miR-155 expresszió epizodikus és krónikus migrénben

Háttér:

A fejfájás medián gyakoriságától függően a migrént epizodikus migrénnek (EM) nevezik (azok számára, akiknek kevesebb, mint 15 migrénes napjuk van havonta), vagy krónikus migrénnek (azoknak, akiknek legalább 15 fejfájása van havonta, ebből 8). migrénes tünetekkel, legalább három hónapig). A migrén krónikussá válása gyakran összefüggésbe hozható az akut gyógyszerbevitel fokozatos növekedésével, ami a gyógyszeres túlhasználatos fejfájás (CM-MOH) néven ismert állapothoz vezet.

A migrénnek egyelőre nincsenek validált és megbízható biomarkerei, de a fejfájás tudományos közössége intenzíven vizsgálja a migrén neurobiológiai jeleit. A validált biológiai biomarkerek számos előrelépést tehetnek lehetővé a migrén kezelésében: (I) a diagnózis finomítása a biológiai jellemzők szerint; (II) a fejlett terápiákra adott válasz előrejelzése; (III) annak előrejelzése, hogy mely betegeknél van a legnagyobb a migrén krónikussá válásának kockázata, és megjelöli a migrénes ciklus különböző fázisait; (IV) új molekuláris célpontok azonosítása a gyógyszerfejlesztéshez. E célokat teljesítve a molekulák egy osztálya, amely a közelmúltban óriási érdeklődést váltott ki, a mikroRNS-ek (miRNS-ek). A miRNS-ek kicsi, endogén, nem kódoló RNS-ek, amelyek körülbelül 22 nukleotid hosszúak. A miRNS-ek a génexpresszió poszt-transzkripciós szabályozójaként működnek azáltal, hogy elősegítik a hírvivő RNS (mRNS) lebomlását vagy elnyomják az mRNS transzlációt. A miRNS-ek által végrehajtott szabályozási folyamat összetett és tagolt, mivel egy egyedi miRNS több száz különböző mRNS-t célozhat meg, és fordítva, minden mRNS-t több miRNS is szabályozhat. Becslések szerint az összes fehérjét kódoló gén több mint 60%-át miRNS-ek szabályozzák, amelyek következésképpen meghatározzák számos sejtfolyamat pleiotróp modulációját, beleértve a differenciálódást, fejlődést és jelátvitelt. A miRNS-ek részt vesznek a fájdalom kialakulásában és fenntartásában, és számos bizonyíték arra utal, hogy a specifikus miRNS-ek szerepet játszhatnak a migrénben.

A mikro-MIG vizsgálat megerősítette azt a hipotézist, hogy a különböző miRNS-ek expressziója megváltozik EM-ben és CM-ben a kontrollcsoporthoz képest, bár nem azonosítottak specifikus miRNS-eket erős és specifikus migrén molekuláris aláírásként.

A miRNS-155 a gyulladás fő szabályozójának tekinthető, mivel expressziója számos gyulladásos ingert modulálhat, mint például: interleukin 1β (IL-1β), tumor nekrózis faktor alfa (TNF-α), alarminek (pl. IL-1α), hipoxia, nukleáris faktor eritroid 2-vel kapcsolatos 2-es faktor (NRF2), kórokozó-asszociált és károsodással összefüggő molekuláris mintázatok, valamint a toll-like receptor ligand (TLR) különböző sejttípusokban. A közelmúltban több preklinikai bizonyíték is rávilágított a miRNS-155 szerepére a gyulladás és a fájdalom kialakulásában és fenntartásában, mint megvalósítható terápiás célpont. A miRNS-155 gátlása enyhítheti a hiperalgéziát és a csontrák fájdalmát, valamint a neuropátiás fájdalmat in vivo rágcsálómodellekben. Ebből arra következtethetünk, hogy a miRNS-155 fontos szerepet játszhat a neurogén gyulladásban is, amely folyamat feltételezhetően a trigeminovaszkuláris rendszerben játszódik le, és a migrénes fájdalom hátterében álló patogén mechanizmusokhoz kapcsolódik.

A monociták az immunrendszer összetevői, amelyek szerepet játszhatnak a migrénben. Például az abortív migrénkezelés befolyásolhatja a monociták működését. Az acetilszalicilsav gátolja a monocita kemotaxist, míg a metoprolol, a metoklopramid, a dihidroergotamin és a szumatriptán nincs hatással. Kimutatták, hogy a mikroRNS-ek szabályozzák a makrofágok polarizációját és az ezt követő gyulladásos hatásokat.

Célok:

A migrén patofiziológiájában és annak kronizálásában szerepet játszó mediátorok feltárása érdekében célunk a miRNS-155 (monocitákban) eltérő expressziójának felmérése EM, CM-MOH és egészséges kontrollok (HC) betegekben. Másodszor, arra törekszünk, hogy információt nyújtsunk a monocita fenotípus megoszlásáról a három csoportban.

Várható értékelések:

Minden beteg esetében egyetlen időbeli értékelést terveznek, amelynek során a következőket vetik alá:

• tájékozott hozzájárulás aláírása
• szűrőlátogatás
• klinikai és demográfiai adatgyűjtés (fejfájásnapló átdolgozása alapján)
• vénás vérvétel Minden beteget reggel, éjszakai koplalás után és az inter-iktális migrénes fázisban értékelnek.

A biokémiai vizsgálatokhoz tervezett módszerek részletes leírása itt található:

• 10.1186/s10194-020-01189-0;
• 10.1177/0333102420949201.

Mintaméret számítás:

A minta méretét a rendelkezésre álló előzetes adatok alapján számítottuk ki, amelyek a perifériás mononukleáris sejtekben 1,69 RQ (relatív kvantifikáció) eltérést mutattak a miR-155 szintjében, 1,15 és 2,69 RQ szórással az egészséges kontroll és az epizodikus migrénes alanyokban. Ezt a különbséget azonosnak feltételezték az epizodikus és krónikus betegek között.

Ezért 80 százalékos statisztikai erőt, 95 százalékos szignifikanciaszintet feltételezve és Bonferroni-korrekciót végezve a három kísérleti csoportban (HCs, CM-MOH és EM) 24 fős mintára van szükségünk. Figyelembe véve az adagolás lehetséges változatosságát, csoportonként legalább 30 alanyt veszünk fel.

Előre tervezett statisztikai elemzés:

A miR155 expressziója közötti különbséget a CM-MOH, EM és HC-k között parametrikus (ANOVA) vagy nem-parametrikus (Kruskal-Wallis) tesztekkel határozzuk meg az adatok eloszlásától függően. Paraméteres vagy nem paraméteres korrelációkat fogunk használni a biokémiai változók és a klinikai változók közötti kapcsolat mérésére CM-MOH és EM betegeknél. A többváltozós elemzések az egyváltozós elemzés eredményeinek megfelelően kerülnek végrehajtásra. A statisztikai szignifikancia 5%-os szinten lesz beállítva (p<0,05).