エピソード的および慢性片頭痛における miR-155 の発現

バックグラウンド：

片頭痛は、頭痛の頻度の中央値に応じて、発作性片頭痛 (EM) (1 か月あたりの片頭痛日数が 15 日未満の場合)、または慢性片頭痛 (1 か月あたりの頭痛日数が少なくとも 15 日で、そのうち 8 日である場合) として定義されます。片頭痛の特徴を伴う場合、少なくとも 3 か月間）。 片頭痛の慢性化は、多くの場合、急性薬物摂取量の進行性の増加と関連しており、薬物乱用頭痛 (CM-MOH) として知られる状態を引き起こします。

これまでのところ、片頭痛の検証された信頼できるバイオマーカーはありませんが、頭痛科学界は片頭痛の神経生物学的兆候を熱心に研究しています。 検証された生物学的バイオマーカーにより、次のような方法で片頭痛の管理をいくつか前進させることができる可能性があります。(I) 生物学的特徴に従って診断を精緻化する。 (II) 先進的な治療に対する反応を予測する。 (III) どの患者が片頭痛の慢性化のリスクが最も大きいかを予測し、片頭痛サイクルのさまざまな段階をマークする。 (IV) 医薬品開発のための新規分子標的の同定。 これらの目的を達成するために、最近大きな関心を集めている分子のクラスがマイクロRNA (miRNA) です。 miRNA は、長さが約 22 ヌクレオチドの小さな内因性非コード RNA です。 miRNA は、メッセンジャー RNA (mRNA) の分解を促進したり、mRNA の翻訳を抑制したりすることにより、遺伝子発現の転写後調節因子として機能します。 個々の miRNA が数百の異なる mRNA を標的とする可能性があり、逆に、各 mRNA が複数の miRNA によって制御される可能性があるため、miRNA によって実行される制御プロセスは複雑かつ明確です。 すべてのタンパク質をコードする遺伝子の 60% 以上が miRNA によって制御されており、その結果、分化、発生、シグナル伝達を含むさまざまな細胞プロセスの多面的調節が決定されると推定されています。 miRNA は痛みの発生と維持に関与しており、特定の miRNA が片頭痛に関与している可能性があることを示唆する証拠がいくつかあります。

マイクロ MIG 研究では、EM と CM では対照群と比較して異なる miRNA の発現が変化しているという仮説が裏付けられましたが、強力かつ特異的な片頭痛分子サインとして特定の miRNA は同定されませんでした。

miRNA-155 は、その発現がインターロイキン 1β (IL-1β)、腫瘍壊死因子アルファ (TNF-α)、アラーミン (IL-1α など)、低酸素症、核因子赤血球 2 関連因子 2 (NRF2)、病原体関連および損傷関連の分子パターン、およびさまざまな細胞型のトール様受容体リガンド (TLR) が含まれます。 最近、いくつかの前臨床証拠により、炎症および痛みの発生および維持における miRNA-155 の役割が、実行可能な治療標的としてもさらに強調されました。 miRNA-155 を阻害すると、生体内齧歯動物モデルにおける痛覚過敏や骨癌の痛み、さらには神経障害性の痛みも軽減できます。 したがって、miRNA-155 は、三叉神経血管系で起こると考えられているプロセスである神経原性炎症においても重要な役割を果たし、片頭痛の痛みの根底にある病因メカニズムに関連している可能性があると推測できます。

単球は、片頭痛に関与している可能性がある免疫系の構成要素です。 たとえば、中絶による片頭痛治療は単球の機能に影響を与える可能性があります。 アセチルサリチル酸は単球の走化性を阻害しますが、メトプロロール、メトクロプラミド、ジヒドロエルゴタミン、スマトリプタンは影響を及ぼしません。 マイクロRNAは、マクロファージの極性化とその後の炎症への影響を制御することが示されています。

目的:

片頭痛の病態生理学とその慢性化に関与するメディエーターを明らかにするために、EM、CM-MOH 患者および健康な対照 (HC) の患者における miRNA-155 (単球における) の異なる発現を評価することを目的としています。 第二に、3 つのグループにおける単球表現型の分布に関する情報を提供することを目的としています。

期待される評価:

すべての患者に対して、長期にわたって 1 回の評価が予定されており、その間に次のような検査が行われます。

• インフォームドコンセントへの署名
• スクリーニング訪問
• 臨床および人口統計データの収集（頭痛日記の改訂に基づく）
• 静脈採血 すべての患者は、朝、夜間絶食後、および発作間欠期片頭痛の段階で評価されます。

生化学分析のために計画された方法の詳細な説明は、ここで見つけることができます。

• 10.1186/s10194-020-01189-0;
• 10.1177/0333102420949201。

サンプルサイズの計算:

サンプルサイズは入手可能な予備データから計算され、末梢単核細胞における miR-155 レベルの差は 1.69 RQ (相対定量)、健常対照被験者と発作性片頭痛被験者ではそれぞれ 1.15、標準偏差 2.69 RQ でした。 この違いは、一時的な被験者と慢性的な被験者の間でも同様であると想定されています。

したがって、統計検出力 80 パーセント、有意水準 95 パーセントを仮定し、ボンフェローニ補正を実行すると、3 つの実験グループ (HC、CM-MOH、および EM) に対して 24 人の被験者のサンプル サイズが必要になります。 投与量の変動の可能性を考慮して、グループあたり少なくとも 30 人の被験者を登録します。

事前に計画された統計分析:

CM-MOH、EM、および HC 間の miR155 発現の差は、データの分布に応じてパラメトリック (ANOVA) またはノンパラメトリック (クラスカル-ウォリス) 検定によって決定されます。 パラメトリック相関またはノンパラメトリック相関を使用して、CM-MOH 患者および EM 患者の生化学変数と臨床変数の間の関係を測定します。 単変量解析の結果に基づいて多変量解析が実行されます。 統計的有意性は 5% レベルに設定されます (p<0.05)。