Synbiotika og fekal mikrobiotatransplantasjon for å behandle ikke-alkoholisk Steatohepatitt (SYNCH)

Hovedmål Å undersøke det terapeutiske potensialet til A. soehngenii og pasteurisert A. muciniphila kombinert med B. animalis subsp. laktis og frukto-oligosakkarider med og uten kondisjonert vegansk lyofilisert fekal mikrobiota transplantasjon (LFMT) kapsler for å redusere NASH hos pasienter med NASH og NASH-fibrose.

Sekundært mål Å undersøke mekanismene til A. soehngenii og pasteurisert A. muciniphila kombinert med B. animalis subsp. lactis og FOS med og uten kondisjonerte veganske LFMT-kapsler for å redusere NASH hos pasienter med NASH og NASH-fibrose.

Studere design:

Dobbeltblind randomisert placebokontrollert intervensjonsstudie.

Studiepopulasjon:

Pasienter mellom 18-75 år med biopsi-påvist NASH oppnådd opptil 32 uker før screening basert på tandemavlesning av to ekspert leverpatologer: SAF Steatose score ≥1, Aktivitet ≥2, Fibrose <4; 50 % av deltakerne bør minst ha NASH fibrose stadium 1, 2 eller 3 i henhold til NASH CRN fibrose staging system.

Eksklusjonskriterier er: Nåværende eller historie med betydelig alkoholforbruk i en periode på mer enn 3 påfølgende måneder innen 1 år før screening (betydelig alkoholforbruk er definert som mer enn 2 enheter/dag for kvinner og mer enn 3 internasjonale enheter/dag for menn , i gjennomsnitt; 1 internasjonal enhet inneholder ±14 gram alkohol), levercirrhose eller hepatocellulært karsinom, hepatitt B og/eller C, autoimmun hepatitt, Wilsons sykdom, primær skleroserende kolangitt, primær biliær kolangitt, alfa-1-antitripsin-mangel og hemokromatose, historie med levertransplantasjon, nåværende plassering på en levertransplantasjonsliste, bruk av pre-, pro- eller synbiotika, bruk av systemiske antibiotika 3 måneder før randomisering, bruk av tamoxifen, metotreksat eller amiodaron, tidligere eller planlagt fedmekirurgi, diabetes mellitus med aktiv GLP-1-reseptoragonistbehandling, blødningsforstyrrelse, International normalized ratio (INR) av protrombintid >1,4 eller blodplateantall <50 109/L ved screening, bruk av antiblodplate-/koagulantbehandling som ikke kan seponeres midlertidig, evt. større kardiovaskulær hendelse innen 6 måneder før screening (f.eks. hjerteinfarkt, cerebrovaskulær ulykke), langvarig svekket immunitet (f.eks. nylig cytotoksisk kjemoterapi, HIV-infeksjon med CD4-tall < 240), aktiv eller tidligere invasiv malignitet (bortsett fra kurativt behandlede in situ karsinomer [f.eks. cervix] eller ikke-melanom hudkreft) med mindre en fullstendig remisjon ble oppnådd, kirurgi planlagt for utprøvingsperioden, bortsett fra mindre kirurgiske prosedyrer etter etterforskerens oppfatning, gravide eller ammende kvinner, enhver tilstand som etter etterforskerens mening kan sette deltakernes sikkerhet eller overholdelse av protokollen i fare, og deltakelse i en annen samtidig klinisk prøve.

Totalt 48 pasienter vil få synbiotisk behandling med A. soehngenii, pasteurisert A. muciniphila, B. animalis subsp. laktis og frukto-oligosakkarider, og vil bli randomisert 1:1 til behandling med FMT eller placebo, stratifisert for bruk av protonpumpehemmere, metforminbruk og histopatologisk fibrose-score.

Innblanding:

Mottakerdeltakere Fra dag -3 før første FMT til fullføring av studien vil alle mottakerdeltakere få en oral daglig enkeltdose på 5 g FOS. Deretter vil deltakerne randomiseres til magre donor FMT-kapsler (donorer kondisjonert med WholeFiber) eller placebo (blind design)1.

Ved baseline (dag 0) og ved uke 8 (dag 56) og uke 16 (dag 112) vil deltakerne innta 21 LFMT- eller placebokapsler. Studiebesøkene vil være med 8 ukers mellomrom, selv om en margin på -3 dager til +3 dager er implementert for å ta hensyn til deltakernes tidsplan og tilgjengelighet. I tillegg vil deltakerne daglig ta 2 kapsler LFMT eller placebo i løpet av hele studieperioden (24 uker).

Etterforskerne har tidligere observert at tarmmikrobiotasammensetningen hos mottakeren påvirkes opptil 8-12 uker etter donor FMT1, så dette tidsvinduet sikrer en stabil donortarmmikrobiotasammensetning under studien.

I løpet av den 24-ukers intervensjonsperioden vil alle deltakerne ta daglige doser av 109 A. soehngenii CH-106-celler (dosering basert på tidligere studier inkludert toksikologisk studie)2,3, 1010 B. animalis subsp. lactis BLC1 (en godt studert stamme markedsført som et probiotikum av Sacco SRL) og 3x1010 pasteuriserte A. muciniphila ATCC BAA-835T-celler (dosering basert på EFSA-godkjenning og hentet fra A-Mansia Biotech).

