Synbiootit ja ulosteen mikrobiston siirto alkoholittoman steatohepatiitin hoitoon (SYNCH)

Päätavoite Tutkia A. soehngeniin ja pastöroidun A. muciniphilan terapeuttista potentiaalia yhdistettynä B. animalis subsp. lactis ja frukto-oligosakkarideja sekä vegaanisten lyofilisoitujen ulosteen mikrobiotasiirtojen (LFMT) kapseleiden kanssa ja ilman niitä vähentämään NASH:ta potilailla, joilla on NASH ja NASH-fibroosi.

Toissijainen tavoite Tutkia A. soehngeniin ja pastöroidun A. muciniphilan mekanismeja yhdistettynä B. animalis subsp. lactis ja FOS käsitellyillä vegaanisilla LFMT-kapseleilla ja ilman niitä NASH:n vähentämisessä potilailla, joilla on NASH ja NASH-fibroosi.

Opintojen suunnittelu:

Kaksoissokko satunnaistettu lumekontrolloitu interventiotutkimus.

Tutkimuspopulaatio:

18–75-vuotiaat potilaat, joilla on biopsialla todistettu NASH, jotka on saatu enintään 32 viikkoa ennen seulontaa kahden asiantuntijan maksapatologin tandemlukeman perusteella: SAF-steatoosipistemäärä ≥1, aktiivisuus ≥2, fibroosi <4; 50 %:lla osallistujista tulee olla vähintään NASH-fibroosin vaihe 1, 2 tai 3 NASH CRN -fibroosin määritysjärjestelmän mukaan.

Poissulkemiskriteerit ovat: Nykyinen tai historiallinen merkittävä alkoholinkäyttö yli 3 peräkkäisen kuukauden ajan 1 vuoden sisällä ennen seulontaa (merkittävä alkoholinkulutus määritellään yli 2 yksikköä/vrk naisilla ja yli 3 kansainvälistä yksikköä/vrk miehillä keskimäärin; 1 kansainvälinen yksikkö sisältää ±14 grammaa alkoholia), maksakirroosi tai hepatosellulaarinen syöpä, hepatiitti B ja/tai C, autoimmuunihepatiitti, Wilsonin tauti, primaarinen sklerosoiva kolangiitti, primaarinen sapen kolangiitti, alfa-1-antitripsiinin puutos ja hemokromatoosi, maksansiirtohistoria, maksansiirtolistalle sijoittuminen, pre-, pro- tai synbioottien käyttö, systeemisten antibioottien käyttö 3 kuukautta ennen satunnaistamista, tamoksifeenin, metotreksaatin tai amiodaronin käyttö, aikaisempi tai suunniteltu bariatrinen leikkaus, diabetes mellitus aktiivisella GLP-1-reseptoriagonistihoidolla, verenvuotohäiriö, protrombiiniajan kansainvälinen normalisoitu suhde (INR) >1,4 tai verihiutaleiden määrä <50 109/l seulonnassa, verihiutaleiden/koagulanttihoidon käyttö, jota ei voida väliaikaisesti keskeyttää, mikä tahansa vakava sydän- ja verisuonitapahtuma 6 kuukauden sisällä ennen seulontaa (esim. sydäninfarkti, aivoverenkiertohäiriö), pitkäkestoinen heikentynyt immuniteetti (esim. äskettäinen sytotoksinen kemoterapia, HIV-infektio, jonka CD4-luku on < 240), aktiivinen tai aiempi invasiivinen pahanlaatuinen kasvain (paitsi parantavasti hoidetut in situ -karsinoomat [esim. kohdunkaulan] tai ei-melanooma-ihosyöpä), ellei täydellistä remissiota ole saavutettu, leikkaus suunniteltu kokeen kestoajalle, lukuun ottamatta tutkijan mielestä pieniä kirurgisia toimenpiteitä, raskaana olevia tai imettäviä naisia, kaikkia tiloja, jotka tutkijan näkemyksen mukaan voivat vaarantaa osallistujien turvallisuuden tai tutkimussuunnitelman noudattamisen, ja osallistumista toiseen samanaikaiseen kliiniseen oikeudenkäyntiä.

