Экспрессия миР-155 при эпизодической и хронической мигрени

Фон:

В зависимости от медианной частоты головной боли мигрень определяется как эпизодическая мигрень (ЭМ) (для тех, у кого менее 15 дней с мигренью в месяц), или хроническая мигрень (для тех, у кого не менее 15 дней с головной болью в месяц, 8 из которых с признаками мигрени не менее трех месяцев). Хронизация мигрени часто связана с прогрессивным увеличением приема острых лекарств, что приводит к состоянию, известному как головная боль от чрезмерного употребления лекарств (CM-MOH).

До сих пор не существует проверенных и надежных биомаркеров мигрени, но научное сообщество, занимающееся проблемами головной боли, интенсивно исследует нейробиологические признаки мигрени. Утвержденные биологические биомаркеры могут позволить сделать несколько шагов вперед в лечении мигрени путем: (I) уточнения диагноза в соответствии с биологическими особенностями; (II) предсказание реакции на передовые методы лечения; (III) предсказание того, какие пациенты подвержены наибольшему риску хронизации мигрени и отмечают различные фазы цикла мигрени; (IV) определение новых молекулярных мишеней для разработки лекарств. Выполняя эти задачи, класс молекул, который в последнее время вызывает огромный интерес, — это микроРНК (миРНК). микроРНК представляют собой небольшие эндогенные некодирующие РНК длиной около 22 нуклеотидов. миРНК действуют как посттранскрипционные регуляторы экспрессии генов, способствуя деградации информационной РНК (мРНК) или подавляя трансляцию мРНК. Процесс регуляции, выполняемый miRNAs, сложен и четко сформулирован, поскольку отдельная miRNA может нацеливаться на сотни различных мРНК, и, наоборот, каждая мРНК может регулироваться несколькими miRNAs. Было подсчитано, что более 60% всех генов, кодирующих белки, регулируются miRNAs, которые впоследствии определяют плейотропную модуляцию широкого спектра клеточных процессов, включающих дифференцировку, развитие и передачу сигналов. miRNAs участвуют в возникновении и поддержании боли, и некоторые данные свидетельствуют о том, что специфические miRNAs могут играть роль при мигрени.

Исследование micro-MIG подтвердило гипотезу о том, что экспрессия различных miRNAs изменена при EM и CM по сравнению с контрольной группой, хотя не было идентифицировано никаких конкретных miRNAs как сильного и специфического молекулярного признака мигрени.

миРНК-155 можно рассматривать как главный регулятор воспаления, поскольку ее экспрессия может модулировать многие воспалительные стимулы, такие как: интерлейкин 1β (IL-1β), фактор некроза опухоли альфа (TNF-α), алармины (например, IL-1α), гипоксия, ядерный фактор, связанный с эритроидом 2, фактор 2 (NRF2), патоген-ассоциированные и связанные с повреждением молекулярные паттерны, а также лиганд толл-подобного рецептора (TLR) в различных типах клеток. Недавно несколько линий доклинических данных дополнительно подчеркнули роль miRNA-155 в возникновении и поддержании воспаления и боли, а также в качестве возможной терапевтической мишени. Ингибирование микроРНК-155 может облегчить гипералгезию и боль при раке кости, а также невропатическую боль в моделях грызунов in vivo. Следовательно, можно сделать вывод, что miRNA-155 может также играть важную роль в нейрогенном воспалении, процессе, который, как предполагается, происходит в тригеминоваскулярной системе и связан с патогенными механизмами, лежащими в основе боли при мигрени.

Моноциты являются компонентами иммунной системы, которые могут играть роль в развитии мигрени. Например, абортивное лечение мигрени может повлиять на функцию моноцитов. Ацетилсалициловая кислота ингибирует хемотаксис моноцитов, тогда как метопролол, метоклопрамид, дигидроэрготамин и суматриптан не действуют. Было показано, что микроРНК регулируют поляризацию макрофагов и последующее воздействие на воспаление.

Цели:

Чтобы пролить свет на медиаторы, участвующие в патофизиологии мигрени и ее хронизации, мы стремимся оценить различную экспрессию miRNA-155 (в моноцитах) у пациентов с EM, CM-MOH и здоровым контролем (HCs). Во-вторых, мы стремимся предоставить информацию о распределении фенотипа моноцитов в трех группах.

Ожидаемые оценки:

Для всех пациентов запланировано однократное обследование с течением времени, в ходе которого они будут проходить:

• подписание информированного согласия
• визит для скрининга
• сбор клинических и демографических данных (на основе ревизии дневника головной боли)
• забор венозной крови Все пациенты будут обследованы утром, после ночного голодания и в межприступной фазе мигрени.

Подробное описание методов, планируемых для биохимических анализов, можно найти здесь:

• 10.1186/с10194-020-01189-0;
• 10.1177/0333102420949201.

Расчет размера выборки:

Размер выборки был рассчитан на основе доступных предварительных данных, которые показали разницу в уровнях миР-155 в периферических мононуклеарных клетках, составляющую 1,69 RQ (относительная количественная оценка), со стандартными отклонениями 1,15 и 2,69 RQ у здорового контроля и пациентов с эпизодической мигренью соответственно. Предполагается, что эта разница одинакова между эпизодическими и хроническими субъектами.

Поэтому, предполагая статистическую мощность 80 процентов, уровень значимости 95 процентов и выполняя поправку Бонферрони, нам нужен размер выборки из 24 субъектов для трех экспериментальных групп (HC, CM-MOH и EM). Учитывая возможную вариабельность дозировки, мы будем регистрировать не менее 30 субъектов в группе.

Предварительно запланированный статистический анализ:

Различие между экспрессией miR155 среди CM-MOH, EM и HC будет определяться параметрическими (ANOVA) или непараметрическими (Крускала-Уоллиса) тестами в зависимости от распределения данных. Параметрические или непараметрические корреляции будут использоваться для измерения взаимосвязи между биохимическими переменными и клиническими переменными у пациентов с CM-MOH и EM. Многомерный анализ будет проводиться по результатам одномерного анализа. Статистическая значимость будет установлена ​​на уровне 5% (p<0,05).