일시적 및 만성 편두통에서의 miR-155 발현

배경:

두통의 빈도 중앙값에 따라 편두통은 삽화성 편두통(EM)(한 달에 편두통 일수가 15일 미만인 사람) 또는 만성 편두통(한 달에 최소 15일 두통 일이 있는 사람, 그 중 8일은 편두통 특징이 있는 경우 최소 3개월 동안). 편두통의 만성화는 종종 급성 약물 섭취의 점진적인 증가와 연관되어 약물 남용 두통(CM-MOH)으로 알려진 상태로 이어집니다.

지금까지 검증되고 신뢰할 수 있는 편두통 바이오마커는 없지만 두통 과학계는 편두통의 신경생물학적 특징을 집중적으로 조사하고 있습니다. 검증된 생물학적 바이오마커는 편두통 관리에서 다음과 같은 몇 가지 단계를 가능하게 합니다. (I) 생물학적 특징에 따라 진단을 세분화합니다. (II) 첨단 치료법에 대한 반응 예측; (III) 편두통 만성화의 위험이 가장 큰 환자를 예측하고 편두통 주기의 다른 단계를 표시합니다. (IV) 약물 개발을 위한 새로운 분자 표적의 식별. 이러한 목적을 달성하기 위해 최근 엄청난 관심을 받고 있는 분자 클래스는 마이크로RNA(miRNA)입니다. miRNA는 길이가 약 22개 뉴클레오티드인 작은 내인성 비암호화 RNA입니다. miRNA는 메신저 RNA(mRNA) 분해를 촉진하거나 mRNA 번역을 억제함으로써 유전자 발현의 전사 후 조절자로 작동합니다. miRNA에 의해 수행되는 조절 과정은 개별 miRNA가 수백 개의 서로 다른 mRNA를 대상으로 할 수 있고 반대로 각 mRNA가 여러 miRNA에 의해 조절될 수 있기 때문에 복잡하고 명확합니다. 모든 단백질 코딩 유전자의 60% 이상이 분화, 발달 및 신호 전달을 포함하는 다양한 세포 과정의 다발성 조절을 결과적으로 결정하는 miRNA에 의해 조절되는 것으로 추정됩니다. miRNA는 통증의 생성 및 유지에 관여하며 특정 miRNA가 편두통에서 역할을 할 수 있음을 시사하는 몇 가지 증거가 있습니다.

micro-MIG 연구는 특정 miRNA가 강력하고 특정한 편두통 분자 시그니처로 확인되지 않았지만 대조군과 비교할 때 EM 및 CM에서 다른 miRNA 발현이 변경된다는 가설을 확증했습니다.

miRNA-155는 인터루킨 1β(IL-1β), 종양 괴사 인자 알파(TNF-α), 알라민(예: IL-1α), 저산소증, NRF2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2), 병원체 관련 및 손상 관련 분자 패턴, 다양한 세포 유형의 toll-like receptor ligand(TLR). 최근 몇 가지 전임상 증거가 miRNA-155가 염증과 통증 생성 및 유지에 있어 실행 가능한 치료 표적으로서의 역할을 더욱 강조했습니다. miRNA-155의 억제는 생체 내 설치류 모델에서 통각 과민 및 골암 통증뿐만 아니라 신경 병성 통증을 완화시킬 수 있습니다. 따라서 miRNA-155는 삼차신경혈관계에서 일어나는 것으로 추정되는 과정인 신경성 염증에 중요한 역할을 하고 편두통 통증의 기저에 있는 병원성 메커니즘과 관련이 있다고 추론할 수 있습니다.

단핵구는 편두통에서 역할을 할 수 있는 면역 체계 구성 요소입니다. 예를 들어, 낙태 편두통 치료는 단핵구 기능에 영향을 줄 수 있습니다. 아세틸살리실산은 단핵구 화학주성을 억제하는 반면, 메토프롤롤, 메토클로프라미드, 디하이드로에르고타민 및 수마트립탄은 영향을 미치지 않습니다. microRNA는 대식세포 분극화 및 염증에 대한 후속 효과를 조절하는 것으로 나타났습니다.

목표:

편두통 병태생리학 및 그 만성화에 관여하는 매개체를 밝히기 위해 우리는 EM, CM-MOH 및 건강한 대조군(HC) 환자에서 miRNA-155(단핵구에서)의 다른 발현을 평가하는 것을 목표로 합니다. 둘째, 우리는 세 그룹에서 단핵구 표현형의 분포에 대한 정보를 제공하는 것을 목표로 합니다.

예상 평가:

모든 환자에 대해 시간이 지남에 따라 단일 평가가 예정되어 있으며 그 동안 그들은 다음을 받게 됩니다.

• 정보에 입각한 동의 서명
• 스크리닝 방문
• 임상 및 인구통계학적 데이터 수집(두통 일지 수정에 기초함)
• 정맥혈 샘플링 모든 환자는 아침, 야간 금식 후, 발작 간 편두통 단계에서 평가됩니다.

생화학적 분석을 위해 계획된 방법에 대한 자세한 설명은 여기에서 찾을 수 있습니다.

• 10.1186/s10194-020-01189-0;
• 10.1177/0333102420949201.

샘플 크기 계산:

샘플 크기는 1.69 RQ(상대 정량화)의 말초 단핵 세포에서 miR-155 수준의 차이를 보여주는 예비 데이터로부터 계산되었으며, 표준 편차는 1.15, 건강한 대조군과 간헐적 편두통 환자에서 각각 2.69 RQ였습니다. 이 차이는 일시적인 주제와 만성적인 주제 사이에서 동일하다고 가정되었습니다.

따라서 통계적 검정력을 80%, 유의 수준을 95%로 가정하고 Bonferroni 보정을 수행하면 3개의 실험 그룹(HCs, CM-MOH 및 EM)에 대해 24명의 표본 크기가 필요합니다. 투여량의 변동 가능성을 고려하여 그룹당 최소 30명의 피험자를 등록할 것입니다.

사전 계획된 통계 분석:

CM-MOH, EM 및 HC 중 miR155 발현의 차이는 데이터 분포에 따라 파라메트릭(ANOVA) 또는 비모수(Kruskal-Wallis) 테스트에 의해 결정됩니다. CM-MOH 및 EM 환자의 생화학적 변수와 임상 변수 사이의 관계를 측정하기 위해 매개변수 또는 비모수 상관관계가 사용됩니다. 다변량 분석은 단변량 분석 결과에 따라 수행됩니다. 통계적 유의성은 5% 수준(p<0.05)에서 설정됩니다.