Yhteensä 48 potilasta saa synbioottista hoitoa A. soehngeniilla, pastöroidulla A. muciniphilalla, B. animalis subsp. lactis ja frukto-oligosakkaridit, ja satunnaistetaan 1:1-hoitoon FMT- tai lumelääkehoitoon, kerrostetaan protonipumpun estäjien käytön, metformiinin käytön ja histopatologisen fibroosin pisteytyksen mukaan.

Interventio:

Vastaanottajaosallistujat Päivästä -3 ennen ensimmäistä FMT:tä tutkimuksen päättymiseen asti kaikki vastaanottajat saavat 5 g:n FOS:n suun kautta päivittäisen kerta-annoksen. Myöhemmin osallistujat satunnaistetaan laihaan luovuttaja-FMT-kapseleihin (WholeFiberillä käsitellyt luovuttajat) tai lumelääkettä (sokkoutettu suunnittelu)1.

Lähtötilanteessa (päivä 0) ja viikolla 8 (päivä 56) ja viikolla 16 (päivä 112) osallistujat nielevät 21 LFMT- tai lumekapselia. Opintovierailut ovat 8 viikon välein, vaikka osallistujien aikataulun ja saatavuuden huomioon ottamiseksi toteutetaan marginaali -3 päivää +3 päivää. Lisäksi osallistujat ottavat päivittäin 2 kapselia LFMT:tä tai lumelääkettä koko tutkimusjakson ajan (24 viikkoa).

Tutkijat ovat aiemmin havainneet, että vastaanottajan suoliston mikrobiotakoostumukseen vaikuttaa jopa 8-12 viikkoa luovuttajan FMT1:n jälkeen, joten tämä aikaikkuna varmistaa vakaan luovuttajan suoliston mikrobiston koostumuksen tutkimuksen aikana.

24 viikon interventiojakson aikana kaikki osallistujat ottavat päivittäisen annoksen 109 A. soehngenii CH-106 -solua (annos perustuu aikaisempiin tutkimuksiin, mukaan lukien toksikologinen tutkimus)2,3, 1010 B. animalis subsp. lactis BLC1 (hyvin tutkittu kanta, jota Sacco SRL markkinoi probioottina) ja 3 x 1010 pastöroitua A. muciniphila ATCC BAA-835T -solua (annostus perustuu EFSA:n hyväksyntään ja hankittu A-Mansia Biotechilta).

Perkutaaniset maksabiopsiat tehdään osana seulontaa, kun osallistujat ovat teoriassa osallistumiskelpoisia, ellei maksabiopsiaa ole tehty edellisten 36 viikon aikana. Kahden maksapatologin tandem-lukeminen, joka on sokaissut muille tuloksille, määrittää, otetaanko potilaat mukaan tutkimukseen. Viikon 24 kohdalla suoritetaan toinen maksabiopsia FMT:n vaikutuksen tutkimiseksi, ja myös kaksi maksapatologia (jälleen sokeutuneena muille tuloksille) tarkastelee sitä. NASH-CRN-luokitus arvioidaan H&E-laseilla, steatoosin, tulehduksen ja ilmapallon muodostumisen varalta, ja Sirius-punaiseksi värjättyllä objektilaseilla fibroosin arvioimiseksi. RNA RNA-sekvensointia varten eristetään.

Erilaista geenin ilmentymistä arvioidaan ajan kuluessa (perustilanne ja 24 viikkoa) ja hoidon allokoinnin mukaan (vegaani luovuttaja FMT vs. lumelääke).

Ulosteet kerätään lähtötilanteessa ja viikon 2, 8, 10, 16, 18 ja 24 jälkeen suoliston mikrobiomin muutosten tutkimiseksi. Myös suoliston estetoiminnan merkkiaineet arvioidaan.

Veri kerätään lähtötilanteessa ja viikolla 8, 16 ja 24 yleisten maksaentsyymien, glukoositasapainon indikaattoreiden, lipidien sekä yleisten ja NASH-spesifisempien tulehdusparametrien tutkimiseksi.

