비알코올성 지방간염 치료를 위한 신바이오틱스와 분변 미생물 이식 (SYNCH)

주요 목적 A. soehngenii 및 저온 살균된 A. muciniphila와 B. animalis subsp. NASH 및 NASH-섬유증 환자의 NASH를 감소시키기 위한 컨디셔닝된 비건 동결건조 분변 미생물군 이식(LFMT) 캡슐이 있거나 없는 락티스 및 프럭토-올리고당.

이차 목적 A. soehngenii 및 저온 살균된 A. muciniphila와 B. animalis subsp. NASH 및 NASH-섬유증 환자의 NASH 감소에 있어 컨디셔닝된 비건 LFMT 캡슐이 있거나 없는 lactis 및 FOS.

연구 설계:

이중 맹검 무작위 위약 대조 중재 연구.

연구 인구:

18~75세 사이의 생검으로 입증된 NASH가 있는 환자는 2명의 전문 간 병리학자의 탠덤 판독을 기준으로 스크리닝 전 최대 32주 전에 획득했습니다. SAF 지방증 점수 ≥1, 활동성 ≥2, 섬유증 <4; 참가자의 50%는 NASH CRN 섬유증 병기 결정 시스템에 따라 NASH 섬유증 1, 2 또는 3기 이상이어야 합니다.

제외 기준은 다음과 같습니다: 스크리닝 전 1년 이내에 연속 3개월 이상 상당한 알코올 소비의 현재 또는 과거력(상당한 알코올 소비는 여성의 경우 2단위/일 이상, 남성의 경우 3국제 단위/일 이상으로 정의됩니다. , 평균; 1 국제 단위에는 ±14g의 알코올이 포함되어 있음), 간경화 또는 간세포 암종, B형 및/또는 C형 간염, 자가 면역 간염, 윌슨병, 원발성 경화성 담관염, 원발성 담즙성 담관염, 알파-1-항트립신 결핍증 및 혈색소침착증, 간 이식 이력, 현재 간 이식 목록에 배치, 사전, 프로 또는 신바이오틱스 사용, 무작위 배정 3개월 전 전신 항생제 사용, 타목시펜, 메토트렉세이트 또는 아미오다론 사용, 이전 또는 계획된 비만 수술, 활성 GLP-1 수용체 작용제 치료를 받는 진성 당뇨병, 출혈 장애, 스크리닝 시 프로트롬빈 시간 >1.4 또는 혈소판 수 <50 109/L의 INR(International Normalized Ratio), 일시적으로 중단할 수 없는 항혈소판/응고제 요법 사용, 스크리닝 전 6개월 이내의 주요 심혈관 사건(예: 심근 경색, 뇌혈관 사고), 장기간 손상된 면역(예: 최근 세포 독성 화학 요법, CD4 수가 240 미만인 HIV 감염), 활동성 또는 침습성 악성 종양의 이전 병력(근치적으로 치료된 제자리 암종[예: 자궁경부] 또는 비흑색종 피부암 제외), 완전한 관해가 달성되지 않은 경우, 수술 시험 기간 동안 예정된 시험자, 임산부 또는 수유부의 의견에 따른 경미한 수술 절차, 시험자의 의견에 참가자의 안전 또는 프로토콜 준수를 위태롭게 할 수 있는 모든 상태 및 다른 수반되는 임상에 참여하는 경우를 제외하고 재판.

총 48명의 환자가 A. soehngenii, 저온 살균된 A. muciniphila, B. animalis subsp. lactis 및 fructo-oligosaccharides, 양성자 펌프 억제제 사용, 메트포르민 사용 및 조직병리학적 섬유증 점수에 대해 층화되어 FMT 또는 위약 치료에 1:1로 무작위 배정됩니다.

간섭:

수혜자 참가자 첫 번째 FMT 전 -3일부터 연구가 완료될 때까지 모든 수혜자 참가자는 5g FOS의 경구 일일 단일 용량을 받게 됩니다. 그 후, 참가자는 희박 기증자 FMT 캡슐(WholeFiber로 조절된 기증자) 또는 위약(맹검 설계)1으로 무작위 배정됩니다.

기준선(0일)과 8주(56일) 및 16주(112일)에 참가자는 21개의 LFMT 또는 위약 캡슐을 섭취합니다. 연구 방문은 8주 간격으로 이루어지지만 참가자 일정 및 가용성을 고려하기 위해 -3일에서 +3일의 여유가 구현됩니다. 또한 참가자는 전체 연구 기간(24주) 동안 매일 2캡슐의 LFMT 또는 위약을 복용합니다.

연구자들은 이전에 수혜자의 장내 미생물 구성이 기증자 FMT1 후 최대 8-12주까지 영향을 받는 것을 관찰했으며, 따라서 이 시간 창은 연구 중에 안정적인 기증자 장내 미생물 구성을 보장합니다.

24주 개입 기간 동안 모든 참가자는 109 A. soehngenii CH-106 세포(독성학 연구를 포함한 이전 연구를 기반으로 한 용량)2,3, 1010 B. animalis subsp. lactis BLC1(Sacco SRL에서 프로바이오틱으로 판매하는 잘 연구된 균주) 및 3x1010 저온 살균된 A. muciniphila ATCC BAA-835T 세포(EFSA 승인을 기반으로 하고 A-Mansia Biotech에서 입수한 용량).