Perkutane leverbiopsier vil bli utført som en del av screeningen når deltakerne er teoretisk kvalifisert for deltakelse, med mindre en leverbiopsi har blitt utført de siste 36 ukene. En tandem-lesing av to leverpatologer blindet for et hvilket som helst annet resultat vil avgjøre om pasienter vil bli inkludert i studien. Ved 24 uker vil en ny leverbiopsi bli utført for å undersøke effekten av FMT, som også vil bli vurdert av to leverpatologer (igjen blindet for ethvert annet resultat). NASH-CRN-klassifiseringen vil bli vurdert på H&E-glass, for steatose, betennelse og ballongdannelse, og med et Sirius rødfarget objektglass for evaluering av fibrose. RNA for RNA-sekvensering vil bli isolert.

Differensielt genuttrykk vil bli vurdert over tid (baseline og 24 uker) og ved behandlingstildeling (vegansk donor FMT versus placebo).

Avføring vil bli samlet ved baseline, og etter uke 2, 8, 10, 16, 18 og 24, for å undersøke endringene i tarmmikrobiom. Markører for tarmbarrierefunksjon vil også bli vurdert.

Blod vil bli samlet ved baseline og ved 8, 16 og 24 uker for å undersøke vanlige leverenzymer, indikatorer for glykemisk kontroll, lipider og generelle og mer NASH-spesifikke betennelsesparametere.

En multiparametrisk MR av lever (MRI-PDFF, MR elastografi, korrigert T1) og av visceralt og subkutant fett vil bli utført ved baseline og etter 24 uker for å estimere visceralt og subkutant fettvevsdepotvolum, leverfettinnhold samt leverfibrose og betennelse.

Kontinuerlige glukosemålinger vil bli utført hjemme ved bruk av bærbare enheter, i løpet av en sammenhengende periode på 1 uke (7 dager) i uken før baseline, uke 1, 9, 17 og 25.

Veganske givere

Avføringsdonorprøvene vil bli samlet inn, frysetørket ('frysetørket') og innkapslet (se avsnitt 6.8). Deretter vil LFMT-kapslene oppbevares ved -80°C. Donorer vil bli grundig screenet for smittsomme sykdommer.

Primært resultat

For å demonstrere at A. soehngenii kombinert med pasteurisert A. muciniphila og B. animalis subsp. lactis, FOS og kondisjonerte veganske LFMT-kapsler reduserer NASH som definert av en forbedring av leverens histologi hos individer med NASH og fibrose stadium 0-3, med forbedring definert som reduksjon av steatohepatitt med ≥1 SAF-A-punkt og ingen forverring av leverfibrose, eller bedring i ≥ 1 stadium leverfibrose og ingen forverring av steatohepatitt.

Sekundære utfall

For å demonstrere at den kombinerte behandlingen forbedrer:

• ikke-invasive utfall av NAFLD, dvs. multiparametrisk MR av lever og omgivende subkutant fettvev (MRI-PDFF, MR elastografi, korrigert T1), FibroScan Elastography og kontrollerte attenuasjonsparametre, og plasmapanel Enhanced Liver Fibrosis (ELF) panel, pro-C3 .
• endring i blodmarkører fra baseline til slutten av behandlingen, nemlig: leverenzymer (dvs. alanin amino transferase (ALT), aspartat amino transferase (AST), gamma glutamyl transferase (GGT), alkalisk fosfatase (ALP)), inflammatoriske blodmarkører (dvs. leukocytter, monocytter, CRP, Il-1(β), Il-6, Il-11, Il-17, Il-32, TNF-α, IFN-y, andre inflammatoriske markører), SCFA (dvs. propionat, butyrat, acetat), laktat, etanol, plasmalipider (dvs. LDL, HDL, triglyserider, totalt kolesterol), albumin, kreatinin, hemoglobin, FGF-21, adiponectin, leptin, lipopolysakkarider, østrogen, vitamin B12, folatsyre, zonulin og andre metabolomiske og lipodomiske utfall.
• mikrobiomavlesninger (sammensetning, engraftment, stammesporing) og metabolitter, fekal SCFA-sammensetning og fekal albumin.
• glykemisk kontroll, insulinresistens, kroppsvekt/BMI, midjeomkrets og prosent kroppsfett
• MetSy-kriterier / %
• SCFA-produksjon og GLP1-utgivelse
• levergenekspresjonsprofil: lipogene, inflammatoriske og fibrogene veier.
• leverpatologi, histopatologiske trekk, immunfluorescens og vurdering av patofysiologiske proteiner.
• NAFLD-histologi som vurdert med en dypt innlært algoritme som scorer hele lysbildebilder av leverbiopsier.
• Kontinuerlig glukoseovervåking (4x 7 dager på rad)
• livskvalitet (generell (SF36) og NAFLD/NASH-spesifikk (CDLQ-NAFLD)).