Moniparametrinen MRI maksasta (MRI-PDFF, MR elastografia, korjattu T1) sekä sisäelinten ja ihonalaisesta rasvasta tehdään lähtötilanteessa ja 24 viikon kuluttua viskeraalisen ja ihonalaisen rasvakudoksen varastotilavuuden, maksan rasvapitoisuuden sekä maksafibroosin ja tulehdus.

Jatkuvat glukoosimittaukset tehdään kotona kannettavilla laitteilla 1 viikon (7 päivän) peräkkäisen ajanjakson aikana lähtötilannetta edeltävällä viikolla, viikkoja 1, 9, 17 ja 25.

Vegaaniluovuttajat

Ulosteen luovuttajan näytteet kerätään, lyofilisoidaan ("pakastekuivataan") ja kapseloidaan (ks. kohta 6.8). Tämän jälkeen LFMT-kapselit säilytetään -80 °C:ssa. Luovuttajien seulotaan laajasti tartuntatautien varalta.

Ensisijainen tulos

Sen osoittamiseksi, että A. soehngenii yhdistettynä pastöroituun A. muciniphilan ja B. animalis subsp. lactis, FOS ja käsitellyt vegaaniset LFMT-kapselit vähentävät NASH:ta, mikä määritellään maksan histologian paranemisena henkilöillä, joilla on NASH ja fibroosi vaihe 0–3, ja parannus määritellään steatohepatiitin vähenemisenä ≥ 1 SAF-A-pisteellä eikä maksafibroosin pahenemisena, tai paraneminen ≥ 1 vaiheen maksafibroosissa eikä steatohepatiitin paheneminen.

Toissijaiset tulokset

Osoittaaksesi, että yhdistetty hoito parantaa:

• NAFLD:n ei-invasiiviset tulokset, eli maksan ja ympäröivän ihonalaisen rasvakudoksen moniparametrinen MRI (MRI-PDFF, MR elastografia, korjattu T1), FibroScan-elastografia ja kontrolloidut vaimennusparametrit ja plasmapaneelin tehostetun maksafibroosin (ELF) paneeli, pro-C3 .
• veren merkkiaineiden muutos lähtötasosta hoidon loppuun, nimittäin: maksaentsyymit (esim. alaniiniaminotransferaasi (ALT), aspartaattiaminotransferaasi (AST), gammaglutamyylitransferaasi (GGT), alkalinen fosfataasi (ALP)), tulehdukselliset veren merkkiaineet (ts. leukosyytit, monosyytit, CRP, IL-1(p), IL-6, IL-11, IL-17, IL-32, TNF-a, IFN-y, muut tulehdusmarkkerit), SCFA (ts. propionaatti, butyraatti, asetaatti), laktaatti, etanoli, plasman lipidit (ts. LDL, HDL, triglyseridit, kokonaiskolesteroli), albumiini, kreatiniini, hemoglobiini, FGF-21, adiponektiini, leptiini, lipopolysakkaridit, estrogeeni, B12-vitamiini, folaattihappo, zonuliini ja muut metaboliset ja lipodomiset tulokset.
• mikrobiomin lukemat (koostumus, istutus, kannan seuranta) ja metaboliitit, ulosteen SCFA-koostumus ja ulosteen albumiini.
• glykeeminen hallinta, insuliiniresistenssi, paino/painoindeksi, vyötärön ympärysmitta ja kehon rasvaprosentti
• MetSy kriteerit / %
• SCFA-tuotanto ja GLP1-julkaisu
• maksan geeniekspressioprofiili: lipogeeniset, tulehdus- ja fibrogeeniset reitit.
• maksan patologia, histopatologiset ominaisuudet, immunofluoresenssi ja patofysiologisten proteiinien arviointi.
• NAFLD-histologia arvioituna syvälle opitulla algoritmilla, joka pisteyttää maksabiopsioiden kokonaisia ​​diakuvia.
• Jatkuva glukoosin seuranta (4 x 7 peräkkäistä päivää)
• elämänlaatu (yleinen (SF36) ja NAFLD/NASH-spesifinen (CDLQ-NAFLD)).