miR-155 在发作性和慢性偏头痛中的表达

背景：

根据头痛的中位频率，偏头痛被定义为发作性偏头痛 (EM)（对于每月偏头痛天数少于 15 天的人）或慢性偏头痛（对于每月头痛天数至少 15 天的人，其中 8 天具有偏头痛特征，至少三个月）。 偏头痛的慢性化通常与急性药物摄入量的逐渐增加有关，从而导致称为药物过度使用性头痛 (CM-MOH) 的病症。

到目前为止，还没有经过验证和可靠的偏头痛生物标志物，但头痛科学界正在深入研究偏头痛的神经生物学特征。 经过验证的生物标志物可以通过以下方式在偏头痛的管理中向前迈出几步：（I）根据生物学特征改进诊断； (II) 预测对先进疗法的反应； (III) 预测哪些患者发生偏头痛慢性化的风险最大，并标记偏头痛周期的不同阶段； (IV) 确定药物开发的新分子靶点。 为了实现这些目的，最近引起极大兴趣的一类分子是 microRNA (miRNA)。 miRNA 是小的内源性非编码 RNA，长度约为 22 个核苷酸。 miRNA 通过促进信使 RNA (mRNA) 降解或抑制 mRNA 翻译来作为基因表达的转录后调节因子。 miRNA 执行的调节过程复杂且明确，因为单个 miRNA 可能针对数百个不同的 mRNA，相反，每个 mRNA 可能受多个 miRNA 调节。 据估计，超过 60% 的蛋白质编码基因受 miRNA 调控，miRNA 决定了涉及分化、发育和信号传导的多种细胞过程的多效性调节。 miRNA 参与疼痛的产生和维持，一些证据表明特定的 miRNA 可能在偏头痛中发挥作用。

micro-MIG 研究证实了这样的假设，即与对照组相比，EM 和 CM 中不同的 miRNA 表达发生了改变，尽管没有特定的 miRNA 被确定为强烈和特定的偏头痛分子特征。

miRNA-155 可以被认为是炎症的主要调节因子，因为它的表达可以调节许多炎症刺激物，例如：白细胞介素 1β (IL-1β)、肿瘤坏死因子 α (TNF-α)、警报素（例如 IL-1α）、缺氧、核因子红细胞 2 相关因子 2 (NRF2)、病原体相关和损伤相关分子模式以及各种细胞类型中的 Toll 样受体配体 (TLR)。 最近，几行临床前证据进一步强调了 miRNA-155 在炎症和疼痛产生和维持中的作用，也是一个可行的治疗靶点。 miRNA-155 的抑制可以减轻体内啮齿动物模型中的痛觉过敏和骨癌疼痛以及神经性疼痛。 因此，可以推断 miRNA-155 也可能在神经源性炎症中发挥重要作用，神经源性炎症应该发生在三叉神经血管系统中，并且与偏头痛的发病机制有关。

单核细胞是可能在偏头痛中起作用的免疫系统成分。 例如，偏头痛治疗失败可能会影响单核细胞功能。 乙酰水杨酸抑制单核细胞趋化性，而美托洛尔、甲氧氯普胺、双氢麦角胺和舒马普坦没有影响。 microRNAs 已被证明可以调节巨噬细胞极化和随后对炎症的影响。

目标：

为了阐明参与偏头痛病理生理学及其慢性化的介质，我们旨在评估 EM、CM-MOH 和健康对照 (HC) 患者中 miRNA-155（在单核细胞中）的不同表达。 其次，我们旨在提供有关三组中单核细胞表型分布的信息。

预期评价：

随着时间的推移，所有患者都安排了一次评估，在此期间他们将接受：

• 签署知情同意书
• 筛选访问
• 临床和人口统计数据收集（基于头痛日记的修订）
• 静脉血采样 所有患者将在早晨、夜间禁食后和发作间期偏头痛期进行评估。

可在此处找到计划用于生化分析的方法的详细说明：

• 10.1186/s10194-020-01189-0；
• 10.1177/0333102420949201。

样本量计算：

根据可用的初步数据计算样本量，显示外周单核细胞中 miR-155 水平的差异为 1.69 RQ（相对定量），健康对照和发作性偏头痛受试者的标准差分别为 1.15 和 2.69 RQ。 这种差异被认为在偶发性和慢性受试者之间是相同的。

因此，假设统计功效为 80%，显着性水平为 95% 并执行 Bonferroni 校正，我们需要为三个实验组（HC、CM-MOH 和 EM）提供 24 名受试者的样本量。 考虑到剂量可能存在差异，我们将在每组中招募至少 30 名受试者。

预先计划的统计分析：

CM-MOH、EM 和 HC 之间 miR155 表达的差异将根据数据分布通过参数 (ANOVA) 或非参数 (Kruskal-Wallis) 测试来确定。 参数或非参数相关性将用于测量 CM-MOH 和 EM 患者的生化变量和临床变量之间的关系。 将根据单变量分析的结果进行多变量分析。 统计显着性将设定在 5% 的水平 (p<0.05)。