Ekspresja miR-155 w epizodycznej i przewlekłej migrenie

Tło:

W zależności od mediany częstości występowania bólu głowy, migrenę definiuje się jako migrenę epizodyczną (EM) (u osób z mniej niż 15 dniami z migreną w miesiącu) lub migrenę przewlekłą (u osób z co najmniej 15 dniami z bólem głowy w miesiącu, z czego 8 z cechami migreny przez co najmniej trzy miesiące). Przewlekłość migreny jest często związana z postępującym wzrostem przyjmowania ostrych leków, co prowadzi do stanu znanego jako ból głowy spowodowany nadużywaniem leków (CM-MOH).

Jak dotąd nie ma zatwierdzonych i wiarygodnych biomarkerów migreny, ale społeczność naukowa zajmująca się bólami głowy intensywnie bada neurobiologiczne sygnatury migreny. Zwalidowane biomarkery biologiczne mogą pozwolić na kilka kroków naprzód w leczeniu migreny poprzez: (I) udoskonalenie diagnozy zgodnie z cechami biologicznymi; (II) przewidywanie odpowiedzi na zaawansowane terapie; (III) przewidywanie, którzy pacjenci są najbardziej narażeni na przewlekłą migrenę i zaznaczanie różnych faz cyklu migreny; (IV) identyfikacja nowych celów molekularnych dla rozwoju leków. Spełniając te cele, klasa cząsteczek, która zyskała ostatnio ogromne zainteresowanie, to mikroRNA (miRNA). miRNA to małe endogenne niekodujące RNA o długości około 22 nukleotydów. miRNA działają jako potranskrypcyjny regulator ekspresji genów, promując degradację informacyjnego RNA (mRNA) lub hamując translację mRNA. Proces regulacji wykonywany przez miRNA jest złożony i wyartykułowany, ponieważ pojedynczy miRNA może być ukierunkowany na setki różnych mRNA i odwrotnie, każdy mRNA może być regulowany przez wiele miRNA. Oszacowano, że ponad 60% wszystkich genów kodujących białka jest regulowanych przez miRNA, które w konsekwencji determinują modulację plejotropową szerokiej gamy procesów komórkowych obejmujących różnicowanie, rozwój i sygnalizację. miRNA są zaangażowane w generowanie i utrzymywanie się bólu, a kilka dowodów sugeruje, że określone miRNA mogą odgrywać rolę w migrenie.

Badanie mikro-MIG potwierdziło hipotezę, że ekspresja różnych miRNA jest zmieniona w EM i CM w porównaniu z grupą kontrolną, chociaż nie zidentyfikowano żadnych specyficznych miRNA jako silnej i specyficznej sygnatury molekularnej migreny.

miRNA-155 można uznać za główny regulator stanu zapalnego, ponieważ jego ekspresja może modulować wiele bodźców zapalnych, takich jak: interleukina 1β (IL-1β), czynnik martwicy nowotworów alfa (TNF-α), alarminy (np. IL-1α), niedotlenienie, czynnik jądrowy związany z czynnikiem 2 związanym z erytroidem 2 (NRF2), wzorce molekularne związane z patogenami i uszkodzeniami, a także z ligandem receptora toll-like (TLR) w różnych typach komórek. Ostatnio kilka linii dowodów przedklinicznych dodatkowo podkreśliło rolę miRNA-155 w powstawaniu i utrzymywaniu stanu zapalnego i bólu, również jako wykonalny cel terapeutyczny. Hamowanie miRNA-155 może złagodzić przeczulicę bólową i ból związany z rakiem kości, a także ból neuropatyczny w modelach gryzoni in vivo. W związku z tym można wywnioskować, że miRNA-155 może również odgrywać ważną rolę w zapaleniu neurogennym, procesie, który ma zachodzić w układzie trójdzielno-naczyniowym i ma związek z mechanizmami patogennymi leżącymi u podstaw bólu migrenowego.

Monocyty są składnikami układu odpornościowego, które mogą odgrywać rolę w migrenie. Na przykład nieudane leczenie migreny może wpływać na czynność monocytów. Kwas acetylosalicylowy hamuje chemotaksję monocytów, podczas gdy metoprolol, metoklopramid, dihydroergotamina i sumatryptan nie mają na to wpływu. wykazano, że mikroRNA regulują polaryzację makrofagów i późniejszy wpływ na stan zapalny.

Celuje:

Aby rzucić światło na mediatory zaangażowane w patofizjologię migreny i jej przewlekłość, naszym celem jest ocena różnej ekspresji miRNA-155 (w monocytach) u pacjentów z EM, CM-MOH i zdrowych osób kontrolnych (HC). Po drugie, naszym celem jest dostarczenie informacji o rozmieszczeniu fenotypu monocytów w trzech grupach.

Oczekiwane oceny:

Dla wszystkich pacjentów planowana jest jednorazowa ocena w czasie, podczas której zostaną poddani:

• podpisanie świadomej zgody
• wizyta przesiewowa
• zbieranie danych klinicznych i demograficznych (na podstawie rewizji dzienniczka bólów głowy)
• pobieranie krwi żylnej Wszyscy pacjenci będą badani rano, po nocnej głodówce oraz w fazie międzynapadowej migreny.

Szczegółowy opis metod planowanych do analiz biochemicznych można znaleźć tutaj:

• 10.1186/s10194-020-01189-0;
• 10.1177/0333102420949201.

Obliczenie wielkości próbki:

Wielkość próby obliczono na podstawie dostępnych danych wstępnych, które wykazały różnicę w poziomach miR-155 w obwodowych komórkach jednojądrzastych wynoszącą 1,69 RQ (kwantyfikacja względna), z odchyleniami standardowymi 1,15 i 2,69 RQ odpowiednio u zdrowych osób z grupy kontrolnej i pacjentów z epizodyczną migreną. Założono, że ta różnica jest taka sama między pacjentami epizodycznymi i przewlekłymi.

Dlatego zakładając moc statystyczną 80 procent, poziom istotności 95 procent i wykonując poprawkę Bonferroniego, potrzebujemy próby o wielkości 24 osób dla trzech grup eksperymentalnych (HC, CM-MOH i EM). Biorąc pod uwagę możliwą zmienność dawkowania, zapiszemy co najmniej 30 pacjentów na grupę.

Zaplanowana analiza statystyczna:

Różnica między ekspresją miR155 wśród CM-MOH, EM i HC zostanie określona za pomocą testów parametrycznych (ANOVA) lub nieparametrycznych (Kruskal-Wallis) w zależności od rozkładu danych. Korelacje parametryczne lub nieparametryczne zostaną wykorzystane do pomiaru związku między zmiennymi biochemicznymi a zmiennymi klinicznymi u pacjentów z CM-MOH i EM. Analizy wielowymiarowe zostaną przeprowadzone zgodnie z wynikami analizy jednowymiarowej. Istotność statystyczna zostanie ustalona na poziomie 5% (p<0,05).