경피적 간 생검은 이전 36주 동안 간 생검을 수행하지 않은 경우 참가자가 이론적으로 참여 자격이 있을 때 스크리닝의 일부로 수행됩니다. 다른 결과에 대해 눈이 먼 두 명의 간 병리학자가 탠덤 판독하여 환자가 연구에 포함될지 여부를 결정합니다. 24주에 FMT의 효과를 검사하기 위해 또 다른 간 생검을 실시할 것이며, 이는 또한 2명의 간 병리학자에 의해 검토될 것입니다(다른 결과는 다시 눈이 멀게 됨). NASH-CRN 분류는 지방증, 염증 및 팽창에 대해 H&E 슬라이드에서 평가되고 섬유증 평가를 위해 시리우스 레드로 염색된 슬라이드로 평가됩니다. RNA 시퀀싱을 위한 RNA가 분리됩니다.

차등 유전자 발현은 시간 경과(기준선 및 24주) 및 치료 할당(채식 기증자 FMT 대 위약)에 따라 평가될 것입니다.

장내 마이크로바이옴의 변화를 조사하기 위해 베이스라인과 2주, 8주, 10주, 16주, 18주 및 24주 후에 배설물을 수집합니다. 또한, 소화관 장벽 기능의 마커가 평가될 것입니다.

기준선과 8주, 16주 및 24주에 혈액을 채취하여 일반적인 간 효소, 혈당 조절 지표, 지질, 일반 및 NASH 특정 염증 매개변수를 조사합니다.

간(MRI-PDFF, MR 탄성촬영술, 교정된 T1) 및 내장 및 피하 지방의 다변수 MRI는 기준선과 24주 후에 수행되어 내장 및 피하 지방 조직 저장소 부피, 간 지방 함량 및 간 섬유증 및 염증.

기준선 이전 주, 1주, 9주, 17주 및 25주 연속 1주(7일) 동안 휴대용 장치를 사용하여 집에서 지속적인 혈당 측정을 수행합니다.

비건 기증자

배설물 기증자 샘플을 수집하고 동결건조('동결건조')하고 캡슐에 넣습니다(6.8항 참조). 그 후 LFMT 캡슐은 -80°C에서 보관됩니다. 기증자는 전염병에 대해 광범위하게 선별됩니다.

주요 결과

A. soehngenii가 저온살균된 A. muciniphila 및 B. animalis subsp. lactis, FOS 및 컨디셔닝된 비건 채식 LFMT 캡슐은 NASH 및 섬유증 단계 0-3이 있는 개인의 간 조직학 개선으로 정의된 NASH를 감소시키며, 개선은 지방간염이 ≥1 SAF-A 포인트 감소하고 간 섬유증 악화 없음으로 정의됩니다. 또는 ≥ 1단계 간 섬유증의 개선 및 지방간염의 악화 없음.

이차 결과

병용 치료가 개선됨을 입증하려면:

• NAFLD의 비침습적 결과, 즉 간 및 주변 피하 지방 조직의 다중 매개변수 MRI(MRI-PDFF, MR 탄성 조영술, 교정된 T1), FibroScan Elastography 및 Controlled Attenuation Parameters, 플라즈마 패널 ELF(Enhanced Liver Fibrosis) 패널, pro-C3 .
• 기준선에서 치료 종료까지 혈액 마커의 변화, 즉 간 효소(즉, 알라닌 아미노 전이 효소(ALT), 아스파르테이트 아미노 전이 효소(AST), 감마 글루타밀 전이 효소(GGT), 알칼리 포스파타제(ALP)), 염증성 혈액 표지자(예: 백혈구, 단핵구, CRP, Il-1(β), Il-6, Il-11, Il-17, Il-32, TNF-α, IFN-γ, 기타 염증 마커), SCFA(즉, 프로피오네이트, 부티레이트, 아세테이트), 젖산염, 에탄올, 혈장 지질(예: LDL, HDL, 트리글리세리드, 총 콜레스테롤), 알부민, 크레아티닌, 헤모글로빈, FGF-21, 아디포넥틴, 렙틴, 리포다당류, 에스트로겐, 비타민 B12, 엽산, 조눌린 및 기타 대사 및 리포도믹 결과.
• 마이크로바이옴 판독(구성, 생착, 균주 추적) 및 대사물, 분변 SCFA-구성 및 분변 알부민.
• 혈당 조절, 인슐린 저항성, 체중/BMI, 허리둘레 및 체지방률
• MetSy 기준 / %
• SCFA 생산 및 GLP1 출시
• 간 유전자 발현 프로필: 지방 생성, 염증 및 섬유화 경로.
• 간 병리학, 조직병리학적 특징, 면역형광법 및 병태생리학적 단백질 평가.
• 간 생검의 전체 슬라이드 이미지를 점수화하는 심층 학습 알고리즘으로 평가된 NAFLD 조직학.
• 지속적인 포도당 모니터링(4x 7일 연속)
• 삶의 질(일반(SF36) 및 NAFLD/NASH 특정(CDLQ-NAFLD)).