CRSwNPにおけるメポリズマブに対する反応の予測因子の特定 (ISS-RESMEPO)

研究の理論的根拠:

研究者らは、SYNAPSE試験で見られたCRSwNP患者におけるメポリズマブによる治療に対する長期反応の根本的な作用機序を調査する野心的な研究プログラムを提案している。 さらに、研究者らは、新型コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）のパンデミックから得られた知見にヒントを得た、免疫反応に対するウイルスの干渉という概念に基づいて、ウイルス疾患と好酸球増加症との関連性を確立しようとしている。

研究デザイン:

この単中心前向きコホート研究では、2人の熟練研究者がCRSwNPに対するメポリズマブの疾患修飾効果を評価します。 この研究は、メポリズマブに対する長期反応を支えるメカニズムを「現実世界」で特定し、長期反応を予測するバイオマーカーを特定することを目的としている。 内科的治療や外科的治療に反応しないCRSwNP患者36人が、非盲検かつ非ランダム化方式（非盲検）で12カ月間のメポリズマブで治療される。

反応は、鼻腔内視鏡検査などの通常の臨床パラメーターを使用して評価されます。 反応のメカニズムは、マルチオミクスアプローチによる治療開始前と治療開始後6か月後に詳しく調査されます。 長期的な効果は臨床評価によってのみ評価されます。

1. CRSwNP におけるメポリズマブの作用機序をマルチオミクスで解明します。 研究者らは、細胞型特異的な観点から罹患組織の転写パターンに寄与する重要な機構を調査し、ウイルス感染がCRSに寄与するかどうかを調査する予定である。 同じ細胞からの遺伝子発現とオープンクロマチンの同時プロファイリングを使用して、トランスポザーゼがアクセス可能なクロマチンのアッセイと組み合わせた RNA-seq により、特定された細胞クラスター内のエピジェネティック修飾を捕捉します (Chromium Single-Cell Multiome ATAC + Gene Expression、10X Genomics)。 。

2. 上皮再生能力の in vitro 機能評価により、メポリズマブ治療後の上皮再生と修復の改善を確認します。

   研究者らは、インビトロ創傷治癒モデルを使用して、治療開始前および治療開始6か月後の患者の鼻ポリープ生検からのPECの増殖と細胞遊走を評価する予定である。 各時点は、免疫蛍光アッセイ用の Lab-Tek チャンバー スライド上の培養物とともにペトリ (患者あたり 3 ウェル) 上で 3 回評価されます。 組織修復能力の機能的評価は、標準化された損傷後の修復速度によって評価されます。 免疫蛍光は、上皮のマーカー (チューブリン、カドヘリン、ビメンチンなど) および上皮機能 (密着結合、閉塞小帯、インテグリンなど) を、また創傷部位の増殖マーカー (Ki-67) の存在によって評価します。

3. 応答者集団の潜在的なバイオマーカーとして機能する、関連する応答のエピジェネティック マークを特定します。

   上で説明したように、ゲノムのエピジェネティックな調節は、マルチオーム プロファイリングにおいて単一細胞レベルで評価されます。 エピジェネティックプロファイリングをバイオマーカーとして使用できる可能性のあるエピジェネティック修飾に限定するために、DNAメチル化プロファイリングをDNA MmethylationEPIC Beadchipによって実行し、治療に対する応答の推定バイオマーカーを特定し、メチル化関連の制御機構を特定します。

4. CRSwNP に存在するウイルスのライブラリを定義し、メポリズマブによる治療前後のレベルを比較することにより、ウイルスに対するメポリズマブの影響を特徴付けます。

   研究者らは、ディープシーケンシング技術（イルミナのハイスループットRNAシークエンシング）を使用して配列ベースのプロファイリングを実行し、当施設にある既存のCRSwNP組織の新型コロナウイルス以前のバイオバンクを使用して候補ウイルス病原体を明らかにし、CRSwNPに存在するウイルスの種類を定義します。 同様に、メポリズマブによる治療を受けている集団のウイルスを評価して、治療がウイルス量および特定のウイルスに影響を与えるかどうかを評価します。

5. 以前のウイルス感染のマーカーとして機能する、さまざまなウイルスの存在に関連するエピジェネティック マークを特定します。

研究者らは、エピゲノミクスおよびトランスクリプトミクス手法を使用して、得られたデータを統合的に分析することで、ウイルスとエピジェネティックマークの間の特異的な関連性を調査します。

患者は12か月にわたって追跡調査される予定だ。