴う真性糖尿病、出血性疾患、スクリーニング時のプロトロンビン時間の国際正規化比（INR）> 1.4または血小板数<50 109 / L、一時的に中止できない抗血小板/凝固療法の使用、 -スクリーニング前の6か月以内の主要な心血管イベント（例： 心筋梗塞、脳血管障害など）、免疫力低下の長期化（例： -最近の細胞傷害性化学療法、CD4数が240未満のHIV感染）、浸潤性悪性腫瘍の活動中または以前の病歴（治癒的に治療された上皮内癌[子宮頸部など]または非黒色腫皮膚癌を除く）完全な寛解が達成されない限り、手術-治験責任医師の意見による軽度の外科的処置、妊娠中または授乳中の女性、治験責任医師の意見では、参加者の安全またはプロトコルの遵守を危険にさらす可能性のある状態、および別の付随する臨床への参加を除く、試験期間に予定されているトライアル。

合計 48 人の患者が、A. soehngenii、低温殺菌された A. muciniphila、B. animalis subsp. lactis とフルクトオリゴ糖、および FMT またはプラセボによる治療に 1:1 で無作為化され、プロトンポンプ阻害剤の使用、メトホルミンの使用、および組織病理学的線維症スコアで層別化されます。

介入：

レシピエント参加者 最初の FMT の 3 日前から研究が完了するまで、すべてのレシピエント参加者は 5 g FOS の経口 1 日 1 回投与を受ける。 その後、参加者は無駄のないドナー FMT カプセル (WholeFiber で調整されたドナー) またはプラセボ (ブラインド デザイン) に無作為に割り付けられます 1。

ベースライン (0 日目)、8 週目 (56 日目)、16 週目 (112 日目) に、参加者は 21 個の LFMT またはプラセボ カプセルを摂取します。 研究訪問は 8 週間間隔で行われますが、参加者のスケジュールと空き状況を考慮して、-3 日から +3 日のマージンが実装されます。 さらに、参加者は、全研究期間中 (24 週間)、毎日 2 カプセルの LFMT またはプラセボを服用します。

研究者は、レシピエントの腸内細菌叢組成がドナー FMT1 の 8 ～ 12 週間後まで影響を受けることを以前に観察したため、この時間枠は研究中の安定したドナー腸内細菌叢組成を保証します。

24 週間の介入期間中、すべての参加者は 109 A. soehngenii CH-106 細胞 (毒物学研究を含む以前の研究に基づく投与量) の毎日の投与量を摂取します 2,3, 1010 B. animalis subsp. lactis BLC1 (Sacco SRL によってプロバイオティクスとして販売されているよく研究された菌株) および 3x1010 低温殺菌された A. muciniphila ATCC BAA-835T 細胞 (投与量は EFSA 承認に基づき、A-Mansia Biotech から入手)。

経皮的肝生検は、参加者が理論的に参加資格がある場合、スクリーニングの一環として実施されます。 他の結果を知らされていない2人の肝臓病理学者によるタンデム読み取りにより、患者が研究に含まれるかどうかが決定されます。 24 週目に、FMT の効果を調べるために別の肝生検が行われ、2 人の肝臓病理学者によって再検討されます (ここでも他の結果は知らされていません)。 NASH-CRN分類は、脂肪症、炎症、バルーニングについてはH&Eスライドで評価され、線維症の評価についてはシリウスレッド染色スライドで評価されます。 RNAシーケンス用のRNAが分離されます。

差次的遺伝子発現は、経時的に (ベースラインおよび 24 週間) および治療の割り当て (ビーガン ドナー FMT 対 プラセボ) によって評価されます。

腸内細菌叢の変化を調べるために、ベースライン時、および 2、8、10、16、18、および 24 週後に糞便を採取します。 また、腸のバリア機能のマーカーが評価されます。

ベースライン時と8、16、24週目に血液を採取して、一般的な肝臓酵素、血糖コントロールの指標、脂質、一般的およびよりNASHに固有の炎症パラメーターを調査します。

肝臓のマルチパラメータ MRI (MRI-PDFF、MR エラストグラフィー、補正 T1) および内臓脂肪と皮下脂肪のマルチパラメータ MRI は、ベースライン時と 24 週間後に実行され、内臓脂肪組織と皮下脂肪組織の蓄積量、肝脂肪含有量、肝線維症を推定します。炎症。

ベースラインの前の週、1、9、17、および 25 週の連続する 1 週間 (7 日間) に、ポータブル デバイスを使用して自宅で連続的なグルコース測定を行います。

ビーガンドナー

糞便ドナーのサンプルを収集し、凍結乾燥 (「凍結乾燥」) し、カプセル化します (段落 6.8 を参照)。 その後、LFMTカプセルは-80°Cで保存されます。 ドナーは、感染症について広範囲にスクリーニングされます。

一次結果

A. soehngenii が低温殺菌された A. muciniphila および B. animalis subsp. lactis、FOS、コンディショニング ビーガン LFMT カプセルは、NASH および線維症ステージ 0 ～ 3 の個人の肝臓組織学の改善によって定義されるように、NASH を減少させます。または 1 段階以上の肝線維症の改善および脂肪性肝炎の悪化なし。

副次的転帰

組み合わせた治療が改善することを実証するには：

• NAFLD の非侵襲的アウトカム、すなわち、肝臓および周囲の皮下脂肪組織のマルチパラメータ MRI (MRI-PDFF、MR エラストグラフィ、補正 T1)、FibroScan エラストグラフィおよび制御減衰パラメータ、および血漿パネル 強化肝線維症 (ELF) パネル、pro-C3 .
• ベースラインから治療終了までの血液マーカーの変化、すなわち：肝酵素（すなわち アラニンアミノトランスフェラーゼ（ALT）、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（AST）、ガンマグルタミルトランスフェラーゼ（GGT）、アルカリホスファターゼ（ALP））、炎症性血液マーカー（すなわち 白血球、単球、CRP、Il-1(β)、Il-6、Il-11、Il-17、Il-32、TNF-α、IFN-γ、その他の炎症マーカー)、SCFA (すなわち プロピオン酸、酪酸、酢酸)、乳酸、エタノール、血漿脂質 (すなわち LDL、HDL、トリグリセリド、総コレステロール)、アルブミン、クレアチニン、ヘモグロビン、FGF-21、アディポネクチン、レプチン、リポ多糖類、エストロゲン、ビタミン B12、葉酸、ゾヌリン、およびその他のメタボロミクスおよびリポドミーの結果。
• マイクロバイオームの読み取り (組成、生着、ひずみ追跡) および代謝物、糞便 SCFA 組成、および糞便アルブミン。
• 血糖コントロール、インスリン抵抗性、体重/BMI、胴囲、体脂肪率
• MetSy基準 / %
• SCFAの生産とGLP1のリリース
• 肝臓遺伝子発現プロファイル: 脂質生成、炎症および線維形成経路。
• 肝臓の病理学、組織病理学的特徴、免疫蛍光および病態生理学的タンパク質の評価。
• 深層学習アルゴリズムを使用して評価した NAFLD 組織学は、肝生検のスライド全体の画像をスコアリングします。
• 継続的なブドウ糖モニタリング (4 x 7 日間連続)
• 生活の質（一般（SF36）およびNAFLD / NASH固有（CDLQ-NAFLD））。