识别 CRSwNP 中美泊利单抗反应的预测因子 (ISS-RESMEPO)

研究理由：

研究人员提出了一项雄心勃勃的研究计划，以调查在 SYNAPSE 试验中观察到的 CRSwNP 患者对美泊利单抗治疗的长期反应的潜在作用机制。 此外，研究人员基于受 COVID-19 大流行发现启发的病毒干扰免疫反应的概念，试图确定病毒性疾病与嗜酸性粒细胞增多症之间的联系。

学习规划：

在这项单中心前瞻性队列研究中，两名经验丰富的研究人员将评估美泊利单抗对 CRSwNP 的疾病缓解作用。 本研究旨在确定“真实世界”环境中支持美泊利单抗延长反应的机制，并确定可预测延长反应的生物标志物。 36 名对药物和手术治疗无反应的 CRSwNP 患者将以非盲法和非随机方式（开放标签）接受 12 个月的美泊利单抗治疗。

反应将通过常用的临床参数进行评估，包括鼻窦内窥镜检查。 将在多组学方法治疗开始前和治疗开始后 6 个月深入探讨反应机制。 长期效果将仅通过临床评估来评估。

1. 使用多组学确定美泊利单抗在 CRSwNP 中的作用机制。 研究人员将从特定细胞类型的角度探索导致病变组织转录模式的关键机制，并探索病毒感染是否会导致 CRS。 来自同一细胞的基因表达和开放染色质的同时分析将用于通过 RNA-seq 结合转座酶可及染色质分析（Chromium Single-Cell Multiome ATAC + Gene expression，10X Genomics）捕获已识别细胞簇中的表观遗传修饰.

2. 通过上皮再生能力的体外功能评估，确认美泊利单抗治疗后上皮再生和修复得到改善。

   使用体外伤口愈合模型，研究人员将评估患者在治疗开始前和治疗后 6 个月的鼻息肉活检中 PEC 的增殖和细胞迁移。 每个时间点将在培养皿（3 个孔/患者）上进行三次评估，同时在 Lab-Tek 室载玻片上进行培养以进行免疫荧光测定。 组织修复能力的功能评估将通过标准化损伤后的修复速度来评估。 免疫荧光将评估上皮细胞的标记物（微管蛋白、钙粘蛋白、波形蛋白等）和上皮功能（紧密连接、小带闭合、整合素等）以及伤口部位是否存在增殖标记物 (Ki-67)。

3. 确定相关的反应表观遗传标记，这些标记可以作为反应者群体的潜在生物标记。

   如上所述，基因组的表观遗传调控将在多组学分析中的单细胞水平上进行评估。 为了将表观遗传分析限制为可能用作生物标志物的表观遗传修饰，DNA 甲基化分析将通过 DNA MethylationEPIC Beadchip 进行，以确定对治疗有反应的推定生物标志物并确定甲基化相关的调节机制。

4. 通过定义 CRSwNP 中存在的病毒库并将它们在治疗前后的水平与美泊利单抗进行比较，来表征美泊利单抗对病毒的影响。

   研究人员将使用深度测序技术（Illumina 高通量 RNA 测序）进行基于序列的分析，以使用我们机构现有的 CRSwNP 组织的 COVID 前生物库来揭示候选病毒病原体，以确定 CRSwNP 中存在的病毒类型。 同样，将在接受美泊利单抗治疗的人群中评估病毒，以评估治疗是否影响病毒负荷和特定病毒。

5. 识别与不同病毒的存在相关的表观遗传标记，这些标记可以作为先前病毒感染的标记。

研究人员将使用表观基因组学和转录组学方法对结果数据进行综合分析，研究病毒和表观遗传标记之间的特定关联。

将对患者进行为期 12 个月以上的随访。